ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°Β β Π»Π°ΠΌΠΏΡ, ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π²Β Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅Β β ΠΆΡΡΠ½Π°Π» ΠΠ°Β ΡΡΠ»Π΅ΠΌ
ΠΡ ΠΈΡΠΏΡΠ°Π²Π½ΠΎΡΡΠΈ Π²Π½Π΅ΡΠ½ΠΈΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠ² Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΡ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΡ — Π½Π΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π²Π°ΡΠ° ΠΈ Π²Π°ΡΠΈΡ ΠΏΠ°ΡΡΠ°ΠΆΠΈΡΠΎΠ², Π½ΠΎ ΠΈ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΡΡΠ°ΡΡΠ½ΠΈΠΊΠΎΠ² Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π²ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ. ΠΠΎΡ ΠΏΠΎΡΠ΅ΠΌΡ ΠΊΡΠ°ΠΉΠ½Π΅ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ Π·Π½Π°ΡΡ, ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠΌΠΎΡΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ Π² ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠ°Ρ Π²Π°ΡΠ΅ΠΉ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°, ΠΈ ΡΠΌΠ΅ΡΡ Π² ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΈΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡ.
ΠΠ·Β ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ, ΠΏΠ°ΡΡΠ°ΠΆΠΈΡΠΎΠ² ΠΈΒ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈ Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π²ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈΒ Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌ ΡΠ΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠΌ ΠΎΒ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΊΠΎΠ»Π΅ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ² Π·Π°ΠΏΡΠ΅ΡΠ΅Π½Π° ΡΠΊΡΠΏΠ»ΡΠ°ΡΠ°ΡΠΈΡ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ, Π²Π½Π΅ΡΠ½ΠΈΠ΅ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΡ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π½Π΅Β ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡ ΡΡΠ΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π°. ΠΠ΅Π΄Ρ, ΡΒ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΡΠΎΡΠΎΠ½Ρ, Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ, ΡΡΠΎΠ±Ρ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ Π±ΡΠ» Ρ ΠΎΡΠΎΡΠΎ Π²ΠΈΠ΄Π΅Π½ Π½Π°Β Π΄ΠΎΡΠΎΠ³Π΅, Π°Β ΡΒ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΉΒ β ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎ ΠΎΡΠ»Π΅ΠΏΠΈΡΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΡΠ»ΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΡΡΠΊΠΈΠΌ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠ΅Π½Π½ΡΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ ΡΠ°Ρ. Π Π°Π±ΠΎΡΠ°ΡΡΠΈΠ΅ ΡΡΠΎΠΏ-ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Ρ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡ Π΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΡ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΡΡ Π΄ΠΈΡΡΠ°Π½ΡΠΈΡ Π΄Π²ΠΈΠ³Π°ΡΡΠΈΠΌΡΡ Π·Π°Β Π²Π°ΠΌΠΈ Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠΌ. Π’Π°ΠΊΠΈΡ Π½ΡΠ°Π½ΡΠΎΠ² ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ, ΠΈΒ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΡΠ±Π΅ΡΠ΅ΡΡ Π½Π΅Β ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π° ΠΈΒ Π½Π΅ΡΠ²Ρ, Π½ΠΎΒ ΡΠ°ΡΡΠΎ ΠΈΒ Π·Π΄ΠΎΡΠΎΠ²ΡΠ΅.
===
ΠΠ°ΠΌΠΏΡ, ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π²Β Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°ΠΠ°ΠΌΠΏΡ, ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π²Β Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°
ΠΠ°ΠΌΠΏΡ, ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ Π²Β Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°
[14Β ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΠΉ ΠΏΠΎΒ ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Lada Granta, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π²Π°ΠΌ ΡΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡΡ]
[ΠΠ°ΠΊ ΡΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡΡ Π½Π°Β ΠΏΠ»Π°Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΌ Π’ΠΒ Lada Granta]Β [Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Lada Granta Π½Π°Β 2,5 ΡΡΡ. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Lada Granta Π½Π°Β 15Β 000Β ΠΈ 105Β 000Β ΠΊΠΌ ΠΏΡΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Lada Granta Π½Π°Β 30Β 000Β ΠΈ 60Β 000Β ΠΊΠΌ ΠΏΡΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Lada Granta Π½Π°Β 45Β ΡΡΡ. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Lada Granta 75Β ΡΡΡ. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π’Π΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Lada Granta Π½Π°Β 90Β ΡΡΡ. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π‘Π°ΠΌΠΎΡΡΠΎΡΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π’ΠΒ β ΠΎΠ±ΡΠΈΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄Π°ΡΠΈΠΈ]Β [ΠΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π° ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠΈ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡΠΎΡΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ Π’Π]Β [ΠΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½Ρ, Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡΠΉ Π΄Π»ΡΒ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ Lada Granta]Β
ΠΠ°ΡΠ΅ Π½ΠΎΠ²ΠΎΠ΅ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ
ΠΠΎΠ½ΡΠ°Π²ΠΈΠ»Π°ΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ°? ΠΠΎΠ΄ΠΏΠΈΡΠΈΡΡ ΠΈΒ Π±ΡΠ΄Π΅ΡΡ Π²ΡΠ΅Π³Π΄Π° Π²Β ΠΊΡΡΡΠ΅!
ΠΠ°Β ΡΡΠ»Π΅ΠΌ Π½Π°Β Π―Π½Π΄Π΅ΠΊΡ.ΠΠ·Π΅Π½Page not found — Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°Π½ΡΠ°Π» Π·Π°ΠΊΠ°Π· Π°Π²ΡΠΎΠΊΠ½ΠΈΠ³ Ρ Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΊΠΎΠΉ Π² Π»ΡΠ±ΡΡ ΡΠΎΡΠΊΡ ΠΌΠΈΡΠ°
ΠΡΠ±ΠΎΠΉ ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³ΡΡΠ·ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°ΡΡ ΠΈ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡΠΎΡΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ, Π² ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΠΎΠΌ Π³Π°ΡΠ°ΠΆΠ΅. ΠΡΠ΅ ΡΡΠΎ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ β Π½Π°Π±ΠΎΡ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ° ΠΈ Π·Π°Π²ΠΎΠ΄ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠΎΠ±Π½ΡΠΌ (ΠΏΠΎΡΠ°Π³ΠΎΠ²ΡΠΌ) ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΠΉ. Π’Π°ΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΡ ΡΠΈΠΏΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ΠΌΡΡ ΡΠΊΡΠΏΠ»ΡΠ°ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΡ ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΉ, ΠΌΠ°ΡΠ΅Π» ΠΈ ΡΠΌΠ°Π·ΠΎΠΊ, Π° ΡΠ°ΠΌΠΎΠ΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅ β ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡ Π·Π°ΡΡΠΆΠΊΠΈ Π²ΡΠ΅Ρ ΡΠ΅Π·ΡΠ±ΠΎΠ²ΡΡ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠΉ Π΄Π΅ΡΠ°Π»Π΅ΠΉ ΡΠ·Π»ΠΎΠ² ΠΈ Π°Π³ΡΠ΅Π³Π°ΡΠΎΠ² Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ. ΠΡΠ°Π»ΡΡΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ β Fiat (Π€ΠΈΠ°Ρ) Alfa Romeo (ΠΠ»ΡΡΠ° Π ΠΎΠΌΠ΅ΠΎ) Lancia (ΠΡΠ½ΡΠ°) Ferrari (Π€Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈ) Mazerati (ΠΠ°Π·Π΅ΡΠ°ΡΠΈ) ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΡΠ²ΠΎΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π² ΠΎΡΠΎΠ±ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΠΈΡΡ Π²ΡΠ΅ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ·ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ β Peugout (ΠΠ΅ΠΆΠΎ), Renault (Π Π΅Π½ΠΎ) ΠΈ Citroen (Π‘ΠΈΡΡΠΎΠ΅Π½). ΠΠ΅ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΡΠ΅. ΠΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎ ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΡΡ ΠΊ Mercedes Benz (ΠΠ΅ΡΡΠ΅Π΄Π΅Ρ ΠΠ΅Π½Ρ), BMW (ΠΠΠ), Audi (ΠΡΠ΄ΠΈ) ΠΈ Porsche (ΠΠΎΡΡ), Π² ΡΡΡΡ ΠΌΠ΅Π½ΡΡΠ΅ΠΉ — ΠΊ Volkswagen (Π€ΠΎΠ»ΡΠΊΡΠ²Π°Π³Π΅Π½) ΠΈ Opel (ΠΠΏΠ΅Π»Ρ). Π‘Π»Π΅Π΄ΡΡΡΡΡ Π±ΠΎΠ»ΡΡΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΠΎΠ±ΠΎΡΠΎΠ±Π»Π΅Π½Π½ΡΡ ΠΏΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΌ ΠΏΡΠΈΠ·Π½Π°ΠΊΠ°ΠΌ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ Π°ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΊΠ°Π½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ- Chrysler, Jeep, Plymouth, Dodge, Eagle, Chevrolet, GMC, Cadillac, Pontiac, Oldsmobile, Ford, Mercury, Lincoln. ΠΠ· ΠΠΎΡΠ΅ΠΉΡΠΊΠΈΡ ΡΠΈΡΠΌ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅Ρ ΠΎΡΠΌΠ΅ΡΠΈΡΡ Hyundai/Kia, GM-DAT (Daewoo), SsangYong.
Π‘ΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌ Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΎ ΡΠΏΠΎΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ°Π»ΠΈΡΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠ½Π°ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡΡΡ ΠΈ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠ΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π½Π° Π·Π°ΠΏΠ°ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ°ΡΡΠΈ, Π½ΠΎ Π² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½Π΅Π΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΠ½ΠΈ Π΄ΠΎΠ³Π½Π°Π»ΠΈ ΠΏΠΎ ΡΡΠΈΠΌ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»ΡΠΌ ΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΆΠ½ΡΠ΅ Π΅Π²ΡΠΎΠΏΠ΅ΠΉΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈ. ΠΡΠΈΡΠ΅ΠΌ ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΡΡ ΠΏΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π² ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½ΠΈ ΠΊΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌ ΠΌΠ°ΡΠΊΠ°ΠΌ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ ΠΈΠ· ΡΡΡΠ°Π½Ρ Π²ΠΎΡΡ ΠΎΠ΄ΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠΎΠ»Π½ΡΠ° β Toyota (Π’ΠΎΠΉΠΎΡΠ°), Mitsubishi (ΠΠΈΡΡΠ±ΠΈΡΠΈ), Subaru (Π‘ΡΠ±Π°ΡΡ), Isuzu (ΠΡΡΠ΄Π·Ρ), Honda (Π₯ΠΎΠ½Π΄Π°), Mazda (ΠΠ°Π·Π΄Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ ΠΠ°ΡΡΠ΄Π°), Suzuki (Π‘ΡΠ·ΡΠΊΠΈ), Daihatsu (ΠΠ°ΠΉΡ Π°ΡΡΡ), Nissan (ΠΠΈΡΡΠ°Π½). ΠΡ, Π° ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ, Π²ΡΠΏΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ΄ ΡΠΏΠΎΠ½ΠΎ-Π°ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΊΠ°Π½ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ Π±ΡΠ΅Π½Π΄Π°ΠΌΠΈ Lexus (ΠΠ΅ΠΊΡΡΡ), Scion (Π‘ΡΠΈΠΎΠ½), Infinity (ΠΠ½ΡΠΈΠ½ΠΈΡΠΈ), Acura (ΠΠΊΡΡΠ°) Ρ ΡΠ°ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΡΠ°Π»Π° Π±ΡΠ»ΠΈ Π½Π΅Π΄Π΅ΡΠ΅Π²ΡΠΌΠΈ.
Β
ΠΡΠ΅ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Ρ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½ΠΎΡΠΌ Π΅Π²ΡΠΎ-3. Π»Π°Π΄Π° ΠΊΠ°Π»ΠΈΠ½Π°, Π»Π°Π΄Π° ΠΏΡΠΈΠΎΡΠ° ΠΈ Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π»Π°Π΄Π° Π½ΠΈΠ²Π° 4Ρ 4 ΡΠ΅ΠΏΠ΅ΡΡ Π·Π½Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½Π΅Π΅ Π² ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ ΠΈ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΠ΅.
ΡΡΠΎ Π΄Π΅Π»Π°ΡΡ Π΅ΡΠ»ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Π° Π½Π΅ Π·Π°Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ, ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°ΡΡΠ΄ΠΈΡΡ Π°ΠΊΠΊΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΎΡ, ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ Π² ΠΌΠΎΡΠΎΠ·. ΠΎΡΠ²Π΅ΡΡ Π½Π° ΡΡΠΈ Π²ΠΎΠΏΡΠΎΡΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π½Π°ΠΉΡΠΈ Π½Π° ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΠ°Ρ ΡΠ°ΠΉΡΠ° ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³. ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½Π½ΡΡ Π·Π΄Π΅ΡΡ ΠΆΠ΅
ΠΠ²ΡΠΎΠΌΠ°Π½ΡΠ°Π» — ΠΎΡ Π°Π½Π³Π». manual — ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ. ΠΠΎΡΠΎΠ±ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠΎΡΠΎΡΠΈΠΊΠ»Π°. ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ°ΡΡ Π·Π°Π²ΠΎΠ΄ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π° ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³ΠΈ , Π²ΡΠΏΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΈΠ·Π΄Π°ΡΠ΅Π»ΡΡΡΠ²Π°ΠΌΠΈ.
CΠ°ΠΉΡ ΠΠ²ΡΠΎΠΌΠ°Π½ΡΠ°Π» Π½Π΅ Π½Π΅ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ Π·Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΡΡΠ°ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ»ΡΡΠ°ΠΈ, ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΡΠ΅ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ°Π·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ.
Page not found — Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°Π½ΡΠ°Π» Π·Π°ΠΊΠ°Π· Π°Π²ΡΠΎΠΊΠ½ΠΈΠ³ Ρ Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΊΠΎΠΉ Π² Π»ΡΠ±ΡΡ ΡΠΎΡΠΊΡ ΠΌΠΈΡΠ°
ΠΠΠ¨Π ΠΠΠ Π’ΠΠΠ Π«:
ΠΡΠ±ΠΎΠΉ ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³ΡΡΠ·ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°ΡΡ ΠΈ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡΠΎΡΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ, Π² ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΠΎΠΌ Π³Π°ΡΠ°ΠΆΠ΅. ΠΡΠ΅ ΡΡΠΎ Π΄Π»Ρ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ β Π½Π°Π±ΠΎΡ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ° ΠΈ Π·Π°Π²ΠΎΠ΄ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΠΎ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡ Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠΎΠ±Π½ΡΠΌ (ΠΏΠΎΡΠ°Π³ΠΎΠ²ΡΠΌ) ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΠΉ. Π’Π°ΠΊΠΎΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΡ ΡΠΈΠΏΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ΠΌΡΡ ΡΠΊΡΠΏΠ»ΡΠ°ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΡ ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΉ, ΠΌΠ°ΡΠ΅Π» ΠΈ ΡΠΌΠ°Π·ΠΎΠΊ, Π° ΡΠ°ΠΌΠΎΠ΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅ β ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡ Π·Π°ΡΡΠΆΠΊΠΈ Π²ΡΠ΅Ρ ΡΠ΅Π·ΡΠ±ΠΎΠ²ΡΡ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠΉ Π΄Π΅ΡΠ°Π»Π΅ΠΉ ΡΠ·Π»ΠΎΠ² ΠΈ Π°Π³ΡΠ΅Π³Π°ΡΠΎΠ² Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ. ΠΡΠ°Π»ΡΡΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ β Fiat (Π€ΠΈΠ°Ρ) Alfa Romeo (ΠΠ»ΡΡΠ° Π ΠΎΠΌΠ΅ΠΎ) Lancia (ΠΡΠ½ΡΠ°) Ferrari (Π€Π΅ΡΡΠ°ΡΠΈ) Mazerati (ΠΠ°Π·Π΅ΡΠ°ΡΠΈ) ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΡΠ²ΠΎΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π² ΠΎΡΠΎΠ±ΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΠΈΡΡ Π²ΡΠ΅ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ·ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ β Peugout (ΠΠ΅ΠΆΠΎ), Renault (Π Π΅Π½ΠΎ) ΠΈ Citroen (Π‘ΠΈΡΡΠΎΠ΅Π½). ΠΠ΅ΠΌΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΡΠ΅. ΠΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎ ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΡΡ ΠΊ Mercedes Benz (ΠΠ΅ΡΡΠ΅Π΄Π΅Ρ ΠΠ΅Π½Ρ), BMW (ΠΠΠ), Audi (ΠΡΠ΄ΠΈ) ΠΈ Porsche (ΠΠΎΡΡ), Π² ΡΡΡΡ ΠΌΠ΅Π½ΡΡΠ΅ΠΉ — ΠΊ Volkswagen (Π€ΠΎΠ»ΡΠΊΡΠ²Π°Π³Π΅Π½) ΠΈ Opel (ΠΠΏΠ΅Π»Ρ). Π‘Π»Π΅Π΄ΡΡΡΡΡ Π±ΠΎΠ»ΡΡΡΡ Π³ΡΡΠΏΠΏΡ, ΠΎΠ±ΠΎΡΠΎΠ±Π»Π΅Π½Π½ΡΡ ΠΏΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΌ ΠΏΡΠΈΠ·Π½Π°ΠΊΠ°ΠΌ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ Π°ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΊΠ°Π½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ- Chrysler, Jeep, Plymouth, Dodge, Eagle, Chevrolet, GMC, Cadillac, Pontiac, Oldsmobile, Ford, Mercury, Lincoln. ΠΠ· ΠΠΎΡΠ΅ΠΉΡΠΊΠΈΡ ΡΠΈΡΠΌ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅Ρ ΠΎΡΠΌΠ΅ΡΠΈΡΡ Hyundai/Kia, GM-DAT (Daewoo), SsangYong.
Π‘ΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌ Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΎ ΡΠΏΠΎΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ°Π»ΠΈΡΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠ½Π°ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡΡΡ ΠΈ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΡΠΌΠΈ ΡΠ΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π½Π° Π·Π°ΠΏΠ°ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ°ΡΡΠΈ, Π½ΠΎ Π² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½Π΅Π΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΠ½ΠΈ Π΄ΠΎΠ³Π½Π°Π»ΠΈ ΠΏΠΎ ΡΡΠΈΠΌ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»ΡΠΌ ΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΆΠ½ΡΠ΅ Π΅Π²ΡΠΎΠΏΠ΅ΠΉΡΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈ. ΠΡΠΈΡΠ΅ΠΌ ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΡΡ ΠΏΡΠ°ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π² ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅ΠΏΠ΅Π½ΠΈ ΠΊΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌ ΠΌΠ°ΡΠΊΠ°ΠΌ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ ΠΈΠ· ΡΡΡΠ°Π½Ρ Π²ΠΎΡΡ ΠΎΠ΄ΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠΎΠ»Π½ΡΠ° β Toyota (Π’ΠΎΠΉΠΎΡΠ°), Mitsubishi (ΠΠΈΡΡΠ±ΠΈΡΠΈ), Subaru (Π‘ΡΠ±Π°ΡΡ), Isuzu (ΠΡΡΠ΄Π·Ρ), Honda (Π₯ΠΎΠ½Π΄Π°), Mazda (ΠΠ°Π·Π΄Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ ΠΠ°ΡΡΠ΄Π°), Suzuki (Π‘ΡΠ·ΡΠΊΠΈ), Daihatsu (ΠΠ°ΠΉΡ Π°ΡΡΡ), Nissan (ΠΠΈΡΡΠ°Π½). ΠΡ, Π° ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ, Π²ΡΠΏΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ΄ ΡΠΏΠΎΠ½ΠΎ-Π°ΠΌΠ΅ΡΠΈΠΊΠ°Π½ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ Π±ΡΠ΅Π½Π΄Π°ΠΌΠΈ Lexus (ΠΠ΅ΠΊΡΡΡ), Scion (Π‘ΡΠΈΠΎΠ½), Infinity (ΠΠ½ΡΠΈΠ½ΠΈΡΠΈ), Acura (ΠΠΊΡΡΠ°) Ρ ΡΠ°ΠΌΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΡΠ°Π»Π° Π±ΡΠ»ΠΈ Π½Π΅Π΄Π΅ΡΠ΅Π²ΡΠΌΠΈ.
Β
ΠΡΠ΅ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Ρ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½ΠΎΡΠΌ Π΅Π²ΡΠΎ-3. Π»Π°Π΄Π° ΠΊΠ°Π»ΠΈΠ½Π°, Π»Π°Π΄Π° ΠΏΡΠΈΠΎΡΠ° ΠΈ Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π»Π°Π΄Π° Π½ΠΈΠ²Π° 4Ρ 4 ΡΠ΅ΠΏΠ΅ΡΡ Π·Π½Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½Π΅Π΅ Π² ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ ΠΈ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΠ΅.
ΡΡΠΎ Π΄Π΅Π»Π°ΡΡ Π΅ΡΠ»ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Π° Π½Π΅ Π·Π°Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ, ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°ΡΡΠ΄ΠΈΡΡ Π°ΠΊΠΊΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΎΡ, ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ Π² ΠΌΠΎΡΠΎΠ·. ΠΎΡΠ²Π΅ΡΡ Π½Π° ΡΡΠΈ Π²ΠΎΠΏΡΠΎΡΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π½Π°ΠΉΡΠΈ Π½Π° ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΠ°Ρ ΡΠ°ΠΉΡΠ° ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³. ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½Π½ΡΡ Π·Π΄Π΅ΡΡ ΠΆΠ΅
ΠΠ²ΡΠΎΠΌΠ°Π½ΡΠ°Π» — ΠΎΡ Π°Π½Π³Π». manual — ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎ. ΠΠΎΡΠΎΠ±ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠΎΡΠΎΡΠΈΠΊΠ»Π°. ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ°ΡΡ Π·Π°Π²ΠΎΠ΄ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π° ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³ΠΈ , Π²ΡΠΏΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΈΠ·Π΄Π°ΡΠ΅Π»ΡΡΡΠ²Π°ΠΌΠΈ.
CΠ°ΠΉΡ ΠΠ²ΡΠΎΠΌΠ°Π½ΡΠ°Π» Π½Π΅ Π½Π΅ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ Π·Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΡΡΠ°ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠ»ΡΡΠ°ΠΈ, ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΡΠ΅ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ°Π·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ.
ΠΠ°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΠΈ Π² Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ Π»Π°Π΄Π° Π³ΡΠ°Π½ΡΠ°
ΠΠ΄ΡΠ°Π²ΡΡΠ²ΡΠΉΡΠ΅ Π΄ΠΎΡΠΎΠ³ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ΄ΠΏΠΈΡΡΠΈΠΊΠΈ!
Π‘Π΅Π³ΠΎΠ΄Π½Ρ Ρ Π·Π°ΡΠ½ΡΠ» Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ ΠΎ ΡΠΎΠΌ ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΠΈ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΡΡ
ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°,
ΠΠ½ΠΈ ΠΆΠ΅ ΠΊΡΡΠ°ΡΠΈ ΠΈ ΠΠ½Π΅Π²Π½ΡΠ΅ Π₯ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ! ( Π ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½Π°Ρ
ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΈΡΠΊΠ°Π» Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΡ, Π²ΡΠ΅ ΡΡΡΡ Ρ ΡΠΌΠ° Π½Π΅ ΡΠΎΡΠ»ΠΈβ¦ ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Ρ ΠΈΠΌ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΠ»: » ΠΠ΄ΡΠ°Π²ΡΡΠ²ΡΠΉΡΠ΅, Ρ ΠΠ°Ρ Π΅ΡΡΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΠΈ, Π½Π° Π΄Π½Π΅Π²Π½ΡΠ΅ Ρ
ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ Π½Π° ΠΠ°Π΄Ρ ΠΡΠ°Π½ΡΡ?»
ΠΠ΅ ΠΌΠ½Π΅ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΎΡΠΈΠ»ΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΠΈ ΡΠ°Π·Π½ΡΠ΅, Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π΄ΠΎ ΡΠΌΠ΅Ρ
Π° Π΄ΠΎΡ
ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΎβ¦ ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π½Π΅ Π½Π΅ΡΠ»ΠΈ:)))))
ΠΡΠΆΠ½ΠΎ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΠΈΡΡ: «ΠΠ΄ΡΠ°Π²ΡΡΠ²ΡΠΉΡΠ΅, Π΄Π°ΠΉΡΠ΅ ΠΌΠ½Π΅ ΠΏΠΎΠΆΠ°Π»ΡΠΉΡΡΠ° ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΠΈ Π² ΠΠΠΠΠ ΠΠ’Π« Π½Π° ΠΠ°Π΄Ρ ΠΡΠ°Π½ΡΡ! )
Π ΡΠ°ΠΊ Π±Π»ΠΈΠΆΠ΅ ΠΊ Π΄Π΅Π»Ρβ¦
ΠΠΎΡ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΌΠ΅Π½ΡΡΡΡΡ!
ΠΠ°ΠΆΠ΅ ΡΡΠΈΠ½ΠΎΠ³Ρ Π΄Π»Ρ ΡΠΎΡΠΈΠΊΠ° ΡΠ΅Π³ΠΎΠ΄Π½Ρ ΠΊΡΠΏΠΈΠ», ΡΡΠΎ Π±Ρ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ»ΠΎΡΡ Π½Π΅ Ρ Π΄ΡΠΎΠΆΠ°ΡΠΈΡ ΡΡΠΊ, Π° ΠΏΠΎ Π½ΠΎΡΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΌΡ :)) Π° Π²ΠΎΡ ΠΈ ΡΡΠ΅Π½ΠΎΠ³Π° β¦
Π’Π°ΠΊ ΡΡΠΎ ΡΡΠΎ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ Π΄Π΅ΠΉΡΡΠ²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΌΠ°Π½Π½ΠΎ Ρ ΠΌΠΎΠ΅ΠΉ ΡΡΠΎΡΠΎΠ½Ρ, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Π» ΠΏΠΎΠΏΡΡΠΎΠΊ ΡΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΌΠΎΠΌΡ, ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ» Π»ΡΠ±ΠΈΠΌΡΡ ΠΠ»Π΅ΠΌΡΡΠΊΡ ΠΠ°ΡΡΡΡΠΊΡ, Π½ΠΎ ΡΡΠΈΠ½ΠΎΠ³Π° ΡΠΏΠ°ΡΠ»Π° ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ Π²ΠΎΡ ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ»ΠΎΡΡ!
ΠΠ»Ρ Π½ΠΎΡΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ Lada Granta ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΉΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ, ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π² ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π΅ ΠΏΠΎ ΡΠΊΡΠΏΠ»ΡΠ°ΡΠ°ΡΠΈΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΌ. Π‘ΡΠΎΠΈΡ ΠΎΡΠΌΠ΅ΡΠΈΡΡ, ΡΡΠΎ Π½Π° ΠΎΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΠΉΡΡΠ²Π΅ Lada Granta ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡΡΡ Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠ°ΡΡ Ρ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°ΠΌΠΈ. Π ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΠ΅ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ ΠΊΠ°ΡΠ΅Π³ΠΎΡΠΈΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡΡΡΡ Π½Π° Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΡΠ°Π½ΡΠ΅ ΠΈ Π΄ΠΎΡΠ΅ΡΡΠ°ΠΉΠ»ΠΈΠ½Π³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π²Π΅ΡΡΠΈΠΈ.
ΠΠ΅ΡΡΠΎ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ | ΠΠΎΠ²Π°Ρ Granta | Π‘ΡΠ°ΡΠ°Ρ Granta |
---|---|---|
Π€Π°ΡΠ° | ||
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ/Π΄Π°Π»ΡΠ½Π΅Π³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° | h29 | h5 |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | PY21W | |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ ΠΈ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | W21/5W | |
ΠΠ°Π΄Π½ΠΈΠΉ ΡΠΎΠ½Π°ΡΡ (Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ·ΠΎΠ²Π° Β«ΡΠ΅Π΄Π°Π½Β») | ||
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° ΡΠΎΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | P21/5W | |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ ΠΎΠ΄Π° | P21W | |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΡΡΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | P21W | |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | PY21W | |
ΠΠ°Π΄Π½ΠΈΠΉ ΡΠΎΠ½Π°ΡΡ (Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ·ΠΎΠ²ΠΎΠ² Β«Π»ΠΈΡΡΠ±Π΅ΠΊΒ», Β«Ρ ΡΡΡΠ±Π΅ΠΊΒ» ΠΈ Β«ΡΠ½ΠΈΠ²Π΅ΡΡΠ°Π»Β») | ||
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° ΡΠΎΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ | P21W | |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | R10W | P10W |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ ΠΎΠ΄Π° | W16W | |
β Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | PY21W | |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½Π΅ΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΡΡΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡ | h26 | h21 |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | WY5W | W5W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½ΠΎΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π½Π°ΠΊΠ° | W5W | C5W (ΡΠ΅Π΄Π°Π½) W5W (Ρ ΡΡΡΠ±Π΅ΠΊ) |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΠ»Π°ΡΠΎΠ½Π° ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊΠ° | C5W | C5W |
ΠΠΎΠ²ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ h29 ΠΈ Π18 ΡΡΠΎ ΡΠ²ΠΎΠ»ΡΡΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏ Π4 ΠΈ Π7. ΠΠΎΠ²ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΡΠΆΠ΅ Π·Π°Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Ρ ΠΊ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ Π±ΡΠ΄ΡΡΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠ΅ΠΊΡΠ°Ρ LADA (ΠΏΠΎΠ΄ΡΠΎΠ±Π½Π΅ΠΉ). Lada Granta FL β ΠΏΠ΅ΡΠ²Π°Ρ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»Ρ, Π² ΡΠ°ΡΠ°Ρ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΉ Π½Π°ΡΠ°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ h29.
ΠΠΌΠ΅ΡΡΠΎ Π½ΠΎΠ²ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏ h29 Π² ΡΠ°ΡΡ Lada Granta FL ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ h5. ΠΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΎΠΉ Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΠ΅ h5 ΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ³Π½ΡΡΡ ΡΡΠΈΠΊΠΈ:
Π‘Π²Π΅ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ h29 ΠΈ h5 ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎ, ΡΡΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠ²Π΅ΡΠΆΠ΄Π°Π΅ΡΡΡ ΡΠ΅ΡΡΠ°ΠΌΠΈ:
ΠΠ°ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΠΌ, ΡΠ°Π½Π΅Π΅ ΠΌΡ Π²ΡΠΊΠ»Π°Π΄ΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΡ ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏ Π² ΡΠ°ΡΠ°Ρ ΠΈ ΡΠΎΠ½Π°ΡΡΡ ΠΡΠ°Π½ΡΡ (Π±Π»ΠΈΠΆΠ½ΠΈΠΉ ΠΈ Π΄Π°Π»ΡΠ½ΠΈΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ, ΠΠ₯Π).
ΠΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΡ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΈ ΠΏΠ°ΡΡΠ°ΠΆΠΈΡΠΎΠ² Π² Π½ΠΎΡΠ½ΠΎΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΡΡΡΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ. ΠΠ½ΠΈ Π΄Π°ΡΡ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΠΌ ΡΡΠ°ΡΡΠ½ΠΈΠΊΠ°ΠΌ Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π²ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅ΡΡ ΠΎΡΠ΅ΡΡΠ°Π½ΠΈΡ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡΡ ΡΠ°ΡΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Π°ΠΌΠΈ.
ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡΡ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΠΈΡΡΡΡ Π² ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΡΡ ΠΎΡΠ°Π΄ΠΊΠΎΠ², ΡΡΠΌΠ°Π½Π°. ΠΠ»Ρ ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΠΠ°Π΄Π° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ ΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ Π² ΠΊΠΎΡΠΏΡΡΠ΅ ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ΠΈ ΠΈ ΡΠ·Π°Π΄ΠΈ, ΡΡΠΎ Π³Π°ΡΠ°Π½ΡΠΈΡΡΡΡ ΡΠ΅ΡΠΊΡΡ Π²ΠΈΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΡ Π°Π²ΡΠΎ ΡΡΠ΅Π΄ΠΈ ΠΏΠΎΡΠΎΠΊΠ° Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π° Π±Π΅Π·Π»ΡΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΡΠ°ΡΡΠ΅.
ΠΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ ΠΡΠ°Π½ΡΡ: ΠΎΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ
ΠΠ° ΠΠ°Π΄Π΅ Π½Π΅ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΡΠΎ ΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡΡ ΠΠ₯Π, ΠΏΠΎΡΡΠΎΠΌΡ Π΄ΠΎΡΡΠΎΠΉΠ½ΠΎΠΉ ΠΈΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡΠΈΡΠ°ΡΡ ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΡΠ΅ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΡΠ΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ. ΠΠ½ΠΈ Π½Π΅ ΠΏΡΠ΅Π΄Π½Π°Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ°Π΄ΠΊΠΈ Π½Π΅ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΌ. ΠΠΎ ΡΡΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½Π΅ Π΄Π»Ρ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ Π½Π΅ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡΡ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠΎΠΉ ΡΡΠΊΠΎΡΡΡΡ.
Π‘Π²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ Ρ ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ Π² 4/5 ΠΡ (Π΄Π»Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΡ ΠΈ Π·Π°Π΄Π½ΠΈΡ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ°ΡΡΡΡ) ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠΉΠ΄ΡΡ Π΄Π»Ρ ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π·Π°Π΄Π°ΡΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ.
ΠΠ°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΡΠΎΠ²ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ Π±Π»ΠΎΠΊΠ΅ ΡΠΎ ΡΡΠΎΠΏ-ΠΎΠ³Π½ΡΠΌΠΈ. ΠΠΎ Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠΈΡ Π·Π°ΡΡΡΠ΄Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ ΠΏΡΠΈ ΠΈΡ ΠΎΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ Π½Π΅ Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ°Π΅Ρ. Π‘Π°ΠΌΠΎΠ΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅, ΡΡΠΎ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ΅Π½ ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΡΡ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»Π΅Ρ: Π² ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ Π±ΡΡΡ ΠΊΠ°ΠΊ Ρ ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅ΠΌ, ΡΠ°ΠΊ ΠΈ Π±Π΅Π· Π½Π΅Π³ΠΎ, Π² Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΎΡ ΠΌΠ΅ΡΡΠ° ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°ΠΆΠ°.
ΠΡΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°ΡΡ ΠΈ Π²ΠΎΠ»ΡΡΠ°ΠΆ ΠΏΡΠΈ Π²ΡΠ±ΠΎΡΠ΅ ΡΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ², ΠΈΠ½Π°ΡΠ΅ ΠΎΠ½ΠΈ Π½Π΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π½Π΅ Π±ΡΠ΄ΡΡ ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΊΡΠ½ΠΎ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°ΡΡ, Π½ΠΎ ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅ΡΡΠΈ ΠΊ ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΠΊΡΠ΅ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠΉ. Π ΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠΎΠΊΡΠΏΠΊΠ΅ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ Π΄Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°ΡΠ½ΡΠΌ ΠΎΠ³Π½ΡΠΌ, ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π² Π΄ΠΎΠΊΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Ρ Π½Π° Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ.
ΠΠ°ΠΊ Π²ΡΠ±ΡΠ°ΡΡ ΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΠ΅Π΄Π°Π½?
ΠΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ°ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΠ½ΠΎ ΡΡΠ°Π½Π΄Π°ΡΡΠ½ΡΠΌ Π΄Π»Ρ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΠΎΠ²ΠΊΠ°ΠΌ. ΠΠ»Ρ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ° ΠΏΠΎΠ½Π°Π΄ΠΎΠ±ΠΈΡΡΡ Π±Π΅ΡΡΠΎΠΊΠΎΠ»ΡΠ½ΡΠΉ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½Ρ W5W Ρ ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ 21/5 ΠΡ.
Π‘Π·Π°Π΄ΠΈ ΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ ΠΈΠ·Π΄Π΅Π»ΠΈΡ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΠΎΠ²ΠΊΠΈ P21, ΠΏΡΠ°Π²Π΄Π° ΠΈΡ ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Π° ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ 4 ΠΡ. Π§ΡΠΎΠ±Ρ Π²ΡΠ±ΡΠ°ΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ ΡΠ΅Π΄Π°Π½ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠΈΡΡΡΡ Π² Π»ΡΠ±ΠΎΠΉ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠΉ ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½. ΠΡΠΈ ΡΡΠΎΠΌ ΠΏΠΎΠΊΡΠΏΠ°ΡΠ΅Π»Ρ ΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΡΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΡΠ°Π½Π΄Π°ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΈΠΏΡ, ΡΠ°ΠΊ ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ.
ΠΠΠΠΠ: ΠΠ½ΠΎΠ³Π΄Π°, ΡΠ½ΡΠΉ Π°Π²ΡΠΎΠ»ΡΠ±ΠΈΡΠ΅Π»Ρ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΡΠ΅ΡΠΈΡΡ, ΡΡΠΎ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΏΠΎΡΡΡΠ΅, ΡΡΠΎ Π±Ρ Π΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ»ΠΎ Π»ΡΡΡΠ΅ Π²ΠΈΠ΄Π½ΠΎ Π½Π° Π΄ΠΎΡΠΎΠ³Π΅, Π½Ρ ΠΈ ΠΏΡΠΎΡΡΠΎ ΠΊΡΡΡΠΎ. ΠΠ΅Π»Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΊ Π½Π΅ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ, ΠΏΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡΠΎΡΡΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½Π΅. ΠΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΡΠΊΠ°Ρ (ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΠ²ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΡΠ½Π°Ρ) Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π±ΡΠ΄Π΅Ρ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΡΡ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅ ΡΠ΅ΠΏΠ»Π°.
Π ΠΈΡΠΎΠ³Π΅, Π½Π°ΡΠ½Π΅Ρ ΠΏΠ»Π°Π²ΠΈΡΡΡΡ ΠΎΡΡΠ°ΠΆΠ°ΡΠ΅Π»Ρ (ΠΈ ΠΈΠ· Π±Π»Π΅ΡΡΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΏΡΠ΅Π²ΡΠ°ΡΠΈΡΡΡ Π² ΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΉ), ΠΎΠΏΠ»Π°Π²ΠΈΡΡΡ ΡΠ°ΠΌ ΠΏΠ°ΡΡΠΎΠ½ Π»Π°ΠΌΠΏΡ, ΠΎΠΏΠ»Π°Π²ΠΈΡΡΡ Π·Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ΅ Β«ΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΠΎΒ» ΡΠ°ΡΡ, Π΅ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠ½ΠΎ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΈΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΅. Π ΡΠ°ΠΊ Π΄Π°, ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΠΊΡΡΡΠΎ ?
ΠΡΠΎΡΠ΅Π΄ΡΡΠ° ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΡ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ»ΡΠ½ΠΎ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ, Π½ΠΎ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°ΡΡ ΠΈ Π°ΠΊΠΊΡΡΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ, ΠΈ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°ΠΆΠ°. ΠΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠΎΠ² ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΠ°ΡΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π° Π² Π±Π»ΠΎΠΊ-ΡΠ°ΡΠ΅ ΠΈ ΠΊ Π½Π΅ΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΈΠ·-ΠΏΠΎΠ΄ ΠΊΠ°ΠΏΠΎΡΠ°. ΠΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ½ΡΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΠΌΠΌΡ Ρ Π°ΠΊΠΊΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΎΡΠ°.
ΠΠΎΠ΄ΠΎΠ±Π½Π°Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ ΠΈΠ·Π±Π΅ΠΆΠ°ΡΡ Π·Π°ΠΌΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ°ΠΊΡΠΎΠ² ΠΈ ΠΊΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠΈΡ ΠΈ ΡΠ°ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»Ρ. ΠΠ°Π»Π΅Π΅ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ° ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΡ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΠ½ΠΎ ΡΠ°ΠΊΠΎΠΉ ΡΡ Π΅ΠΌΠ΅:
1. ΠΡΡΡΠ΅Π³ΠΈΠ²Π°ΡΡΡΡ ΠΊΡΠ΅ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΡ Π½Π° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡΡΠ½ΠΎΠΌ ΡΠΈΠ»ΡΡΡΠ΅, ΡΠ½ΠΈΠΌΠ°Π΅ΡΡΡ ΠΏΠ°ΡΡΡΠ±ΠΎΠΊ, ΠΊΠΎΡΠΎΠ±ΠΊΠ° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠ»ΡΡΡΠ° Π²ΡΡΡΠ³ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ (Π΄Π»Ρ Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ).
2. ΠΡΠΎΡΠΈΠ² ΡΠ°ΡΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΡΡΠ΅Π»ΠΊΠΈ Π²ΡΠΊΡΡΡΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΈ ΠΈΠ·ΡΠΌΠ°Π΅ΡΡΡ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΡΠΏΡΡΠ°.
3. ΠΡΡΠ°ΡΠΊΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ ΠΈΠ· ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ ΡΡΠ°ΡΠ°Ρ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΈ Π²ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π½ΠΎΠ²Π°Ρ, Π½Π° ΠΌΠ΅ΡΡΠΎ Π·Π°ΠΊΡΡΡΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ, ΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π² ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΏΠΎΡΡΠ΄ΠΊΠ΅ ΠΊΠΎΡΠΎΠ±ΠΊΠ° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠ»ΡΡΡΠ°.
4. Π‘ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΉ ΡΡΠΎΡΠΎΠ½Ρ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ° ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅Ρ ΡΠ½ΡΡΠΈΡ Π·Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΡΡΡΠΊΠΈ Π΄Π²ΠΈΠ³Π°ΡΠ΅Π»Ρ. ΠΠ°Π»Π΅Π΅ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ ΠΏΠΎ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½Π½ΠΎΠΌΡ Π²ΡΡΠ΅ Π°Π»Π³ΠΎΡΠΈΡΠΌΡ.
5. ΠΠΎ Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΠΏΡΠ°Π²ΠΎΠΉ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Π²ΠΎΠ·Π²ΡΠ°ΡΠ°Π΅ΡΡΡ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Ρ ΠΊΡΡΡΠΊΠ°.
ΠΠΎ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΡ Π΅ΠΌΠ΅ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΡ Π½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΆΠ΅ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π³ΠΎΡΠ΅Π²ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΈΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»Π΅Ρ ΠΡΠ°Π½ΡΡ. ΠΠΎ Π½ΡΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΡΡ ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠ΅ΠΌ ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΠΌΠΌ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΊΠ΅ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΠΎΠΏΡΠΈΠΊΠΈ.
ΠΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π° Lada Granta Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ Π±ΡΠ΄ΡΡ ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°ΡΡ ΠΈΡΠΏΡΠ°Π²Π½ΠΎ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΠΏΡΠΈ Ρ ΠΎΡΠΎΡΠ΅ΠΌ Π·Π°ΠΆΠ°ΡΠΈΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Π² ΠΏΠ°ΡΡΠΎΠ½Π΅. ΠΠΊΠΊΡΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡΡΡΡ ΠΈΡΠΊΠ»ΡΡΠΈΡ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΡ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠΉ.
ΠΡΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ Π½ΠΎΠ²ΡΡ ΡΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΡΠ·Π°Π΄ΠΈ Π΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΡΠ΅. Π ΡΠ°ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ Π·Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΡ ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π²ΡΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡΡΡ Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ»ΡΠ½ΠΎ Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ, Π½ΠΎ ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΡ ΠΏΠΎΠ½Π°Π΄ΠΎΠ±ΠΈΡΡΡ ΡΠ±ΡΠ°ΡΡ ΠΊΠΎΠ²ΡΠΈΠΊ Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊΠ°, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏ ΠΊ ΠΎΠ³Π½ΡΠΌ. ΠΠ°Π»Π΅Π΅ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΡΡ ΠΈΠ·ΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ (Π²ΡΠΊΡΡΡΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΡΠ°ΡΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΡΡΠ΅Π»ΠΊΠΈ), ΡΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠ°ΡΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΈ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠ° Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ.
Π‘Π±ΠΎΡΠΊΠ° ΠΎΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π² ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΏΠΎΡΡΠ΄ΠΊΠ΅, ΠΏΡΠΈ ΡΡΠΎΠΌ ΠΎΠ±ΡΠΈΠΉ ΡΡΠΎΠΊ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ ΡΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎ 20-30 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ. ΠΡΠΎΠ²Π΅ΡΡΠΈ ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΡ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡΠΎΡΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΈ ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ Π·Π°ΡΡΠ°ΡΠ°Ρ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΠΈ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ² Π½Π΅ ΡΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡ ΡΡΡΠ΄Π°.
ΠΠ°ΠΌΠΏΡ | ΠΠ°Π΄Ρ ΠΡΠ°Π½ΡΡ
ΠΠ²ΡΠΎΡ ΠΠΎΠ½ΡΡΠ°Π½ΡΠΈΠ½ ΠΠ° ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½. ΠΡΠΎΡΠΌΠΎΡΡΠΎΠ² 23.3k.
ΠΡΠ΅Π½Ρ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΠ΅Π² ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π·Π½Π°ΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ Π² Π½Π΅ΠΉ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡ. ΠΠ΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π²ΠΎΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ Π½Π°ΠΏΡΡΠΌΡΡ Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΡ ΠΎΡ Π½Π°Π΄Π΅ΠΆΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ. Π‘ΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»Π΅ΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏ Π΄Π»Ρ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³Π°ΡΡ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΡ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΡ ΡΡΠΊΠΎΡΡΡ, ΠΎΠΏΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΡ Π΄ΠΎΡΠΎΠ³Ρ Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π΄Π²ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ. ΠΡΠΎ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΠ΅Ρ ΡΠ²ΠΎΠ΅Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅ΡΠ°ΡΡ Π΄ΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΡΠ΅ Π·Π½Π°ΠΊΠΈ ΠΈ ΠΏΡΠ΅ΠΏΡΡΡΡΠ²ΠΈΡ, ΡΠ½ΠΈΠ·ΠΈΡΡ Π½Π°Π³ΡΡΠ·ΠΊΡ Π΄Π»Ρ Π³Π»Π°Π· Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ.
Π€Π°ΡΡ Π² Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ ΠΏΡΠ΅Π΄Π½Π°Π·Π½Π°ΡΠ°ΡΡΡΡ Π΄Π»Ρ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π²ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ°ΡΡ Π·Π° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½ΠΈΠΉ ΠΈ Π΄Π°Π»ΡΠ½ΠΈΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ.
ΠΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π² ΡΠ΅Π±Ρ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅Ρ:
ΠΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ
β 2 ΡΠ°ΡΡ (Π³ΠΎΠ»ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΡΡΠΌΠ°Π½Π½ΡΡ). ΠΠΎΠ΄ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π½Π° ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ:
1. ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ/Π΄Π°Π»ΡΠ½Π΅Π³ΠΎ. ΠΠ±ΡΡΠ½ΠΎ Π² ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΡΡΠΏΠ΅ΡΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ h5 12 B. ΠΠ»Ρ ΠΎΡΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π΄Π°Π»ΡΠ½Π΅Π³ΠΎ Π±Π΅ΡΡΡ ΡΠ°ΠΊΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ 60 ΠΡ, ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄Π°ΡΠΈΡ Π΄Π»Ρ ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ β 55 ΠΡ.
2. ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΡΠ° ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ°. ΠΠ»Ρ ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΈΠ΄Π΅Π°Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠ½ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ°. ΠΠΎΠ΄Π΅Π»Ρ PY21W ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ 21 ΠΡ.
3. Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ (ΠΠ₯Π)/Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ. Π Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±ΡΠ°Π½Ρ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΉ Π½ΠΈΡΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ P21/5W 12 Π/21 ΠΡ, ΡΠΈΠΏ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Π½Π° Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΎΡ ΠΆΠ΅, Π½ΠΎ Ρ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ β 5 ΠΡ.
4. ΠΠ°ΠΌΠΏΡ H7 12B ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ 55 ΠΡ ΡΡΠ°Π²ΡΡ Π½Π° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΡΡΠΌΠ°Π½Π½ΡΡ ΡΠ°ΡΡΒ
Β | |
Β |
Β
ΠΠ°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ
β ΠΏΡΠ°Π²Π°Ρ ΠΈ Π»Π΅Π²Π°Ρ ΡΠ°ΡΡ Π·Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅. ΠΠΊΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π² ΡΠ΅Π±Ρ ΡΠ΅ΡΡΡΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ, ΠΎΡΠ½Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΠΌ ΡΠΈΠΏΠΎΠΌ Π»Π°ΠΌΠΏ:
1. Π‘ΡΠΎΠΏ-ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° ΠΈ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ°. ΠΠ»Ρ ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΉ Π½ΠΈΡΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΠΎ Π»Π°ΠΌΠΏΡ P21/5W 12B/21 ΠΡ. ΠΠ°ΠΌΠΏΡ P21/5W 12B/5 ΠΡ β ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡ Π½Π° Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ (ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²Π·ΡΡΡ P21/4W).
2. Π‘ΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΡΠ° ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠΎΠ². Π ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΡΠ½ΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° PY21W 12Π/21ΠΡ.
3. Π‘ΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΡΠ° Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ ΠΎΠ΄Π°. ΠΠ»Ρ ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΡΡΠ΅ΡΡΠ΅ΠΉ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π»ΡΡΡΠ΅ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° P21W 12 Π/21 ΠΡ.
4. Π‘Π΅ΠΊΡΠΈΡ Ρ ΡΠ΅ΡΠ»Π΅ΠΊΡΠΎΡΠΎΠΌ. Π£ΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ (ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΡ) ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ. Π£ΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π½Π° ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π½Π° ΡΠΎΠΌ ΠΆΠ΅ ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅, Π³Π΄Π΅ ΡΡΠΎΡ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ ΠΊΡΠ΅ΠΏΠΈΡΡΡ Π½Π° Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΡΡ ΠΠ°Π΄Π°, ΡΠ°ΠΊΠΈΡ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΠ°Π»ΠΈΠ½Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΡΠΈΠΎΡΠ°. ΠΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Ρ ΡΠ½ΡΠ°ΡΠ½ΡΠΌ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΈΠ²Π°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ WSW 12B/5BΡ. ΠΡΠΈ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠ΅ ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ Ρ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΠΈΠ²Π°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ Π±Π΅Π»ΡΠΌ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡΠ΅ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° WY5W 12 Π/5 ΠΡ.
ΠΡΠ±ΠΈΡΠ°Π΅ΠΌ Π»Π°ΠΌΠΏΡ
ΠΠ°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ Π½Π°ΠΊΠ°Π»ΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ°ΡΡ Π²ΡΠ΅ Π±ΠΎΠ»ΡΡΡΡ ΠΏΠΎΠΏΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π΄Π»Ρ Π»Π°ΠΌΠΏ Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ°. ΠΡ Π½Π°Π·ΡΠ²Π°ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΡΠΎΡΡΠ°. ΠΠΎ Π±Π΅Π»ΡΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ ΡΠ°ΠΊΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏ ΠΏΡΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΊ ΡΡ ΡΠ΄ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π²ΠΈΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈ Π΄ΠΎΠΆΠ΄Π»ΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ³ΠΎΠ΄Π΅. ΠΠ΅Π»ΡΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅ ΠΎΡΡΠ²Π΅ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΎΡ ΠΌΠΎΠΊΡΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ Π½ΠΎΡΡΠΈ, ΡΠ΅ΠΌ ΠΏΡΠΎΠΈΠ³ΡΡΠ²Π°Π΅Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°ΠΌΠΈ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ°.
ΠΠ΅ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΡΡΠ΄Π° ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΡΠΈ ΡΠ°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈ:
β OSRAM;
β GENERAL Elektrik;
β Philips;
β Narva;
β IPF;
β Hella.
ΠΠ»Ρ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡΡΡ Π²ΡΠ±ΠΈΡΠ°ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ OSRAM Π4. ΠΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎ ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠΈ Standard ΠΈ Light Day. ΠΠΎΠ΄Π΅Π»Ρ Standard ΠΎΠΏΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ½Ρ Π²ΡΠ΅Ρ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½ΠΎΠ΄Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΉ ΠΈ Π½ΠΎΡΠΌ. Π‘ΡΠ΅Π΄ΠΈ Π²ΡΠ΅Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠΈΡΠ»Π΅Π½Π½ΡΡ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»Π΅ΠΉ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΈΠΌ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΈΠ»Ρ ΡΠ²Π΅ΡΠ°, ΡΡΠΎ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡΡ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡΡ.
Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΎΠΏΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎ Π²ΡΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π½Π½ΡΠ΅ Π½ΠΎΡΠΌΡ:
β Π³Π΅ΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΠΈ;
β ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ;
β ΡΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π³ΡΠ°Π½ΠΈΡΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΡΠ΅Π½ΠΈ.
ΠΠΎΠ΄Π΅Π»Ρ Light Day ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ ΠΌΠ΅Π½ΡΡΡΡ ΡΠΈΠ»Ρ ΡΠ²Π΅ΡΠ°, Π½ΠΎ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²ΡΠ³ΠΎΠ΄Π½Π° ΠΏΠΎ ΡΡΠΎΠΊΡ ΡΠΊΡΠΏΠ»ΡΠ°ΡΠ°ΡΠΈΠΈ. ΠΠ»Ρ ΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΠΈ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠΈ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ. ΠΠ½ΠΈ Π²ΡΠΏΡΡΠΊΠ°ΡΡΡΡ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ°. ΠΠΎ, ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΠ½ΠΎ Π½ΠΎΡΠΌΠ°ΠΌ, ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π±Π΅Π»ΡΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΆΠ΅Π»ΡΡΠΉ ΡΠ²Π΅Ρ. Π£ΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠ° ΡΠ°ΠΊΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏ Π½Π° ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΡΠ½ΠΈΠΆΠ°Π΅Ρ Π½Π°Π³ΡΡΠ·ΠΊΡ Π½Π° Π°ΠΊΠΊΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΎΡ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ ΠΈ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΡ Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ½ΠΎΠ²Π΅Π½ΠΈΡ ΠΠ’Π. Π‘Π²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Ρ ΡΡΡΠΎΠΉΡΠΈΠ²Ρ ΠΊ Π²ΠΈΠ±ΡΠ°ΡΠΈΠΈ, ΡΡΠΎ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΈΡ ΡΡΠΎΠΊ ΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ.
Π’ΠΈΠΏ (ΠΠΠ‘Π’) | Π’ΠΈΠΏ (ΠΠΠ ) | |
ΠΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°ΡΡ | ||
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π΄Π°Π»ΡΠ½Π΅Π³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° | ΠΠΠ 12-60+55 | h5 |
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° | ΠΠΠ 12-60+55 | h5 |
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | Π12-21-4 | PY21W |
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ
ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ | — | W21/5W |
ΠΠ°Π΄Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΠ½Π°ΡΠΈ (Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ·ΠΎΠ²Π° Β«ΡΠ΅Π΄Π°Π½Β») | ||
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° ΡΠΎΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΈ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | Π12-21+5-2 | P21/5W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ
ΠΎΠ΄Π° | Π12-21-3 | P21W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΡΡΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | Π12-21-3 | P21W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | Π12-21-4 | PY21W |
ΠΠ°Π΄Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΠ½Π°ΡΠΈ (Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ·ΠΎΠ²Π° Β«Ρ
ΡΡΡΠ±Π΅ΠΊΒ») | ||
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° ΡΠΎΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ | Π12-21-3 | P21W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Ρ | — | P10W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ
ΠΎΠ΄Π° | — | W16W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | Π12-21-4 | PY21W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½Π΅ΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΡΡΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡ | — | h21 |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡΠ° | Π12-5-2 | W5W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½ΠΎΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π½Π°ΠΊΠ° (Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ·ΠΎΠ²Π° Β«ΡΠ΅Π΄Π°Π½Β») | ΠC12-5-1 | C5W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½ΠΎΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π½Π°ΠΊΠ° (Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ·ΠΎΠ²Π° Β«Ρ
ΡΡΡΠ±Π΅ΠΊΒ») | Π12-5-2 | W5W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΠ±ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ°Π»ΠΎΠ½Π° Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ | ΠC12-10-1 | C10W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΈΠ½Π΄ΠΈΠ²ΠΈΠ΄ΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΌΠ΅ΡΡ Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ ΠΏΠ°ΡΡΠ°ΠΆΠΈΡΠ° | ΠC12-4-1 | T4W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊΠ° | ΠC12-5-1 | C5W |
ΠΠ°ΠΌΠΏΡ ΠΠ₯Π ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°: Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π°, ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Π»ΡΡΡΠ΅
ΠΠ°ΠΌΠΏΠ° Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΠΏΠΎΡΠ²ΠΈΠ»Π°ΡΡ Π² Π°ΡΡΠ΅Π½Π°Π»Π΅ ΡΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΡΡ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ ΡΡΠ°Π²Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΎ. Π ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΌ ΡΡΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡΠ²Π΅ ΠΎΡΠ΅ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΠ΅ΡΠΊΠΎ ΠΎΠ±ΠΎΠ·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΎ, ΡΡΠΎ ΡΠΎΠ»Ρ Π΄Π½Π΅Π²Π½ΡΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ (ΠΠ₯Π) Π²ΠΎΠ·Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π° Π½Π° Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΎΠΏΡΠΈΠΊΡ, ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΡ ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΉ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ Π΄Π²ΡΡ -Π½ΠΈΡΠ΅Π²ΠΎΠΉ. ΠΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π·Π°ΠΆΠΈΠ³Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ½Π°ΡΠ°Π»Π° Π·Π°Π³ΠΎΡΠ°Π΅ΡΡΡ Π½ΠΈΡΡ, ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ°ΡΡΠ°Ρ Π·Π° ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΠΠ₯Π, Π° Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ ΡΠ°Ρ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π³Π°Π±Π°ΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ. ΠΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ· ΠΎΠ±ΠΎΠ·Π½Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π½ΠΈΡΠ΅ΠΉ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ 21 ΠΡ, Π° Π²ΡΠΎΡΠΎΠΉ β 5 ΠΡ.
ΠΠ»Ρ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ±ΡΠΊΠ½ΠΎΠ²Π΅Π½Π½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΠ₯Π. Π‘Π°ΠΌΡΠΌ Π½Π΅ΠΎΡΠΏΠΎΡΠΈΠΌΡΠΌ ΠΏΡΠ΅ΠΈΠΌΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎΠΌ ΡΠ°ΠΊΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠ² ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΈΡ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠ°Ρ ΡΡΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡΡ, Π° Π²ΠΎΡ Β«ΠΌΠΈΠ½ΡΡΠΎΠ²Β» Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅, ΡΠ΅ΠΌ Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ. ΠΠ± ΡΡΠΎΠΌ ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅ΡΠ΅Π»ΡΡΡΠ²ΡΡΡ ΡΠ΅ΠΊΠ»Π°ΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΏΠΎΠΊΡΠΏΠ°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ, Π³Π΄Π΅ ΠΎΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΎ Π½Π΅Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ»ΡΡΡΠ²ΠΎ ΡΡΡΠΊΠ»ΡΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΡΠΌ ΠΏΡΡΠΊΠΎΠΌ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠ²Π°ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΡΠ΅Π½ΠΊΠ° ΠΈ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΌ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ ΡΠ΅ΡΡΡΡΠ° ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²Π°. ΠΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΠ΅Π² ΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Ρ ΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ΅ΡΡΠ΅Ρ Π²ΠΎΠΏΡΠΎΡ: ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ.
Π’Π°ΠΊΠ°Ρ ΡΠ°ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠ° ΡΠ°ΠΊΡΠΎΠ² Π·Π°ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΠ΅Π² ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Β«Π±ΡΠΎΡΠ°ΡΡΡΡΒ» Π½Π° ΠΏΠΎΠΈΡΠΊΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ² ΠΠ₯Π ΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠΉ Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΡΠ΅ΠΉ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΠΈ. Π ΡΠΎΠ»ΠΈ ΡΠ°ΠΊΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠΉΠ΄ΡΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΠ₯Π Π±Π΅Π· ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²Π°, Π½ΠΎ Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΎΡΠ΄Π°ΡΠ΅ΠΉ ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΏΡΠΈΡΡΠ½ΡΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΡΠΌ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠΎΠΌ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ. Π Π°ΡΡΠΎΡΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ΅ Π»ΡΠ±ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½Π° ΡΠ°ΠΊΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΡΠ½ΠΎ. ΠΡΠ»ΠΈ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΡ ΠΏΠΎ Π΄ΡΡΠ΅ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½Π°Ρ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠ°, ΡΠΎ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ°Π»ΠΈΡΡΡ ΡΠΎΠ²Π΅ΡΡΡΡ Π±ΡΠ°ΡΡ ΠΊ ΡΡΠ΅ΡΡ ΠΏΠ°ΡΠ°ΠΌΠ΅ΡΡ ΠΈΡ ΡΡΠΊΠΎΡΡΠΈ. Π§ΡΠΎ Π΄Π΅Π»Π°ΡΡ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠ° Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ.
Π Π»Π°ΠΌΠΏΠ°Ρ Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΠΌ ΠΊΠΎΠΌΡΠΎΡΡΠΎΠΌ
ΠΠ»Ρ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΠ°ΠΊΠ°Ρ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΡΠ²Π»ΡΡΠ΅ΡΡΡ ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ, Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π½Π΄Π°ΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, Π½ΠΎ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΠ΅ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΠΏΡΠΈΡΡΠ½ΡΠΉ Π±Π΅Π»ΡΠΉ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡ. Π Π²ΠΈΠ΄Π΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΡ Π½Π΅Π΄ΠΎΡΡΠ°ΡΠΊΠ° ΡΠΈΠ³ΡΡΠΈΡΡΠ΅Ρ ΡΠ½ΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π²ΠΈΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈ Π΄ΠΎΠΆΠ΄Π»ΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ³ΠΎΠ΄Π΅. ΠΡΠΎ ΠΎΠ±ΡΡΡΠ½ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠΊΠ»ΠΎΠ½Π½ΠΎΡΡΡΡ Π±Π΅Π»ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π΄Π°Π²Π°ΡΡ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅ Π±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ² ΠΎΡ Π½Π°ΠΌΠΎΠΊΡΠΈΡ ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ Π½ΠΎΡΡΠ΅ΠΉ ΠΈ Π΄ΠΎΠΆΠ΄Π΅Π²ΡΡ ΠΊΠ°ΠΏΠ΅Π»Ρ Π² ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ Ρ ΠΆΠ΅Π»ΡΡΠΌ ΠΎΡΡΠ΅Π½ΠΊΠΎΠΌ.
ΠΡΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π΄Π°Π½Π½ΡΠΉ ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½Ρ, ΡΠΎ Π² ΡΠΈΡΠ»Π΅ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠ°ΡΠΏΡΠΎΡΡΡΠ°Π½Π΅Π½Π½ΡΡ Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΎΠ², ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΎΡ ΠΎΡΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠΌΠΈ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΠ°ΠΌΠΈ, ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅ΡΡ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠ΅:
- Β«OSRAMΒ» ΠΈ Β«General ElectricΒ»;
- Β«ΠΠ°ΡΠΊΒ» ΠΈ Β«PhilipsΒ»;
- Β«NarvaΒ», Β«IPFΒ» ΠΈ Β«HellaΒ».
ΠΡΠΎ Π΅ΡΠ΅ Π½Π΅ Π²Π΅ΡΡ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΉ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΎΠ². ΠΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠΈΠ½ΡΠ΅ΡΠ΅ΡΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ ΠΏΡΠΈΠΎΡΠΈΡΠ΅ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ Π°Π²ΡΠΎ, ΡΠΎ Π΅ΠΌΡ ΡΠΈΠΌΠΏΠ°ΡΠΈΠ·ΠΈΡΡΡΡ Β«OSRAM h5Β». ΠΡΠΈ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²Π° ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ Π΄Π²Π° Π²Π°ΡΠΈΠ°Π½ΡΠ° ΠΈΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΡ:
- Β«StandardΒ»;
- Β«Light DayΒ».
ΠΠ΅ΡΠ²Π°Ρ Π²Π΅ΡΡΠΈΡ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π΅Ρ ΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠΌ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°ΠΌ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½ΠΎΠ΄Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠ° Π² ΠΏΠ»Π°Π½Π΅ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠΉ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ, Π² ΡΠΈΡΠ»Π΅ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ : ΡΠΈΠ»Π° ΡΠΎΠΊΠ°, ΡΠ²Π΅ΡΠΎΡΠ΅Π½Π΅Π²Π°Ρ Π³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠ°, ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ, Π³Π΅ΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡ ΠΏΠΎΠ΄Π°ΡΠΈ ΠΏΡΡΠΊΠ° ΠΈ ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡ.
ΠΡΠΎΡΠΎΠΉ Π²Π°ΡΠΈΠ°Π½Ρ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ Π²ΡΠ³ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ΅ ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΎΡ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΎΠ³ΠΎ Π² ΠΏΠ»Π°Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅ΡΡΡΡΠ°, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ ΡΡΡΡΠΏΠ°Π΅Ρ Π² ΠΌΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΡΠΊΠ°. ΠΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ, ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΡ ΡΡΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎ, Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ Π·Π½Π°ΡΡ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΡΠ²ΠΎΠΈΠΌΠΈ ΡΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ.
ΠΡΠ»ΠΈ ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏ, ΡΠΎ Π΅Π΅ ΠΎΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π»ΡΡΡ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠΌ ΠΏΡΠΎΡΡΡΠΌ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠΌ.
ΠΡΠ²Π΅ΡΠ°Π΅ΠΌ Π½Π° Π²ΠΎΠΏΡΠΎΡ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΡΠ²ΠΎΠΈΠΌΠΈ ΡΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈ.
- ΠΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΡΠΎΡΡΠ½ΡΠΉ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏ ΠΊ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΌΡ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²Ρ Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ (ΠΏΠΎ Ρ ΠΎΠ΄Ρ) ΡΡΠΎΡΠΎΠ½Ρ. Π‘ ΡΡΠΎΠΉ ΡΠ΅Π»ΡΡ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°Π΅ΠΌ ΠΊΠΎΡΠΏΡΡ ΡΠΈΠ»ΡΡΡΡΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½ΡΠ° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΠΏΡΡΠΊΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ°ΠΊΡΠ° Ρ ΠΎΡΡΠΎΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠ°, Π΅Π³ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄Π²ΠΎΠ΄ΡΡΠΈΡ ΠΊΠ°Π±Π΅Π»Π΅ΠΉ ΠΈ ΠΏΠ°ΡΡΡΠ±ΠΊΠΎΠ².
- Π‘Π°ΠΌ ΠΊΠΎΡΠΏΡΡ ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅ΡΠ³Π°Π΅ΠΌ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΌΡ ΡΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π²Π²Π΅ΡΡ ΠΈ Π½Π°Π»Π΅Π²ΠΎ.
- ΠΠ»Ρ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ° ΠΊ ΡΠ°ΡΠ΅ ΠΏΡΠ°Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΠΎΠΊΠ° Π°Π²ΡΠΎ ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠ½ΡΡΠΈΠ΅ Π΄Π΅ΠΊΠΎΡΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠΉ ΠΊΡΡΡΠΊΠΈ ΠΌΠΎΡΠΎΡΠ°. ΠΠ΄Π΅ΡΡ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ ΠΎΡΠΊΡΡΡΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ ΠΌΠ°ΡΠ»ΠΎ-Π·Π°Π»ΠΈΠ²Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ±ΠΊΡ, Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΎΡΠ²ΠΈΠ½ΡΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ 4 ΠΊΡΠ΅ΠΏΠ΅ΠΆΠ½ΡΡ ΡΠ·Π»Π° ΠΈ ΡΡΠ½Π΅ΠΌ ΠΊΡΡΡΠΊΡ (ΠΎΡΡΠ΅Π»ΠΊΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ).
- ΠΠ·Π²Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΡΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π²ΡΠ΅ΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΠ₯Π ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΡ ΠΏΠ°ΡΡΠΎΠ½Π° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΡΠ°ΡΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΡΡΠ΅Π»ΠΊΠΈ, ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΠ΅Π³ΠΎ Π΅Π³ΠΎ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°Π΅ΠΌ ΠΈΠ· ΠΏΠΎΡΠ°Π΄ΠΎΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π³Π½Π΅Π·Π΄Π°. ΠΡΠ½ΡΠ² ΡΡΠ°ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΡ, ΠΌΠΎΠ½ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌ Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½Ρ Π² ΠΏΠ°ΡΡΠΎΠ½Π½ΡΠΉ ΠΏΠ°Π·. Π’Π΅ΠΏΠ΅ΡΡ Π·Π°ΠΊΡΡΡΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ ΡΠ°ΠΌ ΠΏΠ°ΡΡΠΎΠ½ Π² Π±Π»ΠΎΠΊ.
ΠΠ½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠ΅! Π‘ΠΌΠ΅Π½Π° Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡΡ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ² Π½Π΅ Β«ΡΠ΅ΡΠΏΠΈΡΒ» ΠΊΠ°ΡΠ°Π½ΠΈΡ ΠΏΠ°Π»ΡΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΊ ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈΡ ΠΊΠΎΠ»Π±.
ΠΡΠΎ ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½ΠΎ Ρ ΡΠΈΡΠΊΠΎΠΌ ΠΎΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΎΡΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΊΠΎΠ² ΠΎΡ ΠΏΠΎΡΠΎΠΆΠΈΡΠΎΠ²ΡΡ Π²ΡΠ΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠΉ, ΡΡΠΎ Π½Π΅Π³Π°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎ ΡΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°Π΅ΡΡΡ Π½Π° ΡΠ΅ΡΡΡΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠ°. Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡΠ΅ΠΌ Π² ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ Π»ΠΎΠΏΡΠ°ΡΠΎΠ±ΡΠΌΠ°ΠΆΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠ΅ΡΡΠ°ΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ, Π½Π΅ ΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠ΅Π·ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ Π½Π°ΠΏΡΠ»Π΅Π½ΠΈΡ Π½Π° ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΈΡ Π·ΠΎΠ½Π°Ρ . ΠΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°ΠΆΠΎΠΌ Π»Π°ΠΌΠΏ Π½Π° LADA Granta ΠΈΡ ΠΊΠΎΠ»Π±Ρ ΠΏΡΠΎΡΠΈΡΠ°ΠΉΡΠ΅ ΡΠΏΠΈΡΡΠΎΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΠΌΠΈ ΡΠ°Π»ΡΠ΅ΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ. ΠΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ ΡΠ°ΠΊ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ.
ΠΠΎΠ²ΡΠΈΠΊ Π² Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π»ΠΈΡΡΠ±Π΅ΠΊ
Π‘ΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΠ΅ΡΡΠ° ΠΈ ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅
ΠΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ
ΠΠ±ΠΎΠ·Π½Π°ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ Π»Π°ΠΌΠΏ Π½Π° ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π½Π΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π½ΠΈΡ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡΡΠ΅ΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΡ β ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΠ΅ΠΉ, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ ΡΠΎΠΏΡΡΠΆΠ΅Π½ Ρ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΌΠΈ Π½Π΅Π·Π½Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π½ΡΠ°Π½ΡΠ°ΠΌΠΈ.
- ΠΠ°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ ΡΠ²ΠΎΠ΅ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ Π² ΠΎΠ±Π΅ΠΈΡ ΡΠ°ΡΠ°Ρ .
- ΠΡΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°ΠΆΠ΅ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ² ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ·Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠΎΠ±Π»ΡΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈΡ ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ.
ΠΠ½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠ΅! ΠΡΠ»ΠΈ Π½Π΅ ΡΡΠ΅ΡΡΡ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΡ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΡΠΎ ΡΡΠΎ ΠΏΡΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΊ ΠΌΠ³Π½ΠΎΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΌΡ Π²ΡΡ ΠΎΠ΄Ρ ΠΈΠ· ΡΡΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²Π°. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, Π² Π·ΠΎΠ½Ρ ΡΠΈΡΠΊΠ° ΠΏΠΎΠΏΠ°Π΄Π°Π΅Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡ ΡΠ°Π½ΠΈΡΠ΅Π»Ρ, Π·Π°ΡΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΠΉ ΡΠ΅ΠΏΡ ΠΠ₯Π.
Π ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΊΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° LADA Granta ΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅Ρ ΠΏΡΠΈΠ²Π»Π΅ΠΊΠ°ΡΡ ΡΠ΅ΡΡΠ΅Ρ Ρ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΌ Π² Π½Π΅ΠΌ ΡΠ΅ΠΆΠΈΠΌΠΎΠΌ Π²ΠΎΠ»ΡΡΠΌΠ΅ΡΡΠ°. ΠΠ΅ΡΠ΅Π΄ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΎΡΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏ Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Π΅ΠΌ ΠΠ₯Π. ΠΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠΎΠ½ΡΠ°ΠΊΡΡ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ½ΠΈΠΊΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΡ Π½Π°ΠΏΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΊ ΠΈΡ ΠΏΠΎΠ²Π΅ΡΡ Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π½ΠΎΡΠΈΠΌ ΡΡΠΏΡ Π²ΠΎΠ»ΡΡΠΌΠ΅ΡΡΠ° (ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΡΠΉ Ρ ΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΌ). Π‘ΠΌΠΎΡΡΠΈΠΌ Π½Π° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΈΡ ΠΈ, Π΅ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ ΠΎΡΡΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΡΠΎ ΡΡΠΎ ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅ΡΠ΅Π»ΡΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΎ Π½Π°ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΠΏΠΎΡΡΠ΄ΠΊΠ° (ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ) ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ. Π¦ΠΈΡΡΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΡΡΠ΅Ρ Π² ΡΠ°ΠΊΠΎΠΌ ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Π²ΡΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ Π½Π° ΡΠΊΡΠ°Π½ Β«ΠΌΠΈΠ½ΡΡΒ», Π° Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ²ΡΠΉ β Β«Π·Π°Π³ΠΎΠ½ΡΠ΅ΡΒ» ΡΡΡΠ΅Π»ΠΊΡ Π½ΠΈΠΆΠ΅ Β«Π½ΡΠ»ΡΒ».
ΠΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°ΠΆΠ° ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΠΠ₯Π
ΠΡΠ»ΠΈ Π½Π΅ ΡΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡ ΠΎΡΡΡΠΊΠ°ΡΡ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²Π° Π΄Π»Ρ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° Π±Π΅Π· ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅ΠΉ, ΡΠΎ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡΡΡΡ Π½Π° ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠ½ΡΡ ΠΈΠ·Π΄Π΅Π»ΠΈΠΉ. ΠΠ΄Π΅ΡΡ ΠΏΠΎΠ½Π°Π΄ΠΎΠ±ΠΈΡΡΡ ΡΠΎΠ±ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ, Π° Π΅Π³ΠΎ ΠΎΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠ΄ΠΈΠ²ΡΠΈΠ΅ΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ°ΠΊΡΡ ΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΠ½ΡΡΡ ΠΏΠΎΠ΄ ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°ΠΆΠ½ΡΠ΅ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠΈΡ.
ΠΠΎΡΠ»Π΅ Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π΄ΡΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΡ Π½Π΅ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΠ΅Ρ Π²ΡΠ±ΡΠ°ΡΡΠ²Π°ΡΡ. ΠΡΠΎ ΠΎΠ±ΡΡΡΠ½ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±Π½ΠΎΡΡΡΡ ΡΠΎΠ±Π»ΡΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΠ°, ΡΠ΅Π³ΡΠ»ΠΈΡΡΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π½ΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎ-ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΡΠ΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΊ Π°ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΠ°ΠΌ Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ, ΡΡΠΎ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ΅Ρ -ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°. ΠΡΠ»ΠΈ ΡΡΠΈΠΌ ΠΏΡΠ΅Π½Π΅Π±ΡΠ΅ΡΡ, ΡΠΎ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ ΡΠΈΡΠΊ Π·Π°ΠΏΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΊΡΠΏΠ»ΡΠ°ΡΠ°ΡΠΈΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Ρ Ρ Π΄ΠΎΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΠΊΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈ ΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π΄Π½ΠΎΠΌ ΡΠ΅Ρ ΠΎΡΠΌΠΎΡΡΠ΅.
Π‘Π΅Π³ΠΎΠ΄Π½Ρ ΡΡΠ½ΠΎΡΠ½Π°Ρ ΡΠ΅ΡΡ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½Π° ΠΏΡΠ΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠΈΡΡ ΠΌΠ°ΡΡΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ² Π΄Π»Ρ LADA Granta, ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡΡΠΈΡ ΡΠ°Π·Π½ΡΠΌ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠΎΠΌ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ. ΠΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ ΡΠ΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠ΅ Π½ΠΎΡΠΌΡ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡΡΡ ΠΎ Π΄ΠΎΠΏΡΡΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π±Π΅Π»ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΆΠ΅Π»ΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΡΠ΅Π½ΠΊΠ° Π΄Π»Ρ ΠΠ₯Π, Π° ΠΎΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ Π°Π»ΡΡΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠΈΠ²Ρ Π·Π°ΠΏΡΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ.
ΠΡΠΈΠ±ΠΎΡΡ Π½Π° ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, Π² ΡΠΎΠΌ ΡΠΈΡΠ»Π΅ ΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ ΠΠ₯Π ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΎΡ Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΡΡ ΡΡΠ°Π²Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΌΠ΅Π½ΡΡΠΈΠΌ ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠΈ. ΠΡΠΎ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ Π² Π΄Π°Π»ΡΠ½Π΅ΠΉΡΠ΅ΠΌ ΡΠ½ΠΈΠ·ΠΈΡΡ ΡΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ Π½Π°Π³ΡΡΠ·ΠΊΠΈ Π½Π° ΠΠΠ. ΠΠ°Π±ΡΠ² ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΆΠ΄Ρ Π΄Π΅Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΠΠ₯Π Π½Π° Π½ΠΎΡΡ, Π²Ρ Π²ΡΠ΅ ΡΠ°Π²Π½ΠΎ ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡΡΠ΅ΡΠ΅ ΡΠΈΡΠΊ ΡΠ°Π·ΡΡΠ΄ΠΊΠΈ Π°ΠΊΠΊΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΎΡΠ°.
ΠΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²ΠΎ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ° ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠ΅ Π² ΡΡ Π΅ΠΌΠ΅ ΡΠ΅Π»Π΅, Π½Π΅ΡΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΡΡΡ Π·Π° ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»Π° ΠΠ₯Π. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ, Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ΅ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ²ΠΎ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΏΠΎΠ΄Π°ΡΡ ΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΈΡ ΠΊ ΡΡΠΎΠΏ-ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π°ΠΌ ΠΈ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅ΠΊΡΠΎΡΡ. ΠΠ²ΠΈΠ΄Ρ ΡΠ½ΠΈΠΆΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΎΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ²Π΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΡΡΡΡΠΎΠΉΡΡΠ² Π½Π° Π°Π²ΡΠΎ LADA Granta, ΡΠ΅Π»Π΅ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π½Π΅ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΊΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π½ΠΈΡ, ΡΠ΅ΡΡΡ Π½Π° Π½Π΅ΠΈΡΠΏΡΠ°Π²Π½ΠΎΡΡΡ ΠΠ₯Π. ΠΡΠΈ ΡΠ°ΠΊΠΎΠΉ ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ½Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° Β«ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠΊΠ΅Β» Π±ΡΠ΄Π΅Ρ Π°ΠΊΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ Π½Π°Π΄ΠΎΠ΅Π΄Π»ΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡΠΎΡΠΎΠΉ, Π° Π²ΡΡΡΠΎΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡ ΠΈΠ·Π΄Π°Π²Π°ΡΡ Π·Π²ΡΠΊΠΎΠ²ΡΠ΅ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Ρ. Π§ΡΠΎΠ±Ρ Π»ΠΈΠΊΠ²ΠΈΠ΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡ, ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅ΡΡΡ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° ΡΡΠ°Π½Π΄Π°ΡΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΠ°Π½Π΅Π»ΠΈ Π½Π° ΡΠΊΡΠΏΠΎΡΡΠ½ΡΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³, ΡΡΡΠ°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΡΠΉ Π² Π΅Π²ΡΠΎΠΏΠ΅ΠΉΡΠΊΠΈΠ΅ Π²Π΅ΡΡΠΈΠΈ ΠΠ°Π΄Π° ΠΡΠ°Π½ΡΠ°. Π ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡΠΊΡ Ρ ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΡΡ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΠΌΡ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π»ΠΈ Π²ΡΡΠ΅.
ΠΠ΅ΡΠ»Π΅Π²Π°Ρ ΠΈΠ·ΠΎΡΠ΅ΡΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠ°Ρ Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΡ (LAMP) — ΠΎΠ±Π·ΠΎΡ ΠΈ ΠΊΠ»Π°ΡΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ
Π ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΡ 20 Π»Π΅Ρ ΠΈΠ·ΠΎΡΠ΅ΡΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ΅ΡΡΡ Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠΈ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ ΠΏΡΠ΅Π²ΡΠ°ΡΠΈΠ»ΠΈΡΡ Π² Π²Π°ΠΆΠ½ΡΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½Ρ Π½Π΅ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ»ΠΈΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ, Π½ΠΎ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π΄Π»Ρ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»Ρ ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π° ΠΏΠΈΡΠ΅Π²ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΎΠ² ΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΡΠΈΠ½Π³Π° ΠΎΠΊΡΡΠΆΠ°ΡΡΠ΅ΠΉ ΡΡΠ΅Π΄Ρ. ΠΠ΅ΡΠ»Π΅Π²Π°Ρ ΠΈΠ·ΠΎΡΠ΅ΡΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠ°Ρ Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΡ (LAMP) Ρ ΠΎΡΠΎΡΠΎ ΠΈΠ·Π²Π΅ΡΡΠ½Π° ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΉ Π½Π°Π΄Π΅ΠΆΠ½ΠΎΠΉ, Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΡΡΠ²ΡΡΠ²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΈ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ ΡΠ΅Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ ΠΠΠ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠ³Π°Π΅ΡΡΡ Π·Π° ΡΡΠ΅Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π΄ΠΎ ΡΠ΅ΡΡΠΈ ΠΏΡΠ°ΠΉΠΌΠ΅ΡΠΎΠ².ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, LAMP Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΡΠ²ΠΎΠΈΠΌΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΡΠ΅ΡΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΠΈ ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΎΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΡΠΌΠΈ ΡΡΠ΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡΠΌΠΈ ΠΊ ΡΡΠΈΠ»Π΅Π½ΠΈΡ, ΡΡΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Π΅Ρ Π΅Π³ΠΎ Π³Π»Π°Π²Π½ΡΠΌ ΠΊΠ°Π½Π΄ΠΈΠ΄Π°ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ Π½Π΅Π΄ΠΎΡΠΎΠ³ΠΎΠΉ Π΄ΠΈΠ°Π³Π½ΠΎΡΡΠΈΠΊΠΈ ΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π² ΡΠ»ΡΡΠ°Π΅ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ. Π ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½Π΅Π΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ, ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΡΠ΅ Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅Π»ΠΈ Π±ΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π΅ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΡ, Π² ΠΎΡΠ»ΠΈΡΠΈΠ΅ ΠΎΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ, Π½Π΅ Π·Π°Π²ΠΈΡΡΡΠΈΡ ΠΎΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΠΎΠ½ΠΈ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡΡ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΉ ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ ΠΏΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΊ ΡΠ΅Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ ΠΠΠ. ΠΠ° ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ 13 Π»Π΅Ρ ΠΏΠΎΡΠ²ΠΈΠ»ΠΎΡΡ ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ², Π·Π°Π²ΠΈΡΡΡΠΈΡ ΠΎΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ Π½Π° ΠΎΡΠ΅Π½Ρ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π·Π½ΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°Ρ Π·ΠΎΠ½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Ρ ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅, ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΡΠ½ΠΎΠ΅, ΠΏΡΠ΅Π·ΠΎΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅, ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΡ ΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΈ ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΡΠΎΡΠ΅Π·ΠΈΡΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ Π·ΠΎΠ½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅.Π§ΡΠΎΠ±Ρ Π΄Π°ΡΡ ΡΡΡΡΠΊΡΡΡΡ ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π·Π½ΠΎΠΌΡ ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ², ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ½ΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΠΌΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π»ΠΈ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ ΠΊΠ»Π°ΡΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΡ ΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ ΡΡΠ°Π²Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΡ Π² ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ Ρ ΠΊΠ°ΡΠ°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠΌ ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΈΠ΅Π² (Π°Π½Π°Π»ΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Ρ Π°ΡΠ°ΠΊΡΠ΅ΡΠΈΡΡΠΈΠΊΠΈ, ΠΌΡΠ»ΡΡΠΈΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅, ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½Π°Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠ° ΠΈ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ). ΠΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ, ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠ΅Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ², ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±Π°ΡΡΠ²Π°ΡΡΡΡ Π½Π° ΠΎΡΠΊΡΡΡΡΡ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΎΡΠΌΠ°Ρ ΠΈ ΡΠ΄ΠΎΠ²Π»Π΅ΡΠ²ΠΎΡΡΠ΅Ρ Π²ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΈΡΠΌ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΡΠΈΡΠ»Π΅Π½Π½ΡΠΌ ΡΠ°Π½Π΅Π΅. ΠΠΏΠΏΠ°ΡΠ°ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΡΠ΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΡΠΆΠ΄Π°ΡΡΡΡ Ρ ΡΠΎΡΠΊΠΈ Π·ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ»ΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡΠΈ, ΠΏΠΎΡΡΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈ ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΡΡΠ½ΡΡ ΠΊΠ°ΡΡΡΠΈΠ΄ΠΆΠ΅ΠΉ.ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π΅ΡΡΡ ΡΡΠΎΠ²Π΅Π½Ρ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ Π³ΠΎΡΠΎΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈ ΡΠΈΠΏ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΎΡΠΌΡ (ΠΎΡΠΊΡΡΡΠ°Ρ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ , Π°Π΄Π°ΠΏΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½Π°Ρ ΠΊ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΌ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°ΠΌ), ΠΏΡΠΈΡΠ΅ΠΌ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΡΡ ΠΈΠ³ΡΠ°Π΅Ρ Π²Π°ΠΆΠ½ΡΡ ΡΠΎΠ»Ρ Π² ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠ°ΡΡΡΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ ΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ ΡΡΠ°ΠΏΠΎΠ² ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ°. ΠΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π΅ΠΌ ΡΠΎΡΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π²ΡΡΡΠΎΠ΅Π½Π½ΡΡ Π² ΡΠΌΠ°ΡΡΡΠΎΠ½Ρ Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠΎΠ² Π΄Π»Ρ ΡΠ»ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΠ΅ΠΊ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ LAMP. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ°Π·ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠΈ Π² ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Π°Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ LAMP Π΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡΡΠΈΡΡΡΡ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΈΠΉ ΠΏΠΎΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ°Π» Π΄Π»Ρ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ Π±ΡΠ΄ΡΡΠΈΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ.
ΠΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ Π·ΠΎΠ½Π΄ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ FRET Π΄Π»Ρ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΎΡΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π°Π΄Π΅Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ½-5′-ΡΡΠΈΡΠΎΡΡΠ°ΡΠ°
Π ΡΡΠΎΠΉ ΡΡΠ°ΡΡΠ΅ ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π΅ΡΡΡ ΠΎ Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΌ ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΌ Π·ΠΎΠ½Π΄Π΅ Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π°Π΄Π΅Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ½-5′-ΡΡΠΈΡΠΎΡΡΠ°ΡΠ° (ΠΠ’Π€), ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½ Π½Π° ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΌΠΎΠ΄ΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ ΡΠ΅Π·ΠΎΠ½Π°Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠ° ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠΈ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ (FRET) Π² ΡΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π½ΠΈΠΈ Ρ ΠΌΠ΅Ρ Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠΌ Π²ΠΎΡΠΏΡΠΈΡΡΠΈΡ ΡΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ, Π²ΡΠ·Π²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π³ΡΠ΅Π³Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ (ACQ).ΠΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ»ΡΠΎΡΠΎΡΠΎΡΠΎΠ² ΠΊΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Π° Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ Π΄ΠΎΠ½ΠΎΡΠΎΠ² FRET Π² Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΡΡ ΡΠ΅ΠΏΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΡΠΈΠΎΡΠ΅Π½Π° (PT) Π² ΠΊΠ°ΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅ Π°ΠΊΡΠ΅ΠΏΡΠΎΡΠ° FRET ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ Π·ΠΎΠ½Π΄. ΠΡΠΈ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΠ’Π€ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠ° ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ / ΠΠ’Π€ ΠΏΡΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΊ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΌ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡΠΌ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΏΠΈ Π Π’ ΠΎΡ ΡΠ»ΡΡΠ°ΠΉΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠ»ΡΠ±ΠΊΠ° ΠΊ ΠΏΠ»ΠΎΡΠΊΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΈ Π°Π³ΡΠ΅Π³Π°ΡΠΈΠΈ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΠ’Π€ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠ³Π½ΡΡΠΎ Π·Π° ΡΡΠ΅Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠ΅ΠΈΠΌΡΡΠ΅ΡΡΠ² ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΡΡΠΈΡ Π΄Π»Ρ ΠΌΠΎΠ΄ΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ FRET ΠΎΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠΎΡΠΎΡΠΎΠ² ΠΊΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ½Π° Π΄ΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΏΠΈ Π Π’ Π΄ΠΎ ΠΈ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΠ’Π€ Π² ΡΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π½ΠΈΠΈ Ρ ACQ.ΠΠΎΠ½Π΄ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π» ΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° Π΄Π²ΠΎΠΉΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΈ ΡΠΈΠΏΠ° ΠΊΠ°ΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ ΠΏΡΠΈ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ Ρ ΡΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠΌ ΡΡΠΎΠ΄ΡΡΠ²ΠΎΠΌ ( K ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ = 3,12 Γ 10 4 M -1 ) Ρ ΠΠ’Π€ Π² Π²ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠ΅, ΡΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ Π΄Π»Ρ ADP, AMP ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΡΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΈΡ Π°Π½ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ² ΡΠ²Π½ΡΡ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΈ Π½Π΅ Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡ. ΠΠΎΠ½Π΄ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΠ’Π€ Π½Π΅Π²ΠΎΠΎΡΡΠΆΠ΅Π½Π½ΡΠΌ Π³Π»Π°Π·ΠΎΠΌ ΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΡΠΈΠ½Π³Π° ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΠ»ΠΈΠ·Π° ΠΠ’Π€ Π°ΠΏΠΈΡΠ°Π·ΠΎΠΉ Π² ΡΠ΅ΠΆΠΈΠΌΠ΅ ΡΠ΅Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Π² ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ ΡΠΈΠ·ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ pH.
Π£ Π²Π°Ρ Π΅ΡΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏ ΠΊ ΡΡΠΎΠΉ ΡΡΠ°ΡΡΠ΅
ΠΠΎΠ΄ΠΎΠΆΠ΄ΠΈΡΠ΅, ΠΏΠΎΠΊΠ° ΠΌΡ Π·Π°Π³ΡΡΠ·ΠΈΠΌ Π²Π°Ρ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½Ρ… Π§ΡΠΎ-ΡΠΎ ΠΏΠΎΡΠ»ΠΎ Π½Π΅ ΡΠ°ΠΊ. ΠΠΎΠΏΡΠΎΠ±ΡΠΉ Π΅ΡΠ΅ ΡΠ°Π·?ΠΠΎΡΡΠ΄Π°ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½Π°Ρ ΡΡΠ±ΡΠΈΠ΄ΠΈΡ Π½Π° Ρ ΠΎΡΠΎΡΠΈΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½Ρ — 5337
ΠΠΎΡΡΠ΄Π°ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½Π°Ρ ΠΏΡΠΎΠ³ΡΠ°ΠΌΠΌΠ° ΡΡΠ±ΡΠΈΠ΄ΠΈΠΉ Π½Π° Ρ ΠΎΡΠΎΡΠΈΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½Ρ (49 U.S.C. 5337) ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΎΠ΅ΠΊΡΠΎΠ² ΠΏΠΎ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΌΡ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ, Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΈ ΡΠ΅Π°Π±ΠΈΠ»ΠΈΡΠ°ΡΠΈΠΈ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΡΡ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΠΏΡΡΠ΅ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΈ Π°Π²ΡΠΎΠ±ΡΡΠ½ΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ½ΡΠΌ Π°Π³Π΅Π½ΡΡΡΠ²Π°ΠΌ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°ΡΡ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Ρ Π² Ρ ΠΎΡΠΎΡΠ΅ΠΌ ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠΈ. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, Π³ΡΠ°Π½ΡΡ SGR ΠΈΠΌΠ΅ΡΡ ΠΏΡΠ°Π²ΠΎ Π½Π° ΡΠ°Π·ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΡ ΠΈ ΡΠ΅Π°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΡ ΠΏΠ»Π°Π½ΠΎΠ² ΡΠΏΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠ°Π½Π·ΠΈΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ.
Π‘ΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅Π»ΠΈ
ΠΡΠ°Π²ΠΎΠΌΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅Π»ΠΈ — ΡΡΠΎ ΠΎΡΠ³Π°Π½Ρ Π³ΠΎΡΡΠ΄Π°ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π²Π»Π°ΡΡΠΈ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΠΏΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ Π² Π£ΠΠ Ρ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π½Π°ΠΏΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΠΌΠΈ ΠΈ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ°ΠΌΠΈ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΡΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π²ΡΠΎΠ±ΡΡΠ°, ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°ΡΡΠΈΠΌΠΈ Π΄ΠΎΡ ΠΎΠ΄Ρ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΡΠ΅ΠΌΠΈ Π»Π΅Ρ.
ΠΠΎΠΏΡΡΡΠΈΠΌΡΠ΅ Π²ΠΈΠ΄Ρ Π΄Π΅ΡΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ
State of Good Repair Grants Π‘ΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π° Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ΅ΠΊΡΠΎΠ², ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Ρ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π°ΠΏΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ Π°Π²ΡΠΎΠ±ΡΡΠ° Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΉ ΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ Π² ΡΠΎΡΡΠΎΡΠ½ΠΈΠΈ Ρ ΠΎΡΠΎΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠ΅ΠΌΠΎΠ½ΡΠ°, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Ρ ΠΏΡΠΎΠ΅ΠΊΡΡ ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΈ Π²ΠΎΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΡ:
- ΠΏΠΎΠ΄Π²ΠΈΠΆΠ½ΠΎΠΉ ΡΠΎΡΡΠ°Π²
- ΡΡΠ΅ΠΊ
- Π»ΠΈΠ½Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ
- ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Ρ ΠΈ ΡΠ²ΡΠ·Ρ
- ΡΠ½Π΅ΡΠ³Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΡΡΠ°Π½ΡΠΈΠΈ
- ΠΏΠ°ΡΡΠ°ΠΆΠΈΡΡΠΊΠΈΡ Π²ΠΎΠΊΠ·Π°Π»ΠΎΠ² ΠΈ ΡΠ΅ΡΠΌΠΈΠ½Π°Π»ΠΎΠ²
- ΠΎΡ ΡΠ°Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ
- ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΈ ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
- ΠΎΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΠΎ-Π²ΡΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Ρ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡΡΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ³ΡΠ°ΠΌΠΌΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅;
, Π° ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠ΅Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΡ ΠΏΠ»Π°Π½Ρ ΡΠΏΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠΎΡΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π°ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ.
ΠΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ ΡΡΡΠ»ΠΊΠΈ
49 U.S.C. Π Π°Π·Π΄Π΅Π» 5337 / ΠΠ°ΠΊΠΎΠ½ ΠΎ FAST Π Π°Π·Π΄Π΅Π» 3015
ΠΠΎΡΡΡΠΏΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²
Π€ΠΎΠ½Π΄Ρ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠ·Π°ΡΠ΅Π»ΡΡΡΠ² Π½Π° ΡΠ΅ΡΡΡΠ΅ ΡΠΈΠ½Π°Π½ΡΠΎΠ²ΡΡ Π³ΠΎΠ΄Π°. Π‘ΡΠ΄Π° Π²Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΡΠΈΠ½Π°Π½ΡΠΎΠ²ΡΠΉ Π³ΠΎΠ΄, Π² ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠΌ ΡΡΠΌΠΌΠ° Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ΅ΡΡΡ, ΠΏΠ»ΡΡ ΡΡΠΈ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ Π³ΠΎΠ΄Π°.
Π Π°ΡΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠΈΠ½Π°Π½ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ
Π Π°ΡΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ² ΠΎΡΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΏΠΎ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌ ΡΠΎΡΠΌΡΠ»Π΅. Π‘ΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π°, Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ UZA Π½Π° Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΡΠ΅ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ Π½Π°ΠΏΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΡ , ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π½Π° Π΄ΠΎΡ ΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΠΌΠΈΠ»ΡΡ ΠΈ ΠΌΠΈΠ»ΡΡ ΠΌΠ°ΡΡΡΡΡΠ°, ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π΅ΠΌΡΡ Π² ΠΠ°ΡΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΡΡ Π±Π°Π·Ρ Π΄Π°Π½Π½ΡΡ ΡΡΠ°Π½Π·ΠΈΡΠ½ΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π²ΠΎΠ·ΠΎΠΊ (NTD), ΠΈ Π½Π° ΡΠΎΠΌ, ΡΡΠΎ UZA ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΠ»ΠΎ Π±Ρ Π² ΡΠΎΡΠΌΡΠ»Π΅ ΠΌΠΎΠ΄Π΅ΡΠ½ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ Π½Π°ΠΏΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΡ ΠΏΡΡΠ΅ΠΉ Π½Π° 2011 ΡΠΈΠ½Π°Π½ΡΠΎΠ²ΡΠΉ Π³ΠΎΠ΄ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠ΅ΠΊΡΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ Π½Π°ΠΏΡΠ°Π²Π»ΡΡΡΠΈΡ . .Π€ΠΎΠ½Π΄Ρ Π΄Π»Ρ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠΈΠ½ΡΠ΅Π½ΡΠΈΠ²Π½ΡΡ Π°Π²ΡΠΎΠ±ΡΡΠΎΠ² Π²ΡΠ΄Π΅Π»ΡΡΡΡΡ UZA Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΌΠΈΠ»Ρ Π΄ΠΎΡ ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΈ ΠΌΠΈΠ»Ρ ΠΌΠ°ΡΡΡΡΡΠ°, ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π΅ΠΌΡΡ NTD.
ΠΠ°ΡΡ
Π€Π΅Π΄Π΅ΡΠ°Π»ΡΠ½Π°Ρ Π΄ΠΎΠ»Ρ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ»Π΅ΠΌΡΡ ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ Π·Π°ΡΡΠ°Ρ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ 80 ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΎΡ ΡΠΈΡΡΠΎΠΉ ΡΡΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΠΎΠ΅ΠΊΡΠ°, Π΅ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΠ΅Π»Ρ Π³ΡΠ°Π½ΡΠ° Π½Π΅ Π·Π°ΠΏΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΉ ΠΏΡΠΎΡΠ΅Π½Ρ.
Π Π°Π·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π° Π³ΡΠ°Π½Ρ: 49 U.S.C. 5337
ΠΡΠΎΠΈΠ·ΠΎΡΠ»Π° ΠΎΡΠΈΠ±ΠΊΠ° ΠΏΡΠΈ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΉΠ»Π° cookie
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ.ΠΡΠ»ΠΈ Π²Π°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π½Π΅ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, Π²Ρ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΡΠΈΠ²Π°ΡΡ ΡΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ.
ΠΠ°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠ° Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ° Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ° ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie
Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²ΡΠ΅Ρ ΠΌΠ½ΠΎΠΆΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½, ΠΏΠΎ ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΌ cookie Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π±ΡΡΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎ. ΠΠΈΠΆΠ΅ ΠΏΡΠΈΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Ρ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠ°ΡΡΡΠ΅ ΠΏΡΠΈΡΠΈΠ½Ρ:
- Π Π²Π°ΡΠ΅ΠΌ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ΅ ΠΎΡΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie. ΠΠ°ΠΌ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΡΠ±ΡΠΎΡΠΈΡΡ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ ΡΠ²ΠΎΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅ΡΠ°, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ½ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π» ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, ΠΈΠ»ΠΈ ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΏΡΠΎΡΠΈΡΡ, Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅ Π»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie.
- ΠΠ°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ ΡΠΏΡΠ°ΡΠΈΠ²Π°Π΅Ρ Π²Π°Ρ, Ρ ΠΎΡΠΈΡΠ΅ Π»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie, ΠΈ Π²Ρ ΠΎΡΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈΡΡ.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΈΠ½ΡΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Ρ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΠΉΡΠ°, Π½Π°ΠΆΠΌΠΈΡΠ΅ ΠΊΠ½ΠΎΠΏΠΊΡ Β«ΠΠ°Π·Π°Π΄Β» ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠΈΡΠ΅ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie.
- ΠΠ°Ρ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie. ΠΡΠ»ΠΈ Π²Ρ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ·ΡΠ΅Π²Π°Π΅ΡΠ΅ ΡΡΠΎ, ΠΏΠΎΠΏΡΠΎΠ±ΡΠΉΡΠ΅ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΉ Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ.
- ΠΠ°ΡΠ° Π½Π° Π²Π°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ΅ Π² ΠΏΡΠΎΡΠ»ΠΎΠΌ. ΠΡΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡ Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·ΡΠ²Π°ΡΡ Π΄Π°ΡΡ Π΄ΠΎ 1 ΡΠ½Π²Π°ΡΡ 1970 Π³., Π±ΡΠ°ΡΠ·Π΅Ρ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ Π·Π°Π±ΡΠ΄Π΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ» cookie. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΈΡΠΏΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΡΡΠΎ, ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡΠ΅ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΡΠ½ΠΎΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈ Π΄Π°ΡΡ Π½Π° ΡΠ²ΠΎΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ΅.
- ΠΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠΎΠ΅ ΠΎΡΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π»ΠΎΠΊΠΈΡΡΠ΅Ρ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΡ ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie.ΠΡ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ ΠΎΡΠΊΠ»ΡΡΠΈΡΡ ΠΏΡΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΈ Π²Ρ ΠΎΠ΄Π΅ Π² ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ»ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡΡΡ Ρ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ½ΡΠΌ Π°Π΄ΠΌΠΈΠ½ΠΈΡΡΡΠ°ΡΠΎΡΠΎΠΌ.
ΠΠΎΡΠ΅ΠΌΡ ΡΡΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΠΉΡΡ ΡΡΠ΅Π±ΡΡΡΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie?
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, Π·Π°ΠΏΠΎΠΌΠΈΠ½Π°Ρ, ΡΡΠΎ Π²Ρ Π²ΠΎΡΠ»ΠΈ Π² ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΏΠ΅ΡΠ΅Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅ ΡΠΎ ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ Π½Π° ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏ Π±Π΅Π· ΡΠ°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π±ΡΠ΅Ρ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ°ΠΉΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°Π» Π½ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΠ΅Π°Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΡΡΡΠ°Π½ΠΈΡΡ, ΡΡΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π΄Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π±ΠΎΡΡ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΠΎ Π½Π΅ΠΏΡΠΈΠ΅ΠΌΠ»Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΎΠ²Π½Ρ.
Π§ΡΠΎ ΡΠΎΡ ΡΠ°Π½ΡΠ΅ΡΡΡ Π² ΡΠ°ΠΉΠ»Π΅ cookie?
ΠΡΠΎΡ ΡΠ°ΠΉΡ Π½Π΅ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΡ Π½ΠΈΡΠ΅Π³ΠΎ, ΠΊΡΠΎΠΌΠ΅ Π°Π²ΡΠΎΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ΄Π΅Π½ΡΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΎΡΠ° ΡΠ΅Π°Π½ΡΠ° Π² cookie; Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠ°Ρ Π΄ΡΡΠ³Π°Ρ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ Π½Π΅ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΡΠ΅ΡΡΡ.
ΠΠ°ΠΊ ΠΏΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, Π² ΡΠ°ΠΉΠ»Π°Ρ cookie ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΡΡΡΡ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΠΈΠ½ΡΠΎΡΠΌΠ°ΡΠΈΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΡ Π²Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅ΡΠ΅, ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΡΠ±ΠΎΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ Π²Ρ Π΄Π΅Π»Π°Π΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π²Π΅Π±-ΡΠ°ΠΉΡΠ°. ΠΠ°ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Ρ, ΡΠ°ΠΉΡ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΠΈΡΡ Π²Π°ΡΠ΅ ΠΈΠΌΡ ΡΠ»Π΅ΠΊΡΡΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΡΡ, ΠΏΠΎΠΊΠ° Π²Ρ Π½Π΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅ΡΠ΅ Π΅Π³ΠΎ. Π Π°Π·ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π²Π΅Π±-ΡΠ°ΠΉΡΡ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°ΡΡ ΡΠ°ΠΉΠ»Ρ cookie Π½Π΅ Π΄Π°Π΅Ρ ΡΡΠΎΠΌΡ ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΡΠ±ΠΎΠΌΡ Π΄ΡΡΠ³ΠΎΠΌΡ ΡΠ°ΠΉΡΡ Π΄ΠΎΡΡΡΠΏΠ° ΠΊ ΠΎΡΡΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ°ΡΡΠΈ Π²Π°ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡΡΡΠ΅ΡΠ°, ΠΈ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ ΡΠ°ΠΉΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠΉ ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π» ΡΠ°ΠΉΠ» cookie, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ Π΅Π³ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΈΡΠ°ΡΡ.
ΠΠ½Π°Π»ΠΈΠ·LAMP Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π ΠΠ SARS-CoV-2 Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΊΠΎΠ»ΠΎΡΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΠΏΠΎΠ³Π»ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ
ΠΠ°ΡΠ΅ΡΠΈΠ°Π»Ρ ΠΈ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄Ρ
ΠΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΈΠΊΠ° ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ°
FLUOstar Omega ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½Π°Π³ΡΠ΅Π²Π°Π»ΠΈ Π΄ΠΎ 65 Β° C Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 2.ΠΠ° 5 Ρ Π΄ΠΎ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΠΈ LAMP-Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°. ΠΠΎΠ·. ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»Ρ, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ Π² Π½Π°Π±ΠΎΡ Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP (n-Π³Π΅Π½), ΡΠ°Π·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ 1:10 Π² Π²ΠΎΠ΄Π΅, ΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΠΎΡ Π½ΡΠΊΠ»Π΅Π°Π·, Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΠΈ 100000 ΠΊΠΎΠΏΠΈΠΉ / ΠΌΠΊΠ». ΠΠΎΠ»ΠΎΡΠΈΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΈ LAMP ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΊΠΎΠ½Π΅ΡΠ½ΠΎΠΌ ΡΠ΅Π°ΠΊΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌΠ΅ 5 ΠΌΠΊΠ» (ΡΠΌ. 4). ΠΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½ΡΠΎΠ² Π½Π°Π±ΠΎΡΠ° Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ Ρ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΡΠΌΠΈ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ. ΠΡΠ½ΠΎΠ²Π½Π°Ρ ΡΠΌΠ΅ΡΡ, ΠΏΡΠ°ΠΉΠΌΠ΅ΡΡ, Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΡ
Π»ΠΎΡΠΈΠ΄ Π³ΡΠ°Π½ΠΈΠ΄ΠΈΠ½Π°, Π²ΠΎΠ΄Π°, Π½Π΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠ°Ρ Π½ΡΠΊΠ»Π΅Π°Π·, ΠΈ ΠΌΠ°ΡΡΠΈΡΠ° Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΠΌΠ΅ΡΠ°Π½Ρ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½Π΅ΡΠ΅Π½Ρ Π² ΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΉ 384-Π»ΡΠ½ΠΎΡΠ½ΡΠΉ ΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ΅Ρ ΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 1 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ 400 g.ΠΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΡΠ»ΠΈ Π² ΡΠ΅ΡΡΡΠ΅Ρ
ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ
. ΠΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ ΡΠ°ΡΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΈΠ½Π΅. ΠΠ»Π°Π½ΡΠ΅ΡΡ Π³Π΅ΡΠΌΠ΅ΡΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π³Π΅ΡΠΌΠ΅ΡΠΈΠΊΠ° Π΄Π»Ρ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΠ¦Π , Π° Π·Π°ΡΠ΅ΠΌ ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ Π½Π° FLUOstar Omega, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠ΅ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ, Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΡΠΈΠΊΠ»Π° ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ΅ΡΠ° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½ΠΎ Π½Π° ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠΌ 384-Π»ΡΠ½ΠΎΡΠ½ΠΎΠΌ ΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ΅ΡΠ΅:
ΠΠ°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ ΠΏΡΠΈΠ±ΠΎΡΠ°
ΠΠ°ΡΠ°ΠΌΠ΅ΡΡΡ ΠΎΠΏΡΠΈΠΊΠΈ | ΠΠΎΠ³Π»ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΊΠΈΠ½Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΡΠ΅ΠΆΠΈΠΌ ΠΏΠ»Π°ΡΡΠΈΠ½Ρ | |
Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠΎΠΌΠ΅ΡΡ | 415 Π½ΠΌ 560 Π½ΠΌ | |
ΠΠ±ΡΠΈΠ΅ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ (ΡΠ°ΠΌΡΠ΅ Π±ΡΡΡΡΡΠ΅) | 9014 9013 ΠΡΠ΅ΠΌΡ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ | 0.0 Ρ |
ΠΠΈΠ½Π΅ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Π½Π°ΡΡΡΠΎΠΉΠΊΠΈ | ΠΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠΈΠΊΠ»ΠΎΠ² | 27 |
ΠΡΠ΅ΠΌΡ ΡΠΈΠΊΠ»Π° | 133 Ρ | |
ΠΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΡ | 65 Β° C | |
ΠΠ½Π°Π»ΠΈΠ· Π΄Π°Π½Π½ΡΡ
Π Π°Π·Π½ΠΈΡΡ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ ΠΏΡΠΈ 415 Π½ΠΌ ΠΈ 560 Π½ΠΌ (βOD) ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΡΡΠ²ΡΡΠ²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊ pH ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ²Π΅ΡΠ° Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΠΈ 2 .ΠΡΠ΅ΠΌΡ Π΄ΠΎ ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΡΠΌΠ° ΠΊΡΡΡΠΈΠ·Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΡ
ΠΊΡΠΈΠ²ΡΡ
ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Π° Π±ΡΠ»ΠΎ ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΠ°Π½ΠΎ, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ°ΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π»Ρ. ΠΈ ΠΎΡΡΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ (ΠΎΡΡΠΈΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅) ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΎΠ³ΡΠ°ΠΌΠΌΠ΅ FLUOstar Omega MARS.
Π Π΅Π·ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ ΠΈ ΠΎΠ±ΡΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅
ΠΠ»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡΠΈΠΊΠ°ΡΠΈΠΈ Π½ΡΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΡ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡ βOD ΠΏΠΎΠ·. ΠΈ Π½Π΅Π³. ΠΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»Ρ Π·Π° ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π³ΡΡΠΏΠΏΠΎΠΉ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΡ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 60 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ (ΡΠΈΡ. 2). Π‘ΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ βOD Π½Π°Π±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ·. ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅ΡΠ½ΠΎ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· 18 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π½Π°ΡΠ°Π»Π° Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP. ΠΡΠΎ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ βOD Π² ΠΏΠΎΠ·.ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»Ρ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ» ΡΡΠ°Π²Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π² ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΡ Π»ΡΠ½ΠΊΠ°Ρ -ΡΠ΅ΠΏΠ»ΠΈΠΊΠ°ΡΠΎΡΠ°Ρ ΠΈ ΡΠ΅ΡΡΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ³ΠΎΠ½Π°Ρ . ΠΠ΅Π³. ΡΠ»Π΅ΠΌΠ΅Π½ΡΡ ΡΠΏΡΠ°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ βOD, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ ΡΡΠΎ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·ΠΎΡΠ»ΠΎ ΠΏΠΎΠ·ΠΆΠ΅ ΠΈ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΎ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΉ Π½Π°ΠΊΠ»ΠΎΠ½ ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²ΡΡΠΎΠΊΡΡ Π²Π°ΡΠΈΠ°ΡΠΈΡ ΠΏΠΎ ΡΠΊΠ²Π°ΠΆΠΈΠ½Π°ΠΌ.
Π¦Π΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π»ΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½ΡΡ Π½Π°Π½ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΠΊΠ΅ ΠΈ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΠΎΡΠ΅Π½Π΅Π½Π° Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ FRET-Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ Π² Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅ΠΌ ΠΈΠ½ΡΡΠ°ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΌ Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ Ρ ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΌΡΡΠ΅ΠΉ
Π Π΅ΡΠ΅ΡΠ°Ρ
ΠΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ Π½Π°Π½ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ ΡΡΠΈΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠΎΠ±Π΅ΡΠ°ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΠΊΠ°Π½Π΄ΠΈΠ΄Π°ΡΠ°ΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ Π΄ΠΎΡΡΠ°Π²ΠΊΠΈ Π»Π΅ΠΊΠ°ΡΡΡΠ² ΠΈ Π±ΠΎΡΡΠ±Ρ Ρ ΡΠ°ΠΊΠΎΠΌ ΠΈΠ·-Π·Π° ΠΈΡ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΡΠΎΠΊΡΠΈΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ, Π±ΠΈΠΎΡΠ°Π·Π»Π°Π³Π°Π΅ΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΈ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΠ°ΠΏΡΡΠ»ΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ Π»Π΅ΠΊΠ°ΡΡΡΠ²Π° ΠΈ / ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ°ΡΡΠΈΡΡΡΡΠΈΠ΅ Π°Π³Π΅Π½ΡΡ.ΠΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ ΠΈΡ Π±ΠΈΠΎΠΌΠ΅Π΄ΠΈΡΠΈΠ½ΡΠΊΠΎΠ΅ ΠΏΡΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² Π½Π°ΡΡΠΎΡΡΠ΅Π΅ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΠ³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠ΅Π½ΠΎ ΠΈΠ·-Π·Π° ΠΏΠ»ΠΎΡ ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΠ½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΡ ΠΈΡ ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ in vivo . Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΡΠ΅ΡΠΈΡΡ ΡΡΡ ΠΏΡΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡ, ΠΌΡ ΡΠΎΠΎΠ±ΡΠ°Π΅ΠΌ ΠΎ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΡ ΠΊΠ°ΠΏΠ»ΡΡ Π½Π°Π½ΠΎΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ ΡΠ°Π·ΠΌΠ΅ΡΠΎΠΌ 100 Π½ΠΌ, ΠΈΠ½ΠΊΠ°ΠΏΡΡΠ»ΠΈΡΡΡΡΠΈΡ Π»ΠΈΠΏΠΎΡΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ ΡΠΈΠ°Π½ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΡΠ΅ ΠΊΡΠ°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ 5,5 ΠΈ 7,5 Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ ΠΈΠ½ΡΡΠ°ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π° Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π³ΠΈΠ΄ΡΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ²ΠΎΠΈΠΎΠ½Π° ΡΠ΅ΡΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»Π±ΠΎΡΠ°ΡΠ°. ΠΡΠ΅Π²ΠΎΡΡ ΠΎΠ΄Π½Π°Ρ ΡΡΠΊΠΎΡΡΡ ΠΈ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½Π°Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π΄Π°ΡΠ° ΡΠ½Π΅ΡΠ³ΠΈΠΈ ΡΠ΅Π·ΠΎΠ½Π°Π½ΡΠ° Π€ΡΡΡΡΠ΅ΡΠ° (FRET) Π²Π½ΡΡΡΠΈ Π»ΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½ΡΡ ΠΠ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠΈΡΡ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΡ ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΡ ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΠ Π½Π΅ΠΏΠΎΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ, ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ ΠΈ ΠΊΡΠ΅Π½ΠΎΡΡΠ°Π½ΡΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ°ΡΠ°Ρ ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΌΡΡΠ΅ΠΉ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²ΠΊΠΈ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ Π²ΡΠ΅Π³ΠΎ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ.ΠΡΠ° ΡΠ½ΠΈΠΊΠ°Π»ΡΠ½Π°Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»Π°, ΡΡΠΎ ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π½Π°ΡΠΈΡ FRET NC Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΎΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π·Π΄ΠΎΡΠΎΠ²ΡΡ ΠΌΡΡΠ΅ΠΉ ΡΠΎΡ ΡΠ°Π½ΡΠ΅ΡΡΡ Π½Π° ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ 93% ΡΠ΅ΡΠ΅Π· 6 ΡΠ°ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΡ, Π² ΡΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΠΊΠ°ΠΊ Π² ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈ ΠΎΠ½Π° ΡΠ½ΠΈΠΆΠ°Π΅ΡΡΡ Π΄ΠΎ 66% (ΠΏΠ΅ΡΠΈΠΎΠ΄ ΠΏΠΎΠ»ΡΠ²ΡΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ 8,2 ΡΠ°ΡΠ°). ΠΠΎΠ»Π΅Π΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, ΡΡΠΈ NC Π΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡΡΠΈΡΡΡΡ Π±ΡΡΡΡΠΎΠ΅ ΠΈ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ Π½Π°ΠΊΠΎΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΡΡ , ΠΊΡΠ΄Π° ΠΎΠ½ΠΈ Π²Ρ ΠΎΠ΄ΡΡ Π² ΠΏΠΎΡΡΠΈ Π½Π΅ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΡΠΎΡΠΌΠ΅ (77% ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΡΠ΅ΡΠ΅Π· 2 ΡΠ°ΡΠ°), ΠΏΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅ ΡΠ΅ΠΌ ΡΠ΅ΡΡΡΡ ΡΠ²ΠΎΡ ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π΄ΠΎ 40% ΡΠ΅ΡΠ΅Π· 6 ΡΠ°ΡΠΎΠ² (ΠΏΠ΅ΡΠΈΠΎΠ΄ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°ΡΠΏΠ°Π΄Π° ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ 4,4 ΡΠ°ΡΠ°). Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠΌ, ΠΌΡ ΠΏΡΠ΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅ΠΌ ΠΏΡΠΎΡΡΡΡ ΠΈ Π½Π°Π΄Π΅ΠΆΠ½ΡΡ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡ, ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ Π½Π° ΡΠ°ΡΠΈΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠΈ FRET in vivo Π΄Π»Ρ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ Π½Π°Π½ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ Ρ ΠΌΠ΅Π»ΠΊΠΈΡ ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡΠ½ΡΡ .ΠΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ Π΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌ, ΡΡΠΎ ΠΊΠ°ΠΏΠ»ΠΈ Π½Π°Π½ΠΎΡΠΌΡΠ»ΡΡΠΈΠΈ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΡΡ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΡΠ΄ΠΈΠ²ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΡΡΠ°Π±ΠΈΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ Π½Π°Π½ΠΎΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΊΡΡ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΡΠ΅ ΠΎΡΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΏΠΎΡΡΠΈ Π½Π΅ΠΏΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π² ΠΊΡΠΎΠ²ΠΎΡΠΎΠΊΠ΅ ΠΈ Π²ΡΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠΆΠ΄Π°ΡΡ ΡΠ²ΠΎΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΠΌΠΎΠ΅ Π² ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π½ΠΎΠΌ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΠΏΠΎΠΏΠ°Π΄Π°Π½ΠΈΡ Π² ΠΎΠΏΡΡ ΠΎΠ»ΠΈ.
ΠΠ»ΡΡΠ΅Π²ΡΠ΅ ΡΠ»ΠΎΠ²Π°
ΠΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ Π½Π°Π½ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΈ
In vivo Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΡ
ΠΠ»ΠΈΠΆΠ½ΠΈΠΉ ΠΈΠ½ΡΡΠ°ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΡΠΉ Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ FRET
Π¦Π΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ Π½Π°Π½ΠΎΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΉ
ΠΠΎΠ²ΡΡΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΠΏΡΠΎΠ½ΠΈΡΠ°Π΅ΠΌΠΎΡΡΡ ΠΈ ΡΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
ΠΠΏΡΡ ΠΎΠ»Ρ
Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΡΡΠ°ΡΡΠΈ Π¦ΠΈΡΠΈΡΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΡΠ°ΡΡΠΈ (0) 2016
ΠΠ²ΡΠΎΡΡ.ΠΠΏΡΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½ΠΎ Elsevier BV
Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡΠ΅ΠΌΡΠ΅ ΡΡΠ°ΡΡΠΈ
Π¦ΠΈΡΠΈΡΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΡΠ°ΡΡΠΈ
Π‘Π»ΠΈΡΡΠ΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ GPCR-G, ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΡΠ΅ Ρ ER / K, ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈ ΠΌΠΎΠ΄ΡΠ»ΠΈΡΡΡΡ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ Π²ΡΠΎΡΠΈΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΌΠ΅ΡΡΠ΅Π½Π΄ΠΆΠ΅ΡΠ° Π² ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠ°Ρ
Π Π΅Π°Π³Π΅Π½ΡΡ ΠΈ Π±ΡΡΠ΅ΡΡ
Π€ΠΈΠ±ΡΠΎΠ½Π΅ΠΊΡΠΈΠ½, Π½Π°ΡΡΠΈΠ΅Π²Π°Ρ ΡΠΎΠ»Ρ Π³ΡΠ°Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ½-5′-Π΄ΠΈΡΠΎΡΡΠ°ΡΠ° (GDP), 3-ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΡΠΈΠ»-1-ΠΌΠ΅ΡΠΈΠ»ΠΊΡΠ°Π½ΡΠΈΠ½ (IBMX), (-) — ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ» (+) — Π±ΠΈΡΠ°ΡΡΡΠ°ΡΠ½Π°Ρ ΡΠΎΠ»Ρ, ΡΠΎΡΡΠΊΠΎΠ»ΠΈΠ½ ΠΈ ΡΠ°ΡΡΡΠ°Ρ ΠΌΠ΅ΡΠΎΠΏΡΠΎΠ»ΠΎΠ»Π° Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ Ρ Sigma-Aldrich. ΠΠ΅ΠΌΠΈΡΡΠ»ΡΡΠ°Ρ ΡΠ°Π»ΡΠ±ΡΡΠ°ΠΌΠΎΠ»Π° Π±ΡΠ» ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ Ρ Tocris. n -Π΄ΠΎΠ΄Π΅ΡΠΈΠ»-Ξ²-D-ΠΌΠ°Π»ΡΡΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ΄, Anagrade (DDM) Π±ΡΠ» ΠΊΡΠΏΠ»Π΅Π½ Ρ Anatrace.ΠΠ½ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² GΞ² (SC378) ΠΈ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΎ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΠΠ (MMS-101p) Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ Ρ Santa Cruz Biotechnology ΠΈ Covance ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ. ΠΊΠΠΠ Π΄Π»Ρ ΠΈΠ·ΠΎΡΠΎΡΠΌΡ 3 Ξ±1 A -AR ( Homo sapiens ) ΠΈ Ξ±2 A -AR ( Sus scrofa ) Π±ΡΠ»ΠΈ Π»ΡΠ±Π΅Π·Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π°ΡΠΊΠ°ΠΌΠΈ ΠΎΡ Π΄ΠΎΠΊΡΠΎΡΠ° Π ΠΈΡΠ°ΡΠ΄Π° ΠΠΎΠΉΠ±ΠΈΠ³Π°. ΠΊΠΠΠ Π΄Π»Ρ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ξ²2-AR, Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π²Π°ΡΠΈΠ°Π½ΡΠ° ΡΠΏΠ»Π°ΠΉΡΠΈΠ½Π³Π° GΞ±s, GΞ±i 2 ΠΈΠ·ΠΎΡΠΎΡΠΌΡ 1 ΠΈ GΞ±q Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ Ρ GE (Open Biosystems). Π§Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ A 1 R Π±ΡΠ» ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ ΠΈΠ· ΡΠ΅ΠΏΠΎΠ·ΠΈΡΠΎΡΠΈΡ ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄ DNASU. Π Π΅Π°Π³Π΅Π½ΡΡ Π΄Π»Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΠΠ X-tremeGENE HP ΠΈ ΠΠΠ Mirus-LT Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈΠΎΠ±ΡΠ΅ΡΠ΅Π½Ρ Ρ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°Π½ΠΈΠΉ Roche ΠΈ Mirus ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ.ΠΡΡΠ΅Ρ A ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ 20 ΠΌΠ HEPES, 5 ΠΌΠ KCl, 145 ΠΌΠ NaCl, 2 ΠΌΠ CaCl 2 , 1 ΠΌΠ MgCl 2 , 0,2% Π΄Π΅ΠΊΡΡΡΠΎΠ·Ρ (ΠΌΠ°Ρ. / ΠΠ±.), 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° ΠΈ 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ». -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ pH 7,45. ΠΡΡΠ΅Ρ B ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ 20 ΠΌΠ HEPES, 0,5 ΠΌΠ EDTA, 5 ΠΌΠ MgCl 2 , 0,1 ΠΌΠ DTT, 10 ΠΌΠΊΠ GDP, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π°, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ½Π° ΠΈ 50 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1. ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅ΡΠ°Π½ΡΡΠ»ΡΡΠΎΠ½ΠΈΠ»ΡΡΠΎΡΠΈΠ΄ (PMSF) ΠΏΡΠΈ pH 7,4. ΠΡΡΠ΅Ρ C ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ 20 ΠΌΠ HEPES, 0,5% ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠ΄ΠΎΠ΄Π΅ΡΠΈΠ»ΠΎΠ²ΡΠΉ ΡΡΠΈΡ Π΄Π΅ΠΊΠ°ΡΡΠΈΠ»Π΅Π½Π³Π»ΠΈΠΊΠΎΠ»Ρ (C 12 E 10 ), 100 ΠΌΠ NaCl, 1 ΠΌΠ MgCl 2 10 ΠΌΠΊΠ GDP, 5.5 ΠΌΠ Ξ²-ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ°ΠΏΡΠΎΡΡΠ°Π½ΠΎΠ», 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 PMSF ΠΏΡΠΈ pH 8,0. ΠΡΡΠ΅Ρ D ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Π·Π°Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ ΡΠΎΡΡΠ°ΡΠΎΠΌ ΡΠΈΠ·ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡ (PBS pH 7,4; Gibco TM ), 800 ΠΌΠΊΠ Π°ΡΠΊΠΎΡΠ±ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΡ ΠΈ 0,2% Π΄Π΅ΠΊΡΡΡΠΎΠ·Ρ (ΠΌΠ°Ρ. / ΠΠ±.).
ΠΠΎΠ»Π΅ΠΊΡΠ»ΡΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
ΠΠ¦Π -ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΡ Π΄Π»Ρ Ξ±1 A -AR (ΠΈΠ·ΠΎΡΠΎΡΠΌΠ° 3), Ξ²2-AR, A 1 R, Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΡΠΉ Π²Π°ΡΠΈΠ°Π½Ρ ΡΠΏΠ»Π°ΠΉΡΠΈΠ½Π³Π° GΞ±s, GΞ±i 2 ΠΈ GΞ±q Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΠΈΠ· ΠΊΠΠΠ ΡΠ΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°. ΠΠ»Ρ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ HEK293 Ρ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ Π²ΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ GPCR ΠΈ GΞ± ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π²Π΅ΠΊΡΠΎΡ PCDNA5 / FRT. ΠΠ»Ρ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠΎΠ² GPCR Π±ΡΠ»Π° ΡΠ°Π·ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π° ΠΌΠΎΠ΄ΡΠ»ΡΠ½Π°Ρ ΡΡ Π΅ΠΌΠ°.ΠΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° GPCR-G ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π» ΠΎΡ N- Π΄ΠΎ Π‘-ΠΊΠΎΠ½ΡΠ°: ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡΠ°Π·ΠΌΠ΅ΡΠ½ΡΠΉ GPCR, mCitrine (Π°ΠΊΡΠ΅ΠΏΡΠΎΡ FRET), Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ ER / K 10, 20 ΠΈΠ»ΠΈ 30 Π½ΠΌ, mCerulean (Π΄ΠΎΠ½ΠΎΡ FRET) ΠΈ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΡ GΞ±. ΠΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ (Gly-Ser-Gly) 4 Π²ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ Π²ΡΠ΅ΠΌΠΈ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΊΠ°ΠΊ ΡΠ°ΡΡΡ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠ°ΠΉΠΌΠ΅ΡΠ°, ΡΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΡ ΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ΅ Π²ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π°ΠΌΠΈ. ΠΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠΈ GPCR (-) Π½Π΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π»ΠΈ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΡ GΞ± ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ mCerulean, Π° Π²ΠΌΠ΅ΡΡΠΎ ΡΡΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠΌΠ΅Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΡΡΡΠΈΠ΅ΡΡ (Gly-Ser-Gly) 4 ΠΎΡΡΠ°ΡΠΊΠΎΠ². ΠΡΠ΅ Ξ²2-AR-ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΡ ΡΠ°ΠΊΠΆΠ΅ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°Π»ΠΈ Π»ΠΈΠ±ΠΎ N-ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π²ΡΡ HA-ΠΌΠ΅ΡΠΊΡ, Π»ΠΈΠ±ΠΎ His-ΠΌΠ΅ΡΠΊΡ.ΠΡΠ΅ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄ΡΠ²Π΅ΡΠΆΠ΄Π΅Π½Ρ ΡΠ΅ΠΊΠ²Π΅Π½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ. ΠΠ΅ΠΏΡΠΈΠ΄Π½ΡΠ΅ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ Π΄Π»Ρ Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅ΡΠΎΠ² ER / K 10, 20 ΠΈ 30 Π½Π Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½Ρ ΡΠ°Π½Π΅Π΅ 14 . ΠΠΊΡΠ°ΡΡΠ΅, Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ ER / K 10 Π½ΠΌ ΠΏΡΠΎΠΈΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΡ ΠΈΠ· Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Myosin VI Sus scrofa ΡΠΎ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠ΅ΠΉ Π°ΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΊΠΈΡΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΡΡ: EEEEKKKQQEEEAERLRRIQEEMEKERKRREEDEQRRRKEEEERRMKLEMEAKRKQEEEERKKREDDEKRKKK. 30 Π½ΠΌ Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ ΡΠ²Π»ΡΠ΅ΡΡΡ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½ΡΠΌ ΠΎΡ Kelch-ΠΌΠΎΡΠΈΠ² Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΠΉΡΡΠ²Π° ( ΡΡΠΈΡ ΠΎΠΌΠΎΠ½Π°Π΄ ): EEEEKKKEEEEKKQKEEQERLAKEEAERKQKEEQERLAKEEAERKQKEEEERKQKEEEERKQKEEEERKLKEEQERKAAEEKKAKEEAERKAKEEQERKAEEERKKKEEEERLERERKEREEQEKKAKEEAERIAKLEAEKKAEEERKAKEEEERKAKEEEERKKKEEQERLAKEKEEAERKAAEEKKAKEEQERKEKEEAERK.ΠΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ ER / K 20 Π½ΠΌ ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠΈΡ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΡΠ΅ 130 ΠΎΡΡΠ°ΡΠΊΠΎΠ² Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅ΡΠ° ER / K 30 Π½ΠΌ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π² ΡΡΠΎΠΌ ΠΈΡΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΈ.
ΠΠΎΠ΄Π³ΠΎΡΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡΠ°ΡΡΠΈΡ ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ°
ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HEK293T-Flp-In (HEK293T, Invitrogen) ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΡΠ΅Π΄Π΅ DMEM Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 10% FBS (ΠΎΠ±. / ΠΠ±.), 4,5 Π³ Π». -1 D-Π³Π»ΡΠΊΠΎΠ·Ρ, 1% Π³Π»ΡΡΠ°ΠΌΠ°ΠΊΡΠ°. , 20 ΠΌΠ HEPES, pH 7,5 ΠΏΡΠΈ 37 Β° C Π² ΡΠ²Π»Π°ΠΆΠ½Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Π°ΡΠΌΠΎΡΡΠ΅ΡΠ΅ ΠΏΡΠΈ 5% CO 2 . ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HEK293T ΠΏΠΎΠΌΠ΅ΡΠ°Π»ΠΈ Π² 6-Π»ΡΠ½ΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ΅ΡΡ, ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΊΡΠ»ΡΡΡΡΠΎΠΉ ΡΠΊΠ°Π½ΠΈ, ΠΏΡΠΈ ~ 30% ΠΊΠΎΠ½ΡΠ»ΡΡΠ½ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ. Π§Π΅ΡΠ΅Π· 16β20 Ρ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΠΠ X-tremeGENE HP.Π£ΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ, Π²ΠΊΠ»ΡΡΠ°Ρ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΠΠΠ (1,4β4 ΠΌΠΊΠ³ ΠΠΠ + 4,2β6 ΠΌΠΊΠ» ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠ°) ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΆΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ (ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΡΠ΅ Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠΈ: 18β24 Ρ; GΞ±-Π΄Π°ΡΡΠΈΠΊΠΈ: 22β32 ΡΠ°ΡΠ°), Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠΏΡΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΡΡΠΎΡΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΊΠ²ΠΈΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΡΡ ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ Π²ΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° Π² ΡΠ°Π·Π½ΡΡ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ . ΠΠ»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° GPCR-G 100 Π½Π³, 300 Π½Π³ ΠΈΠ»ΠΈ 1 ΠΌΠΊΠ³ ΡΠ΅ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ GΞ±x Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ 2 ΠΈΠ»ΠΈ 4 ΠΌΠΊΠ³ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠΎΠ². ΠΠ»Ρ Π²ΡΠ΅Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ°, Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΡ ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° Π½Π° ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΡ (Π.) ΠΎΡΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΎΠ³Π»Π°ΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΡΡΠΈ. ΠΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡ ΠΏΡΠΈ ΡΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΠΈ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ 60β80%, ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΠΏΡΠΈ 20- ΠΈ 40-ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΌ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Π½Π° ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠ΅ Π΄Π»Ρ ΠΊΡΠ»ΡΡΠΈΠ²ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ Nikon Ρ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠ΅ΠΉ Π΄Π΅ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ. ΠΡΠΎΠΌΠ΅ ΡΠΎΠ³ΠΎ, Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅ΠΌΡ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ° 60β90% ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠ΅ΠΈΠΌΡΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡ, Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΉ Π½Π° ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠ°ΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Π΅, Ρ ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠΉ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ Π²ΠΎ Π²Π½ΡΡΡΠΈΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΡΡ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°ΡΡΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Ρ . ΠΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΡ ΠΏΡΠΈ ΡΠΊΠ²ΠΈΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΠΎΠΌ Π²ΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° ΠΈ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠ΅ΠΌ O.D. ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π·ΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡ ΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΠ°Π³ΠΈ.Π‘Π½Π°ΡΠ°Π»Π° ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΎΡΡΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΡΠΌ ΠΏΠΈΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π² ΠΈΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΡΡ ΡΡΠ΅Π΄Ρ. ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (300 Π³, 3 ΠΌΠΈΠ½) ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΡΠ°Π· ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ Π. ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠ΅ΠΌ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌΠ΅ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° Π Π΄ΠΎ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΠ 0,3. ( 600 Π½ΠΌ , ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠΎΡΠΎΡΠΎΠΌΠ΅ΡΡ BioMate 3 S, Thermo Scientific, Π΄Π»ΠΈΠ½Π° ΠΏΡΡΠΈ 3 ΠΌΠΌ, ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠ°Ρ ΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΡΠ½Π½Π°Ρ ΠΊΡΠ²Π΅ΡΠ°) Π΄Π»Ρ Π²ΡΠ΅Ρ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ. ΠΠ°ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ, ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ mCitrine. Π€Π»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ ΠΌΠ¦ΠΈΡΡΠΈΠ½Π° Π΄Π΅ΡΠΆΠ°Π»Π°ΡΡ Π² ΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π°Ρ 1.6β2,4 Γ 10 6 ΠΎΡΡΡΠ΅ΡΠΎΠ² Π² ΡΠ΅ΠΊΡΠ½Π΄Ρ (c.p.s) Π΄Π»Ρ Π²Π½Π΅ΡΠ½Π΅Π³ΠΎ Π΄ΠΈΠ°ΠΌΠ΅ΡΡΠ° ΡΡΠ΅ΠΉΠΊΠΈ. 0,3. ΠΠ»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ° ΡΠ΅Π»ΠΎΡΡΠ½ΠΎΡΡΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° ΠΎΡΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π»Π°ΡΡ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ mCitrine (Π²ΠΎΠ·Π±ΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ 490, ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 8 Π½ΠΌ; Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ 500β600, ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 4 Π½ΠΌ; ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΡΠΌ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΈ 525 Π½ΠΌ) ΠΊ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ mCerulean (Π²ΠΎΠ·Π±ΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ 430, ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 8 Π½ΠΌ; Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ 450-600 ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ). 4 Π½ΠΌ; ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΡΠΌ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ 475 Π½ΠΌ). Π ΡΠ°ΠΌΠΊΠ°Ρ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΡΡΠΊΡΠΈΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° mCitrine ΠΈ mCerulean ΠΌΠ°ΡΠΊΠΈΡΡΡΡ C-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ GPCR ΠΈ N-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ ΡΡΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΡ GΞ± ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ. ΠΡΠ΅ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡ ΠΏΡΠΈ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ mCitrine ΠΈ mCerulean, ΡΠ°Π²Π½ΠΎΠΌ 1.7β2.1.
ΠΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΈΡ ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ
ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HEK293T Π²ΡΡΠ΅Π²Π°Π»ΠΈ (~ 15β20% ΠΊΠΎΠ½ΡΠ»ΡΡΠ½ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ) Π½Π° ΡΠ°ΡΠΊΠΈ ΡΠΎ ΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΡΠ½Π½ΡΠΌ Π΄Π½ΠΎΠΌ 35 ΠΌΠΌ (MatTek Corp), ΠΏΠΎΠΊΡΡΡΡΠ΅ 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» ΡΠΈΠ±ΡΠΎΠ½Π΅ΠΊΡΠΈΠ½Π° -1 . Π§Π΅ΡΠ΅Π· 14β16 ΡΠ°ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΠΏΠΎΡΠ΅Π²Π° (30β40% ΠΊΠΎΠ½ΡΠ»ΡΡΠ½ΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ) ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠ΅Π°Π³Π΅Π½ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΠΠ Mirus-LT ΠΈΠ»ΠΈ XtremeGENE HP. Π§Π΅ΡΠ΅Π· 16β22 Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΡΠΈΠΆΠ΄Ρ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ A (37 Β° C) Π΄Π»Ρ ΡΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΠΈΠ·Π±ΡΡΠΊΠ° ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ· ΡΡΠ΅Π΄Ρ. ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 30 ΠΌΠΈΠ½ Π² ΡΡΠ΅Π΄Π΅ Ρ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ Π.ΠΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΈ 60-ΠΊΡΠ°ΡΠ½ΠΎΠΌ ΡΠ²Π΅Π»ΠΈΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠ° Nikon TiE, ΠΎΡΠ½Π°ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΡΡΠ½ΠΎΠΉ Π΄ΡΠ³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΠΉ, ΠΌΠ°ΡΠ»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ Plan-Apo Ρ ΡΠΈΡΠ»ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π°ΠΏΠ΅ΡΡΡΡΠΎΠΉ 60x ΠΈ 100×1,4 ΠΈ ΠΊΠ°ΠΌΠ΅ΡΠΎΠΉ Evolve 512×512 EM-Charge-Coupled-Device (Photometrics). ΠΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Z-ΡΡΠ΅ΠΊΠ° Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ Ρ ΡΠ°Π³ΠΎΠΌ 1 ΠΌΠΊΠΌ, ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Π½ΡΠΉ ΡΡΠ΅ΠΊ ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ Π±ΡΠ» Π΄Π΅ΠΊΠΎΠ½Π²ΠΎΠ»ΡΡΠΈΠΎΠ½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΏΡΠΎΠ³ΡΠ°ΠΌΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ AutoQuantX. ΠΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ Π½Π° ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡΡ Π±ΡΠ»Π° ΠΏΡΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π° Π² ImageJ (NIH) Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΈΠ½ΡΡΡΡΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΏΠΎΡΠΎΠ³Π° ΠΈ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π΄Π»Ρ Π²ΡΠ±ΠΎΡΠ° ΠΈ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ ΠΏΠΎ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡ Ρ Π²Π½ΡΡΡΠ΅Π½Π½Π΅ΠΉ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°ΡΠΈΠ΅ΠΉ.(ΠΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠΈΡ. 1).
ΠΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ
ΠΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠΎΠΌΠ΅ΡΡ FluoroMax-4 (Horiba Scientific), ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΡ FRET Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΠΎΠ·Π±ΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΏΡΠΈ 430 Π½ΠΌ (ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 8 Π½ΠΌ) Π² ΠΎΠΏΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠΉ ΡΡΠ΅ΠΊΠ»ΡΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΊΡΠ²Π΅ΡΠ΅ (3β3.30-SOG-3, Starna Cells Inc.) . ΠΠΌΠΈΡΡΠΈΡ ΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»Π°ΡΡ Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ 450β600 Π½ΠΌ (ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 4 Π½ΠΌ). ΠΠ»Ρ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ ΡΠΎΠ»ΡΠΊΠΎ mCitrine ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π²ΡΡ ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π° Π΄Π»ΠΈΠ½Π΅ Π²ΠΎΠ»Π½Ρ 490 Π½ΠΌ (ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 8 Π½ΠΌ), Π° ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΡ ΡΠ΅Π³ΠΈΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»Π°ΡΡ Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ 500-600 Π½ΠΌ (ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 4 Π½ΠΌ), ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΡΠΌ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΈ Π±ΡΠ» ΡΡΡΠ°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ Π½Π° 525 Π½ΠΌ.
Π Π°ΡΡΠ΅Ρ FRET ΠΆΠΈΠ²ΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ
ΠΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΡ FRET ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Π½Π° ΡΠΎΠ²ΠΏΠ°Π΄Π°ΡΡΠΈΡ O.D. Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ A. ΠΠ΅ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΈ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ A ΠΏΡΠΈ 0,3 O.D. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΡΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ ΡΠ°ΡΡΠ΅ΡΠ½ΠΈΠ΅, ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡ ΠΈΠ·Π»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ FRET Π½Π΅ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π·ΠΈΠΈ ΠΏΡΠΈ ΡΠΊΠ²ΠΈΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΠΎΠΌ O.D. Π²ΡΡΠΈΡΠ°Π»ΠΈ ΠΈΠ· FRET-ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠ° ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π·ΠΈΠΈ. Π‘ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠ΅ ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΡ FRET Π±ΡΠ»ΠΈ Π½ΠΎΡΠΌΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Ρ Π½Π° ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΡ mCerulean (475 Π½ΠΌ). ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ FRET ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΈ mCitrine (525 Π½ΠΌ) Π½Π° ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΡ mCerulean (475 Π½ΠΌ).
ΞFRET ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ
ΠΠΈΠ²ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΞFRET ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎ ΡΠ°Π½Π΅Π΅ 21 .ΠΠΊΡΠ°ΡΡΠ΅, ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°Π»ΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ½ΠΎ ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ Π½Π°Π³ΡΠ΅ΡΠΎΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ Π. ΠΠ»ΠΈΠΊΠ²ΠΎΡΡ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΏΠΎ 90 ΠΌΠΊΠ» Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡΠΎΠ±ΠΈΡΠΊΠΈ ΠΠΏΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΎΡΡΠ°, ΠΏΠΎΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ Π½Π° Π²ΠΎΠ΄ΡΠ½ΡΡ Π±Π°Π½Ρ ΠΏΡΠΈ 37 Β° C. ΠΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±Π°ΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ 10 ΠΌΠΊΠ» ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 1, 5 ΠΈΠ»ΠΈ 10 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ 37 Β° C. ΠΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΈ ΡΠΈΡΡΡΠ΅ ΠΊΡΠ²Π΅ΡΡ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ Π΄Π»Ρ ΡΠ±ΠΎΡΠ° ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΠΎΠ² FRET Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΡ ΠΈ Π½Π΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠΎΠ² Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠ΅Π΄ΠΎΡΠ²ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΊΡΠ΅ΡΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π°Π³ΡΡΠ·Π½Π΅Π½ΠΈΡ. ΠΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ FRET (ΞFRET) ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ FRET Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄ — FRET Π±ΡΡΠ΅Ρ .
ΠΠ±ΡΠ°ΡΠΈΠΌΠΎΡΡΡ Π°Π³ΠΎΠ½ΠΈΡΡ-ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΞFRET
ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°Π»ΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎ Π² ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΡΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ.Π‘Π½Π°ΡΠ°Π»Π° ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΡΠ»ΠΈ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ FRET Π±Π΅Π· ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠΈ. ΠΠ΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (600 Π³, 1 ΠΌΠΈΠ½), ΡΡΠΈΠΆΠ΄Ρ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΈ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² 400 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° Π. Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΡΡΡ FRET ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ ΡΠ΅ΡΠΈΠΉΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ Π°Π»ΠΈΠΊΠ²ΠΎΡ ΠΏΠΎ 90 ΠΌΠΊΠ». ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΡ Π»ΡΠ½ΠΊΡ ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅Ρ A Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 ΠΌΠΊΠ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π°. ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (600 Π³, 1 ΠΌΠΈΠ½) ΠΈ ΡΡΠΈΠΆΠ΄Ρ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ 400 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° A Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 ΠΌΠΊΠ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π°. ΠΡΠ°ΠΏΡ ΠΎΡΠΆΠΈΠΌΠ° ΠΈ ΡΡΠΈΡΠΊΠΈ Π±ΡΠ»ΠΈ Π·Π°Π²Π΅ΡΡΠ΅Π½Ρ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 5 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ. ΞFRET ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΡΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΡ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET ΠΈΠ· ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π² ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ , ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΡ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ.ΠΠ»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°ΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΈΠ½Π΄ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ° ΞFRET ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ A Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 ΠΌΠΊΠ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π° Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ Π½Π° Π²ΠΎΠ΄ΡΠ½ΠΎΠΉ Π±Π°Π½Π΅ ΠΏΡΠΈ 37 Β° C. ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (600 Π³, 1 ΠΌΠΈΠ½), ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΡΠΈ ΡΠ°Π·Π° ΠΈ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² 400 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° A. Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΡΡΡ FRET ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ ΡΠ΅ΡΠΈΠΉΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ Π°Π»ΠΈΠΊΠ²ΠΎΡ ΠΏΠΎ 90 ΠΌΠΊΠ». ΞFRET ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΡΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΡ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET ΠΈΠ· ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΡΡ Π² ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ Π²ΡΠΌΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π°. mCitrine: Π.Π. ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅ΡΠΆΠΈΠ²Π°Π»ΠΎΡΡ ΠΏΠΎΡΡΠΎΡΠ½Π½ΡΠΌ Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅Ρ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΡ , ΡΡΠΎΠ±Ρ Π³Π°ΡΠ°Π½ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°ΡΡ, ΡΡΠΎ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ΅ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ FRET ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΎΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΏΠΎΡΡΠΎΡΠ½Π½ΡΡ ΡΡΠΎΠ²Π½ΡΡ ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΈ ΡΠΈΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ.
ΠΠΎΠ΄Π³ΠΎΡΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ
24 ΠΈΠ»ΠΈ 48 Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ (XtremeGene HP) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HEK293T, ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΡ, ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ ΠΈ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΡΠ°Π· Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΡΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ PBS, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΠΌ 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° ΠΈ 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ½Π°. ΠΡΠΈ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΡΡΠ°ΠΏΡ Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠ»ΠΈ Π½Π° Π»ΡΠ΄Ρ ΠΈ / ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C. ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ Π΄Π»Ρ Π³ΠΈΠΏΠΎΡΠΎΠ½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠ° (20 ΠΌΠ HEPES, 0,5 ΠΌΠ EDTA, 0,1 ΠΌΠ DTT, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π°, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ½Π° ΠΈ 50 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅ΡΠ°Π½ΡΡΠ»ΡΡΠΎΠ½ΠΈΠ»ΡΡΠΎΡΠΈΠ΄Π°, pH 7 .4) Π½Π° 5 ΠΌΠΈΠ½. ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠΏΡΠΈΡΠ΅ΠΌ Π½Π° 1 ΠΌΠ» Π² ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΡ Π»Π°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΠΎΠΌ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΡΠ΅ (Isobiotec) Ρ Π·Π°Π·ΠΎΡΠΎΠΌ 8 ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠ½. ΠΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΈ 500 g Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 5 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C. Π‘ΡΠΏΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠ°Π½ΡΡ, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΠ΅ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΡΠ½ΡΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ, ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΈ 45000 ΠΎΠ± / ΠΌΠΈΠ½ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 45 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C. ΠΡΠ°Π΄ΠΊΠΈ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ 3 ΡΠ°Π·Π° ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΡ Π»Π°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΡΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π·ΠΈΠΈ, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΠΌ 20 ΠΌΠ HEPES, 0,5 ΠΌΠ EDTA, 5 ΠΌΠ MgCl 2 , 0,1 ΠΌΠ DTT, 3 ΠΌΠΊΠ GDP, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ½ΠΈΠ½, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1. Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ½ ΠΈ 50 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅ΡΠ°Π½ΡΡΠ»ΡΡΠΎΠ½ΠΈΠ»ΡΡΠΎΡΠΈΠ΄ ΠΏΡΠΈ pH 7.4. ΠΠ»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ 3 ΡΠ°Π·Π° Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΡΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 ΠΌΠ NaCl. ΠΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² 1 ΠΌΠ» ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΡ Π»Π°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ°, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΡΡ Π²ΡΠ°ΡΠ°ΡΡΠΈΠΉΡΡ ΠΏΠ΅ΡΡΠΈΠΊ (Fisherbrand, 30 Ρ). ΠΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ ΡΠ½ΠΎΠ²Π° Π²ΡΠ°ΡΠ°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΈ 45000 ΠΎΠ± / ΠΌΠΈΠ½ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 45 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C. ΠΡΠ°Π΄ΠΊΠΈ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΡ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ°Ρ Π΄Π»Ρ ΡΠ΅ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΠ·Π°ΡΠΎΡΠ° ΠΠ°ΡΠ½ΡΠ°. ΠΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° (ΠΌΠ³ / ΠΌΠ» -1 ) ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° DC (Bio-Rad). ΠΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ ΠΌΠ³Π½ΠΎΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ Π·Π°ΠΌΠΎΡΠ°ΠΆΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΠΌ Π°Π·ΠΎΡΠ΅ ΠΈ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΈ -80 Β° C.
ΠΡΠΈΡΡΠΊΠ° ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ° ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ HEK293
ΠΠ»Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² GΞ² ΠΎΡΠΈΡΡΠΊΠ° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° His tag-Ξ²2-AR-G ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΡΡ (-) ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠΎΠ² ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ HEK293T ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π»Π° ΡΠ°Π½Π΅Π΅ ΠΎΠΏΡΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΌΡ ΠΏΡΠΎΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ 16 . ΠΠ°ΠΌΠΎΡΠΎΠΆΠ΅Π½Π½ΡΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ Π±ΡΡΡΡΠΎ ΠΎΡΡΠ°ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΈ ΠΊΡΠ°ΡΠΊΠΎΠ²ΡΠ΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ½ΠΎ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π²ΡΠ°ΡΠ°ΡΡΠΈΠΌΡΡ ΠΏΠ΅ΡΡΠΈΠΊΠΎΠΌ. 5% Ρ ΠΎΠ»Π°ΡΠ½ΡΠΉ Π±ΡΡΠ΅Ρ (5% Ρ ΠΎΠ»Π°Ρ Π½Π°ΡΡΠΈΡ Π² 50 ΠΌΠ HEPES, 3 ΠΌΠ MgCl 2 , 50 ΠΌΠ NaCl Ρ 1 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» Π°ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° -1 , 1 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡΠΈΠ½, 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 ΡΠ΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅ΡΠ°Π½ΡΡΠ»ΡΡΠΎΠ½ΠΈΠ»ΡΡΠΎΡΠΈΠ΄ ΠΈ 5.ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ 5 ΠΌΠ Ξ²-ΠΌΠ΅ΡΠΊΠ°ΠΏΡΠΎΡΡΠ°Π½ΠΎΠ», pH 8,0) Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠ½Π΅ΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΠΈ 1% Ρ ΠΎΠ»Π°ΡΠ°. ΠΡΡ ΡΠΌΠ΅ΡΡ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π½Π° Π»ΡΠ΄Ρ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 45 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΈ ΡΠ°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ ΡΠ»ΡΡΡΠ°ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΡΠΈ ~ 105000 g Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 40 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C. Π‘ΡΠΏΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠ°Π½Ρ ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ ΠΈ ΡΠ°Π·Π±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎ ΠΊΠ°ΠΏΠ»ΡΠΌ ΡΠ΅ΡΡΡΡΠΌΡ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌΠ°ΠΌΠΈ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° Π‘ Π΄ΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌΠ° ΡΡΠΏΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠ°Π½ΡΠ° ΠΈ ΠΎΡΡΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΈΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΏΠ΅ΡΠ΅ΠΌΠ΅ΡΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ. Π Π°Π·Π±Π°Π²Π»Π΅Π½Π½ΡΠΉ ΡΡΠΏΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠ°Π½Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΊ ΡΠΌΠΎΠ»Π΅ Π½ΠΈΠΊΠ΅Π»Ρ-NTA (Qiagen) ΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ 30 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C Ρ Π²ΡΠ°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ. Π‘ΠΌΠΎΠ»Ρ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ 3 ΡΠ°Π·Π° 500 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° C + 5 ΠΌΠ ΠΈΠΌΠΈΠ΄Π°Π·ΠΎΠ»Π°.ΠΠΎΡΠ»Π΅Π΄Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²ΠΊΡ ΡΠ΄Π°Π»ΡΠ»ΠΈ, ΡΠΌΠΎΠ»Ρ Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΡ ΠΈ ΡΠ»ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 3-5 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ 150 ΠΌΠΊΠ» ΡΠ»ΡΠΈΡΡΡΡΠ΅Π³ΠΎ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° (Π±ΡΡΠ΅Ρ C + 200 ΠΌΠ ΠΈΠΌΠΈΠ΄Π°Π·ΠΎΠ»). ΠΠ»ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΡΠΌΠΎΠ»Ρ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ, ΡΡΠΏΠ΅ΡΠ½Π°ΡΠ°Π½Ρ ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ ΠΈ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΡΠ»ΠΈ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ mCerulean ΠΈ mCitrine Π½Π° ΡΠ»ΡΠΎΡΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠ΅ (ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎ Π²ΡΡΠ΅). ΠΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ Ρ ΡΠ°Π½ΠΈΠ»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ Π΄Π»Ρ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠΎΠ² SDS laemmli ΠΏΡΠΈ -80 Β° C.
ΠΠ΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡ
ΠΠ»Ρ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Π±Π»ΠΎΡΡΠΈΠ½Π³Π° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΠΠ 20 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½, ΡΠΎΠ΄Π΅ΡΠΆΠ°ΡΠΈΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡ Ξ²2-AR-Gs, ΠΊΠΈΠΏΡΡΠΈΠ»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ B, Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠΎΠΌ Π΄Π»Ρ Π΄Π΅Π½Π°ΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Π³Π»ΠΈΠΊΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΠΈΠ½Π° (NEB), ΠΏΡΠΈ 95 Β° C Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 5 ΠΌΠΈΠ½.ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ ΠΊΠΈΠΏΡΡΠ΅Π½ΡΠ΅ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±Π°ΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ 500 Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΠ°ΠΌΠΈ PNGase F (NEB) Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΡΡΠ΅Ρ ΡΠ°ΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΈ 37 Β° C. ΠΠ»Ρ Π°Π½ΡΠΈ-GΞ² ΡΠΊΠ²ΠΈΠ²Π°Π»Π΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡΠ΅ΡΡΠ²ΠΎ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠΎΠ², ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΏΠΎ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ mCitrine, Π·Π°Π³ΡΡΠΆΠ°Π»ΠΈ Π² Π³Π΅Π»ΠΈ SDS-PAGE (10% ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ°ΠΊΡΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈΠ΄). ΠΠ΅Π»ΠΈ Π²ΠΈΠ·ΡΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠ»ΡΠΎΡΠ΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΠΈ mCitrine (Π²ΠΎΠ·Π±ΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ 488 Π½ΠΌ, ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΡ 520 Π½ΠΌ, ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ½Π°Ρ ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡΡ 40 Π½ΠΌ) Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Typhoon Gel Imager (GE Healthcare). ΠΠ΅Π»ΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠΈΠ»ΠΈ Π½Π° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ ΠΈΠ· ΠΠΠΠ€ Π½Π° ΡΡΠΈ ΡΠ°ΡΠ° ΠΏΡΠΈ 300 ΠΌΠ. ΠΠ½ΡΠΈ-HA ΠΈ Π°Π½ΡΠΈ-GΞ² Π±Π»ΠΎΠΊΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ 2% -Π½ΡΠΌ ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎΠΌ / ΡΡΠΈΡ-Π±ΡΡΠ΅ΡΠ½ΡΠΌ ΡΠΈΠ·ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠΎΠΌ Ρ 1% ΡΠ²ΠΈΠ½ΠΎΠΌ (TBST) Π»ΠΈΠ±ΠΎ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΡΠ° ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅, Π»ΠΈΠ±ΠΎ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΎΡΠΈ ΠΏΡΠΈ 4 Β° C.ΠΠ°ΡΠ΅ΠΌ Π±Π»ΠΎΡΡ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΠ΅ΡΠ²ΠΈΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π°ΠΌΠΈ Π² ΡΠ°Π·Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ 1: 1000 Π² 5% ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠ΅ / TBST. ΠΠ»Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² GΞ² Π±Π»ΠΎΡΡ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ TBST ΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌΠΈ Ρ ΠΏΠ΅ΡΠΎΠΊΡΠΈΠ΄Π°Π·ΠΎΠΉ Ρ ΡΠ΅Π½Π° (HRP) 1: 5 000 ΠΈΠ»ΠΈ 1: 10 000 Π²ΡΠΎΡΠΈΡΠ½ΡΠΌΠΈ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π°ΠΌΠΈ ΠΊΠΎΠ·ΡΠ΅Π³ΠΎ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΠΊΡΠΎΠ»ΠΈΡΡΠ΅Π³ΠΎ IgG (0031460, Fisher Scientific) Π² 5% ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠ΅ / TBST ΠΈΠ»ΠΈ 5 % BSA / TBST Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΡΠ° ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅. ΠΠ½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ½ΠΎ Π΄Π»Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΠΠ, Π±Π»ΠΎΡΡ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΌ Π²ΡΠΎΡΠΈΡΠ½ΡΠΌ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»ΠΎΠΌ ΠΎΠ²ΡΡ ΠΏΡΠΎΡΠΈΠ² ΠΌΡΡΠΈΠ½ΠΎΠΉ HRP (GE Healthcare, NA931) Π² ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠΈ 1: 10 000.ΠΡΠ΅ Π±Π»ΠΎΡΡ ΠΏΡΠΎΡΠ²Π»ΡΠ»ΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π²Π΅ΡΡΠ΅ΡΠ½-Ρ Π΅ΠΌΠΈΠ»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ HRP-ΡΡΠ±ΡΡΡΠ°ΡΠ° Immobilon (Millipore). ΠΠ»ΠΎΡΡ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ°Π»ΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ ChemiDoc-It Imaging (UVP). ΠΠ·ΠΎΠ±ΡΠ°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π»Π΅ΠΉ ΠΈ Π±Π»ΠΎΡΠΎΠ² Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ImageJ (NIH).
ΠΠ½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°
ΠΠ½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° ΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠ°Π½Π΅Π΅ ΠΎΠΏΡΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΌΡ ΠΏΡΠΎΡΠΎΠΊΠΎΠ»Ρ 39 . ΠΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Bmax ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΠΈ 2,5, 5 ΠΈ 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ Ρ 5 Π½Π [ 3 H] -Π΄ΠΈΠ³ΠΈΠ΄ΡΠΎΠ°Π»ΡΠΏΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ»Π° ([ 3 H] -DHA; PerkinElmer) Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 90 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅ Π² ΡΡΠΈΡ-Π±ΡΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠΌ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠ΅. Π€ΠΈΠ·ΠΈΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡ (TBS) pH 7.4. ΠΠ±ΡΠ°Π·ΡΡ ΠΏΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΡΠΈΠ»ΠΈ Π½Π° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½Ρ GF / C, ΠΏΡΠ΅Π΄Π²Π°ΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠ°Π½Π½ΡΠ΅ 0,3% ΡΠ°ΡΡΠ²ΠΎΡΠΎΠΌ PEI Π² TBS, ΡΡΠ°ΡΠ΅Π»ΡΠ½ΠΎ ΠΏΡΠΎΠΌΡΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½ΡΠΌ TBS ΠΈ ΡΡΡΠΈΠ»ΠΈ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΎΡΠΈ ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅. ΠΠΎΡΠ»Π΅ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΈΠ½ΡΠΈΠ»Π»ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΉ ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΡΡΠΈ (Microscint0, PerkinElmer) ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΡΠ»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ 96-Π»ΡΠ½ΠΎΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠΈΠ½ΡΠΈΠ»Π»ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ΅ΡΡΠΈΠΊΠ° (TopCount, PerkinElmer. ΠΠ΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠΈ ΠΏΡΠΎΠΏΡΠ°Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ»ΠΎΠΌ 10 ΠΌΠΊΠ, ΠΈ ΠΎΠ½ΠΎ ΡΠΎΡΡΠ°Π²ΠΈΠ»ΠΎ <1% ΠΎΡ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π³ΠΎ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ. ΠΠΎΠ½ΡΡΠ°Π½ΡΠ° Π΄ΠΈΡΡΠΎΡΠΈΠ°ΡΠΈΠΈ () K Π΄ ) ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ [ 3 H] -DHA ΠΎΠΏΡΠ΅Π΄Π΅Π»ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΠΈ 7-10 ΠΏΠ (7-10 ΡΠΌΠΎΠ»Ρ / ΠΌΠ») ΡΠ΅ΡΠ΅ΠΏΡΠΎΡΠ° Ρ Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡΠ°ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΡΠΌΠΈ [ 3 H] -DHA. Π Π ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ [ 3 H] -DHA ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ»ΠΎ ~ 0,2 Π½Π Π΄Π»Ρ Ξ²2-AR-G ΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠΎΠ»ΡΠ½ΡΡ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠΎΠ². ΠΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ΅ ΡΠΎΡΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ( K ΠΈ ) ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±Π°ΡΠΈΠΈ 7 ΠΏΠ ΡΠ΅ΡΠ΅ΠΏΡΠΎΡΠ° Ρ Π²ΠΎΠ·ΡΠ°ΡΡΠ°ΡΡΠΈΠΌΠΈ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΡΠΌΠΈ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π° (ISO) ΠΈΠ»ΠΈ Ρ ΠΎΠ»ΠΎΡΡΠΎΠ³ΠΎ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° Π² ΠΏΡΠΈΡΡΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ 2 Π½Π [ 3 H] -DHA Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 90 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅. Π Π°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡΡ Π² ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ°Ρ Π΄Π»Ρ Π Π ΠΈ K ΠΈ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² Π±ΡΠ»ΠΎ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠΏΠΈΡΠ°Π½ΠΎ Π²ΡΡΠ΅.ΠΡΠ»ΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°ΡΡΠΆΠ΅Π½ΠΎ, ΡΡΠΎ Π½Π΅ΡΠΏΠ΅ΡΠΈΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΎΠ΅ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ Π²ΠΎ Π²ΡΠ΅Ρ ΡΠ»ΡΡΠ°ΡΡ ΡΠΎΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ <1%. ΠΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΡΡ, ΠΏΠΎ ΠΊΡΠ°ΠΉΠ½Π΅ΠΉ ΠΌΠ΅ΡΠ΅, Π΄Π²Π°ΠΆΠ΄Ρ Ρ ΡΠ°Π·Π½ΡΠΌΠΈ ΠΏΡΠ΅ΠΏΠ°ΡΠ°ΡΠ°ΠΌΠΈ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±ΡΠ°Π½, Ρ ΡΡΠ΅ΠΌΡ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΠΌΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠ°ΠΌΠΈ, ΠΏΡΠΈΠ³ΠΎΡΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΡΠΌΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ, Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ°.
ΠΠ½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ ΡΠΠΠ€
28β32 Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ (XtremeGENE HP) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HEK293T, ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΠΉ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡ, ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ ΡΠΠΠ€ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π±ΠΈΠΎΠ»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΡΠΠΠ€ Glo (Promega). ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΎΡΡΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΈΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅Π΄Π΅, ΠΏΠΎΠ΄ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π³Π΅ΠΌΠΎΡΠΈΡΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠ° ΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (300 Π³, 3 ΠΌΠΈΠ½).Π‘ΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΠΉ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° D Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ Π΄Π»Ρ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ 2 Γ 10 6 ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ Π½Π° ΠΌΠ» -1 Π΄Π»Ρ Π±Π°Π·Π°Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΈΠ»ΠΈ 4 Γ 10 6 ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ Π½Π° ΠΌΠ» β1 Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² Π½Π° ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π΅ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°. Π‘ΡΡΠΏΠ΅Π½Π·ΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅ΡΠ°Π»ΠΈ Π² 96-Π»ΡΠ½ΠΎΡΠ½ΡΠ΅ Π½Π΅ΠΏΡΠΎΠ·ΡΠ°ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊΡΡΠ³Π»ΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π½ΡΠ΅ ΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ΅ΡΡ. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡΡ Π±Π°Π·Π°Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΈΡ ΡΠΠΠ€, ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡΡΠ΅ΡΠ΅ D Ρ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 0,25 ΠΌΠ IBMX Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 15 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡΠΈ 37 Β° C. Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅ΡΠΈΡΡ Π²ΡΠ·Π²Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΡ ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ ΡΠΠΠ€, ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΡΠ°Π·Π»ΠΈΡΠ½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΠ΅ΠΉ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π° Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡΡ Emax Π΄Π»Ρ ΠΏΡΠΎΠ΄ΡΠΊΡΠΈΠΈ ΡΠΠΠ€, ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡΠΎ 100 ΠΌΠΊΠ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π° ΠΈ 100 ΠΌΠΊΠ ΡΠΎΡΡΠΊΠΎΠ»ΠΈΠ½Π° Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°ΡΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅ΠΌΠΏΠ΅ΡΠ°ΡΡΡΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ 37 Β° C. ΠΠ»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ΄Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΡ ΡΠΠΠ€ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±Π°ΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ 1 ΠΌΠΊΠ ΡΠΎΡΡΠΊΠΎΠ»ΠΈΠ½ΠΎΠΌ ΠΈ Ρ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄ΠΎΠΌ ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π΅Π· Π½Π΅Π³ΠΎ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 15 ΠΌΠΈΠ½ΡΡ ΠΏΡΠΈ 37 Β° C. ΠΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡΡΠ²ΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΈ ΡΠΎΠ±Π»ΡΠ΄Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΎΡΠΎΠΊΠΎΠ» Π² ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΠΈΠΈ Ρ ΡΠ΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄Π°ΡΠΈΡΠΌΠΈ ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ (Promega). ΠΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅ΡΡΠ»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ ΠΌΠΈΠΊΡΠΎΠΏΠ»Π°Π½ΡΠ΅ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΡΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠ°-ΡΠΈΠ΄Π΅ΡΠ° (SpectraMax M5e, Molecular Devices). Π£ΡΠΎΠ²Π½ΠΈ ΡΠΠΠ€ (ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½Π°Ρ Π»ΡΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡΠ΅Π½ΡΠ½Π°Ρ Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡΠ°, RLU) ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΡΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΠ½Π° ΠΈΠ· ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠΉ.ΠΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΈΠΌΠ΅Π» ΡΠ΅ΡΡΡΠ΅ ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΡ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ° Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΈ Π±ΡΠ» Π½Π΅Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ΅Π½ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΡΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π· ( N > 3).
IP
1 Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ28β32 Ρ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΠΈ (XtremeGENE HP) ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ HEK293T, ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΡΡΡΠΈΠ΅ ΡΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΡΠΉ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡ, ΡΠΎΠ±ΠΈΡΠ°Π»ΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ ΡΡΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ IP 1 Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½Π°Π±ΠΎΡΠ° Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° IP-One HTRF (Cisbio). ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΎΡΡΠΎΡΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΈΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ ΡΡΠ΅Π΄Π΅, ΠΏΠΎΠ΄ΡΡΠΈΡΡΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡΡΡ Π³Π΅ΠΌΠΎΡΠΈΡΠΎΠΌΠ΅ΡΡΠ° ΠΈ ΡΠ΅Π½ΡΡΠΈΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (300 Π³, 3 ΠΌΠΈΠ½). Π‘ΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΠΉ ΠΎΠ±ΡΠ΅ΠΌ Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° StimB (CisBio: 10 ΠΌΠ Hepes, 1 ΠΌΠ CaCl 2 , 0.ΠΠΎΠ±Π°Π²Π»ΡΠ»ΠΈ 5 ΠΌΠ MgCl 2 , 4,2 ΠΌΠ KCl, 146 ΠΌΠ NaCl, 5,5 ΠΌΠ Π³Π»ΡΠΊΠΎΠ·Ρ, 50 ΠΌΠ LiCl, pH 7,4) Π΄Π»Ρ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠ»ΠΎΡΠ½ΠΎΡΡΠΈ 3 Γ 10 6 ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ / ΠΌΠ» -1 . ΠΠ»Π΅ΡΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΠΈ 37 Β° C Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ 15 ΠΌΠΈΠ½. ΠΡΠΎΡΠΎΠΊΠΎΠ» ΠΏΡΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡΠ΅Π»Ρ Π±ΡΠ» ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ Π΄Π»Ρ Π΄ΠΎΡΡΠΈΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π²ΡΡΠΎΠΊΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π» / ΡΡΠΌ. 150 ΠΌΠΊΠ» ΡΡΡΠΏΠ΅Π½Π·ΠΈΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡΠ±ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ°ΡΠ° Ρ 30 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° Π΄Π»Ρ Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠ° (Cisbio), 54 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡΡΠ΅ΡΠ° StimB, 6 ΠΌΠΊΠ» IP 1 , ΠΊΠΎΠ½ΡΡΠ³ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ ΠΊΡΠ°ΡΠΈΡΠ΅Π»Π΅ΠΌ d2, ΠΈ 6 ΠΌΠΊΠ» ΠΌΠ΅ΡΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅ΡΠ±ΠΈΠ΅Π²ΡΠΌ ΠΊΡΠΈΠΏΡΠ°ΡΠΎΠΌ ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠΊΠ»ΠΎΠ½Π°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½ΡΠΈΡΠ΅Π»Π° Π°Π½ΡΠΈ-IP 1 .IP 1 FRET-ΡΠΏΠ΅ΠΊΡΡΡ Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΠΎΠ·Π±ΡΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡ ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΈ 340 Π½ΠΌ (ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 15 Π½ΠΌ). ΠΠΎΠ΄ΡΡΠ΅Ρ ΡΠΌΠΈΡΡΠΈΠΈ ΡΠ΅Π³ΠΈΡΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ 600β700 Π½ΠΌ (ΠΏΠΎΠ»ΠΎΡΠ° ΠΏΡΠΎΠΏΡΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ 10 Π½ΠΌ) Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΏΡΠΎΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΈΠ»ΡΡΡΠ° 475 Π½ΠΌ (FSQ GG475, Newport). ΠΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΡΠΉ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π» IP 1 Π±ΡΠ» ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΠ°Π½ ΠΈΠ· ΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ 665 Π½ΠΌ ΠΊ 620 Π½ΠΌ. ΠΠ°Π·Π°Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠΈΠ³Π½Π°Π» IP 1 ΠΊΠΎΡΡΠ΅ΠΊΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ Π²ΡΡΠΈΡΠ°Π½ΠΈΡ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π½Π΅ΡΡΠ°Π½ΡΡΠΈΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΡ IP 1 ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ, ΡΠΊΡΠΏΡΠ΅ΡΡΠΈΡΡΡΡΠΈΡ ΡΡΠ°Π½ΡΡΠ΅ΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡΠΉ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡ. ΠΠ»Ρ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² Ρ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°ΠΌΠΈ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»Π΅Π½Ρ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈΡΡ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠΎΠΎΡΠ½ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡ IP 1 ΠΏΠΎΡΠ»Π΅ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠΈ Π»Π΅ΠΊΠ°ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΡΠΌ ΡΡΠ΅Π΄ΡΡΠ²ΠΎΠΌ.ΠΠ°ΠΆΠ΄ΡΠΉ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ ΠΈΠΌΠ΅Π» ΡΠ΅ΡΡΡΠ΅ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ° Π΄Π»Ρ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡ ΠΈ Π±ΡΠ» Π½Π΅Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ΅Π½ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΡΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π· ( N > 3).
ΠΠ½Π°Π»ΠΈΠ· ΠΊΡΠΈΠ²ΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΡ-ΠΎΡΠ²Π΅Ρ ΠΈ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎ-Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π½ΡΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ
ΠΠ°Π½Π½ΡΠ΅ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² GraphPad Prism 7.0c (Graphpad Software, Inc.) Π΄Π»Ρ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ EC 50 Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² Π½Π°ΠΊΠΎΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΡ ΞFRET ΠΈ ΡΠΠΠ€ ΠΈ IC 50 , Π ΠΈ , Π Π ΠΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ Π΄Π»Ρ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎ-Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°.Π‘ΠΈΠ³ΠΌΠΎΠΈΠ΄Π°Π»ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΊΡΠΈΠ²ΡΠ΅ ΠΈΠ· ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² Ρ ΞFRET ΠΈ ΡΠΠΠ€ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π°ΠΏΠΏΡΠΎΠΊΡΠΈΠΌΠ°ΡΠΈΠΈ ΠΊΡΠΈΠ²ΠΎΠΉ Π½Π΅Π»ΠΈΠ½Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠΉ ΡΠ΅Π³ΡΠ΅ΡΡΠΈΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π»ΠΎΠ³Π°ΡΠΈΡΠΌΠ° (Π°Π³ΠΎΠ½ΠΈΡΡ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡΠΎΡ) Π² Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΎΡ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ° (ΡΡΠΈ ΠΏΠ°ΡΠ°ΠΌΠ΅ΡΡΠ°). ΠΠΎΠ½ΡΡΠ°Π½ΡΠ° ΡΠ°Π²Π½ΠΎΠ²Π΅ΡΠ½ΠΎΠΉ Π΄ΠΈΡΡΠΎΡΠΈΠ°ΡΠΈΠΈ Π΄Π»Ρ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π° Ρ ΡΠ΅Π½ΡΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ Ξ²2-AR-Gs ( K ΠΈ ) ΠΈ IC 50 Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΠ°Π½Ρ ΠΏΡΡΠ΅ΠΌ ΠΏΠΎΠ΄Π±ΠΎΡΠ° ΠΊΡΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½Π΅Π»ΠΈΠ½Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΡΠ΅Π³ΡΠ΅ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Ρ ΠΎΠ΄Π½ΠΈΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΌ ΡΠ°ΠΉΡΠΎΠΌ — ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΠ½ΠΊΠ° K ΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΡΠΉ ΡΠ°ΠΉΡ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡ ΠΏΠ°ΡΠ°ΠΌΠ΅ΡΡΠ°ΠΌ logIC 5O ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ.{n}} $
Π³Π΄Π΅ E ΠΌΠ°ΠΊΡ — ΡΡΠΎ ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΡΠΉ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ ΡΠΠΠ€ ΡΠΈΡΡΠ΅ΠΌΡ, ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΡΠΉ ΠΎΠ±ΡΠ°Π±ΠΎΡΠΊΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅ΡΠΎΠΊ 100 ΠΌΠΊΠ ΡΠΎΡΡΠΊΠΎΠ»ΠΈΠ½Π° ΠΈ 100 ΠΌΠΊΠ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π°, E ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ ΡΠΠΠ€ Π½Π° ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΡΡΡΡΡΡΡ ΠΊΠΎΠ½ΡΠ΅Π½ΡΡΠ°ΡΠΈΡ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»Π° ([ A ]) ΠΈ n ΠΏΡΠ΅Π΄ΡΡΠ°Π²Π»ΡΠ΅Ρ ΡΠΎΠ±ΠΎΠΉ Π½Π°ΠΊΠ»ΠΎΠ½ ΡΡΠ½ΠΊΡΠΈΠΈ ΠΏΡΠ΅ΠΎΠ±ΡΠ°Π·ΠΎΠ²Π°ΡΠ΅Π»Ρ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π΅Ρ Π·Π°Π½ΡΡΠΎΡΡΡ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° Ρ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠΎΠΌ. Π Π ΠΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π±ΡΠ»ΠΎ ΠΎΠ³ΡΠ°Π½ΠΈΡΠ΅Π½ΠΎ ΡΠΎΠΎΡΠ²Π΅ΡΡΡΠ²ΡΡΡΠΈΠΌ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ K ΠΈ ΠΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΠΎΠ»ΡΡΠ΅Π½Ρ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡΡΠ΅Π½ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΡΠ²ΡΠ·ΡΠ²Π°Π½ΠΈΡ ΡΠ°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° (ΡΠΌ. ΠΡΡΠ΅).ΠΠ½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡ 1 / Ο Π±ΡΠ»ΠΈ ΡΠ°ΡΡΡΠΈΡΠ°Π½Ρ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ Π΄ΠΎΠ»ΠΈ ΡΠ»ΠΈΡΠ½ΠΈΡ Ξ²2-AR-Gs, ΡΠ²ΡΠ·Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡΠΎΡΠ΅ΡΠ΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ, ΠΊΠΎΡΠΎΡΠ°Ρ Π³Π΅Π½Π΅ΡΠΈΡΡΠ΅Ρ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½Ρ ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅ΡΠ° ΡΠΠΠ€ (ΡΠΌ. ΠΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡΠ΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΠ°Π±Π»ΠΈΡΡ 5).
Π‘ΡΠ°ΡΠΈΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·
ΠΠ°Π½Π½ΡΠ΅ Π²ΡΡΠ°ΠΆΠ΅Π½Ρ Π² Π²ΠΈΠ΄Π΅ ΡΡΠ΅Π΄Π½ΠΈΡ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΠΉ Β± S.E.M. ΠΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡ Π½Π΅Π·Π°Π²ΠΈΡΠΈΠΌΠΎ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ ΡΡΠ΅Ρ ΡΠ°Π· Ρ 3β6 ΡΠ΅Ρ Π½ΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ°ΠΌΠΈ Π½Π° ΠΎΠ΄Π½ΠΎ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ΅ ( N > 3). Π‘ΡΠ°ΡΠΈΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΠΈΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½ΡΠ»ΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ GraphPad Prism 7.0c (Graphpad Software, Inc.). Π‘ΡΠ°ΡΠΈΡΡΠΈΡΠ΅ΡΠΊΡΡ Π·Π½Π°ΡΠΈΠΌΠΎΡΡΡ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΄Π΅Π»ΡΠ½ΡΡ ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠΎΠ² ΠΏΡΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Ρ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡΠ·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΠ³ΠΎ t-ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΈΡ Π‘ΡΡΡΠ΄Π΅Π½ΡΠ°.Π§ΡΠΎΠ±Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΈΡΡ, ΠΊΠ°ΠΊ Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π²Π°ΡΡΠΈΡΠΎΠ²Π°Π»ΠΈΡΡ Π² ΡΠΊΡΠΏΠ΅ΡΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΠ°Π»ΡΠ½ΡΡ ΠΏΠΎΠ²ΡΠΎΡΠ°Ρ , Π΄Π°Π½Π½ΡΠ΅ Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΎΠ±ΡΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½Ρ ΠΈ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ Π·Π½Π°ΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ Π±ΡΠ»ΠΈ ΠΏΡΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Ρ ΠΏΠ°ΡΠ½ΡΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΏΠ°ΡΠ½ΡΠ΅ t-ΠΊΡΠΈΡΠ΅ΡΠΈΠΈ Π‘ΡΡΡΠ΄Π΅Π½ΡΠ°. ΠΠ΄Π½ΠΎΡΡΠΎΡΠΎΠ½Π½ΠΈΠΉ Π΄ΠΈΡΠΏΠ΅ΡΡΠΈΠΎΠ½Π½ΡΠΉ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ANOVA Ρ ΠΏΠΎΡΡ-ΡΠ΅ΡΡΠΎΠΌ Π’ΡΡΠΊΠΈ Π±ΡΠ» Π²ΡΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ Π΄Π»Ρ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠΈ Π·Π½Π°ΡΠΈΠΌΠΎΡΡΠΈ ΠΏΡΠΈ ΠΎΡΠ΅Π½ΠΊΠ΅ ΡΡΠ°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ Π½Π΅ΡΠΊΠΎΠ»ΡΠΊΠΈΠΌΠΈ ΡΡΠ»ΠΎΠ²ΠΈΡΠΌΠΈ (ΡΠΈΡ. 3d, e, g) ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρ ΡΠ»ΠΈΡΠ½ΠΈΡΠΌΠΈ (ΡΠΈΡ. 5β6) ΡΠΎ Π·Π½Π°ΡΠ΅Π½ΠΈΡΠΌΠΈ p * p β€ 0,05 ; ** p β€ 0,01 ; *** p β€ 0,001 ; **** p β€ 0.
ΠΡΡΠ°Π²ΠΈΡΡ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ