Π›Π°ΠΌΠΏΠ° габаритная Π»Π°Π΄Π° Π³Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°: Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°Β β€” Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹, примСняСмыС Π²Β Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅Β β€” ΠΆΡƒΡ€Π½Π°Π» Π—Π°Β Ρ€ΡƒΠ»Π΅ΠΌ

Π‘ΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½ΠΈΠ΅

Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°Β β€” Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹, примСняСмыС Π²Β Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅Β β€” ΠΆΡƒΡ€Π½Π°Π» Π—Π°Β Ρ€ΡƒΠ»Π΅ΠΌ

ΠžΡ‚ исправности Π²Π½Π΅ΡˆΠ½ΠΈΡ… свСтовых ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€ΠΎΠ² вашСго автомобиля зависит Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ — Π½Π΅ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ ваша ΠΈ Π²Π°ΡˆΠΈΡ… пассаТиров, Π½ΠΎ ΠΈ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… участников Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ двиТСния. Π’ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎΡ‡Π΅ΠΌΡƒ ΠΊΡ€Π°ΠΉΠ½Π΅ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ, ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ прСдусмотрСны ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»Π΅ΠΌ для установки Π² свСтовых ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Π°Ρ… вашСй Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°, ΠΈ ΡƒΠΌΠ΅Ρ‚ΡŒ Π² случаС нСобходимости ΠΈΡ… Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ.

Π˜Π·Β ΡΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ бСзопасности Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»Π΅ΠΉ, пассаТиров ΠΈΒ ΠΏΠ΅ΡˆΠ΅Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠŸΡ€Π°Π²ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈ Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ двиТСния и ВСхничСским Ρ€Π΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚ΠΎΠΌ о бСзопасности колСсных транспортных срСдств Π·Π°ΠΏΡ€Π΅Ρ‰Π΅Π½Π° эксплуатация Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ, внСшниС свСтовыС ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Ρ‹ ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ… Π½Π΅Β ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ трСбованиям конструкции Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ транспортного срСдства. Π’Π΅Π΄ΡŒ, с одной стороны, Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒ Π±Ρ‹Π» Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠΎ Π²ΠΈΠ΄Π΅Π½ Π½Π°Β Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ³Π΅, а с другой — опасно ΠΎΡΠ»Π΅ΠΏΠΈΡ‚ΡŒ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΠ΅ΡˆΠ΅Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ² слишком ярким ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎ настроСнным свСтом Ρ„Π°Ρ€. Π Π°Π±ΠΎΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ стоп-сигналы позволят Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΡƒΡŽ Π΄ΠΈΡΡ‚Π°Π½Ρ†ΠΈΡŽ Π΄Π²ΠΈΠ³Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΡΡ Π·Π°Β Π²Π°ΠΌΠΈ водитСлям. Π’Π°ΠΊΠΈΡ… нюансов мноТСство, ΠΈΒ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΡΠ±Π΅Ρ€Π΅Ρ‡ΡŒ Π½Π΅Β Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ срСдства ΠΈΒ Π½Π΅Ρ€Π²Ρ‹, но часто ΠΈΒ Π·Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ²ΡŒΠ΅.

===

Π›Π°ΠΌΠΏΡ‹, примСняСмыС Π²Β Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°

Π›Π°ΠΌΠΏΡ‹, примСняСмыС Π²Β Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°

Π›Π°ΠΌΠΏΡ‹, примСняСмыС Π²Β Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°

[14Β ΠΎΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΉ ΠΏΠΎΒ Ρ‚Π΅Ρ…ΠΎΠ±ΡΠ»ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡŽ Lada Granta, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π²Π°ΠΌ ΡΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡ‚ΡŒ]

[Как ΡΡΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌΠΈΡ‚ΡŒ Π½Π°Β ΠΏΠ»Π°Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΌ ВО Lada Granta]Β [ВСхничСскоС обслуТиваниС Lada Granta Π½Π°Β 2,5 тыс. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [ВСхничСскоС обслуТиваниС Lada Granta Π½Π°Β 15Β 000Β ΠΈ 105Β 000Β ΠΊΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [ВСхничСскоС обслуТиваниС Lada Granta Π½Π°Β 30Β 000Β ΠΈ 60Β 000Β ΠΊΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [ВСхничСскоС обслуТиваниС Lada Granta Π½Π°Β 45 тыс. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [ВСхничСскоС обслуТиваниС Lada Granta 75 тыс. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [ВСхничСскоС обслуТиваниС Lada Granta Π½Π°Β 90 тыс. ΠΊΠΌΒ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π΅Π³Π°]Β [Π‘Π°ΠΌΠΎΡΡ‚ΠΎΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π’ΠžΒ β€” ΠΎΠ±Ρ‰ΠΈΠ΅ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄Π°Ρ†ΠΈΠΈ]Β [ΠŸΡ€Π°Π²ΠΈΠ»Π° Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΈΠΊΠΈ бСзопасности ΠΏΡ€ΠΈ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡ‚ΠΎΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ ВО]Β [Π˜Π½ΡΡ‚Ρ€ΡƒΠΌΠ΅Π½Ρ‚, Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡ‹ΠΉ для провСдСния тСхобслуТивания Lada Granta]Β 

НашС новоС видСо

ΠŸΠΎΠ½Ρ€Π°Π²ΠΈΠ»Π°ΡΡŒ Π·Π°ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΊΠ°? Подпишись ΠΈΒ Π±ΡƒΠ΄Π΅ΡˆΡŒ всСгда в курсС!

Π—Π°Β Ρ€ΡƒΠ»Π΅ΠΌ на ЯндСкс.Π”Π·Π΅Π½

Page not found — Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠ°Π½ΡƒΠ°Π» Π·Π°ΠΊΠ°Π· Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΊΠ½ΠΈΠ³ с доставкой Π² Π»ΡŽΠ±ΡƒΡŽ Ρ‚ΠΎΡ‡ΠΊΡƒ ΠΌΠΈΡ€Π°

НАШИ ΠŸΠΠ Π’ΠΠ•Π Π«:

Π›ΡŽΠ±ΠΎΠΉ соврСмСнный Π»Π΅Π³ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³Ρ€ΡƒΠ·ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡ‚ΠΎΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ, Π² ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎΠΌ Π³Π°Ρ€Π°ΠΆΠ΅. ВсС Ρ‡Ρ‚ΠΎ для этого потрСбуСтся – Π½Π°Π±ΠΎΡ€ инструмСнта ΠΈ заводскоС руководство ΠΏΠΎ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Ρƒ с ΠΏΠΎΠ΄Ρ€ΠΎΠ±Π½Ρ‹ΠΌ (ΠΏΠΎΡˆΠ°Π³ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ) описаниСм выполнСния ΠΎΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΉ. Π’Π°ΠΊΠΎΠ΅ руководство Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ Ρ‚ΠΈΠΏΡ‹ примСняСмых эксплуатационных ТидкостСй, масСл ΠΈ смазок, Π° самоС Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅ – ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹ затяТки всСх Ρ€Π΅Π·ΡŒΠ±ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… соСдинСний Π΄Π΅Ρ‚Π°Π»Π΅ΠΉ ΡƒΠ·Π»ΠΎΠ² ΠΈ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ‚ΠΎΠ² автомобиля. Π˜Ρ‚Π°Π»ΡŒΡΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ – Fiat (Π€ΠΈΠ°Ρ‚) Alfa Romeo (ΠΠ»ΡŒΡ„Π° Π ΠΎΠΌΠ΅ΠΎ) Lancia (Лянча) Ferrari (Π€Π΅Ρ€Ρ€Π°Ρ€ΠΈ) Mazerati (ΠœΠ°Π·Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈ) ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‚ свои конструктивныС особСнности. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π² ΠΎΡΠΎΠ±ΡƒΡŽ Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏΡƒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΠΈΡ‚ΡŒ всС французскиС ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ – Peugout (ПСТо), Renault (Π Π΅Π½ΠΎ) ΠΈ Citroen (Π‘ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΠ΅Π½). НСмСцкиС ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ слоТныС. ОсобСнно это относится ΠΊ Mercedes Benz (ΠœΠ΅Ρ€ΡΠ΅Π΄Π΅Ρ Π‘Π΅Π½Ρ†), BMW (Π‘ΠœΠ’), Audi (Ауди) ΠΈ Porsche (ΠŸΠΎΡ€Ρˆ), Π² Ρ‡ΡƒΡ‚ΡŒ мСньшСй — ΠΊ Volkswagen (ЀольксвагСн) ΠΈ Opel (ОпСль). Π‘Π»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΡƒΡŽ Π±ΠΎΠ»ΡŒΡˆΡƒΡŽ Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏΡƒ, ΠΎΠ±ΠΎΡΠΎΠ±Π»Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ ΠΏΠΎ конструктивным ΠΏΡ€ΠΈΠ·Π½Π°ΠΊΠ°ΠΌ ΡΠΎΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ амСриканскиС ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΈ- Chrysler, Jeep, Plymouth, Dodge, Eagle, Chevrolet, GMC, Cadillac, Pontiac, Oldsmobile, Ford, Mercury, Lincoln. Из ΠšΠΎΡ€Π΅ΠΉΡΠΊΠΈΡ… Ρ„ΠΈΡ€ΠΌ слСдуСт ΠΎΡ‚ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΡ‚ΡŒ Hyundai/Kia, GM-DAT (Daewoo), SsangYong.

БовсСм Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΎ японскиС ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡Π°Π»ΠΈΡΡŒ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠ½Π°Ρ‡Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΈ доступными Ρ†Π΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π½Π° запасныС части, Π½ΠΎ Π² послСднСС врСмя ΠΎΠ½ΠΈ Π΄ΠΎΠ³Π½Π°Π»ΠΈ ΠΏΠΎ этим показатСлям прСстиТныС СвропСйскиС ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠΈ. ΠŸΡ€ΠΈΡ‡Π΅ΠΌ это относится практичСски Π² ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ стСпСни ΠΊΠΎ всСм ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠ°ΠΌ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ ΠΈΠ· страны восходящСго солнца – Toyota (Π’ΠΎΠΉΠΎΡ‚Π°), Mitsubishi (ΠœΠΈΡ†ΡƒΠ±ΠΈΡΠΈ), Subaru (Π‘ΡƒΠ±Π°Ρ€Ρƒ), Isuzu (Π˜ΡΡƒΠ΄Π·Ρƒ), Honda (Π₯ΠΎΠ½Π΄Π°), Mazda (Мазда ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΈΠ»ΠΈ Ρ€Π°Π½ΡŒΡˆΠ΅ ΠœΠ°Ρ†ΡƒΠ΄Π°), Suzuki (Π‘ΡƒΠ·ΡƒΠΊΠΈ), Daihatsu (Дайхатсу), Nissan (Ниссан). Ну, Π° ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹, Π²Ρ‹ΠΏΡƒΡ‰Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ΄ японо-амСриканскими Π±Ρ€Π΅Π½Π΄Π°ΠΌΠΈ Lexus (ЛСксус), Scion (Π‘Ρ†ΠΈΠΎΠ½), Infinity (Π˜Π½Ρ„ΠΈΠ½ΠΈΡ‚ΠΈ), Acura (Акура) с самого Π½Π°Ρ‡Π°Π»Π° Π±Ρ‹Π»ΠΈ Π½Π΅Π΄Π΅ΡˆΠ΅Π²Ρ‹ΠΌΠΈ.

Β 

ΠžΡ‚Π΅Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ сильно измСнились с Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½ΠΎΡ€ΠΌ Π΅Π²Ρ€ΠΎ-3. Π»Π°Π΄Π° ΠΊΠ°Π»ΠΈΠ½Π°, Π»Π°Π΄Π° ΠΏΡ€ΠΈΠΎΡ€Π° ΠΈ Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π»Π°Π΄Π° Π½ΠΈΠ²Π° 4Ρ…4 Ρ‚Π΅ΠΏΠ΅Ρ€ΡŒ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ слоТнСС Π² обслуТивании ΠΈ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π΅.

Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Ρ‚ΡŒ Ссли машина Π½Π΅ заводится, ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°Ρ€ΡΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ аккумулятор, ΠΊΠ°ΠΊ завСсти ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρƒ Π² ΠΌΠΎΡ€ΠΎΠ·. ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚Ρ‹ Π½Π° эти вопросы ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π½Π°ΠΉΡ‚ΠΈ Π½Π° страницах сайта ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³. прСдставлСнных здСсь ΠΆΠ΅

Автомануал — ΠΎΡ‚ Π°Π½Π³Π». manual — руководство. ПособиС ΠΏΠΎ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Ρƒ автомобиля ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ†ΠΈΠΊΠ»Π°. Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π°ΡŽΡ‚ заводскиС руководства ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³ΠΈ , Π²Ρ‹ΠΏΡƒΡ‰Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ спСциализированными Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈΠ·Π΄Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΡ‚Π²Π°ΠΌΠΈ.

CΠ°ΠΉΡ‚ Автомануал Π½Π΅ нСсСт Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ отвСтствСнности Π·Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½Ρ‹Π΅ поврСТдСния Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΈΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ нСсчастныС случаи, связанныС с использованиСм Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ‰Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΈ.

Page not found — Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠ°Π½ΡƒΠ°Π» Π·Π°ΠΊΠ°Π· Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΊΠ½ΠΈΠ³ с доставкой Π² Π»ΡŽΠ±ΡƒΡŽ Ρ‚ΠΎΡ‡ΠΊΡƒ ΠΌΠΈΡ€Π°

НАШИ ΠŸΠΠ Π’ΠΠ•Π Π«:

Π›ΡŽΠ±ΠΎΠΉ соврСмСнный Π»Π΅Π³ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ Π³Ρ€ΡƒΠ·ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±ΡΠ»ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡ‚ΠΎΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ, Π² ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎΠΌ Π³Π°Ρ€Π°ΠΆΠ΅. ВсС Ρ‡Ρ‚ΠΎ для этого потрСбуСтся – Π½Π°Π±ΠΎΡ€ инструмСнта ΠΈ заводскоС руководство ΠΏΠΎ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Ρƒ с ΠΏΠΎΠ΄Ρ€ΠΎΠ±Π½Ρ‹ΠΌ (ΠΏΠΎΡˆΠ°Π³ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ) описаниСм выполнСния ΠΎΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΉ. Π’Π°ΠΊΠΎΠ΅ руководство Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½ΠΎ ΡΠΎΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ Ρ‚ΠΈΠΏΡ‹ примСняСмых эксплуатационных ТидкостСй, масСл ΠΈ смазок, Π° самоС Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅ – ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½Ρ‚Ρ‹ затяТки всСх Ρ€Π΅Π·ΡŒΠ±ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… соСдинСний Π΄Π΅Ρ‚Π°Π»Π΅ΠΉ ΡƒΠ·Π»ΠΎΠ² ΠΈ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ‚ΠΎΠ² автомобиля. Π˜Ρ‚Π°Π»ΡŒΡΠ½ΡΠΊΠΈΠ΅ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ – Fiat (Π€ΠΈΠ°Ρ‚) Alfa Romeo (ΠΠ»ΡŒΡ„Π° Π ΠΎΠΌΠ΅ΠΎ) Lancia (Лянча) Ferrari (Π€Π΅Ρ€Ρ€Π°Ρ€ΠΈ) Mazerati (ΠœΠ°Π·Π΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈ) ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‚ свои конструктивныС особСнности. Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π² ΠΎΡΠΎΠ±ΡƒΡŽ Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏΡƒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΠΈΡ‚ΡŒ всС французскиС ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ – Peugout (ПСТо), Renault (Π Π΅Π½ΠΎ) ΠΈ Citroen (Π‘ΠΈΡ‚Ρ€ΠΎΠ΅Π½). НСмСцкиС ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ слоТныС. ОсобСнно это относится ΠΊ Mercedes Benz (ΠœΠ΅Ρ€ΡΠ΅Π΄Π΅Ρ Π‘Π΅Π½Ρ†), BMW (Π‘ΠœΠ’), Audi (Ауди) ΠΈ Porsche (ΠŸΠΎΡ€Ρˆ), Π² Ρ‡ΡƒΡ‚ΡŒ мСньшСй — ΠΊ Volkswagen (ЀольксвагСн) ΠΈ Opel (ОпСль). Π‘Π»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΡƒΡŽ Π±ΠΎΠ»ΡŒΡˆΡƒΡŽ Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏΡƒ, ΠΎΠ±ΠΎΡΠΎΠ±Π»Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ ΠΏΠΎ конструктивным ΠΏΡ€ΠΈΠ·Π½Π°ΠΊΠ°ΠΌ ΡΠΎΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ амСриканскиС ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΈ- Chrysler, Jeep, Plymouth, Dodge, Eagle, Chevrolet, GMC, Cadillac, Pontiac, Oldsmobile, Ford, Mercury, Lincoln. Из ΠšΠΎΡ€Π΅ΠΉΡΠΊΠΈΡ… Ρ„ΠΈΡ€ΠΌ слСдуСт ΠΎΡ‚ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΡ‚ΡŒ Hyundai/Kia, GM-DAT (Daewoo), SsangYong.

БовсСм Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΎ японскиС ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡Π°Π»ΠΈΡΡŒ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠ½Π°Ρ‡Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΈ доступными Ρ†Π΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π½Π° запасныС части, Π½ΠΎ Π² послСднСС врСмя ΠΎΠ½ΠΈ Π΄ΠΎΠ³Π½Π°Π»ΠΈ ΠΏΠΎ этим показатСлям прСстиТныС СвропСйскиС ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠΈ. ΠŸΡ€ΠΈΡ‡Π΅ΠΌ это относится практичСски Π² ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ стСпСни ΠΊΠΎ всСм ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠ°ΠΌ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ ΠΈΠ· страны восходящСго солнца – Toyota (Π’ΠΎΠΉΠΎΡ‚Π°), Mitsubishi (ΠœΠΈΡ†ΡƒΠ±ΠΈΡΠΈ), Subaru (Π‘ΡƒΠ±Π°Ρ€Ρƒ), Isuzu (Π˜ΡΡƒΠ΄Π·Ρƒ), Honda (Π₯ΠΎΠ½Π΄Π°), Mazda (Мазда ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΈΠ»ΠΈ Ρ€Π°Π½ΡŒΡˆΠ΅ ΠœΠ°Ρ†ΡƒΠ΄Π°), Suzuki (Π‘ΡƒΠ·ΡƒΠΊΠΈ), Daihatsu (Дайхатсу), Nissan (Ниссан). Ну, Π° ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹, Π²Ρ‹ΠΏΡƒΡ‰Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ΄ японо-амСриканскими Π±Ρ€Π΅Π½Π΄Π°ΠΌΠΈ Lexus (ЛСксус), Scion (Π‘Ρ†ΠΈΠΎΠ½), Infinity (Π˜Π½Ρ„ΠΈΠ½ΠΈΡ‚ΠΈ), Acura (Акура) с самого Π½Π°Ρ‡Π°Π»Π° Π±Ρ‹Π»ΠΈ Π½Π΅Π΄Π΅ΡˆΠ΅Π²Ρ‹ΠΌΠΈ.

Β 

ΠžΡ‚Π΅Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΠΈ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ сильно измСнились с Π²Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π½ΠΎΡ€ΠΌ Π΅Π²Ρ€ΠΎ-3. Π»Π°Π΄Π° ΠΊΠ°Π»ΠΈΠ½Π°, Π»Π°Π΄Π° ΠΏΡ€ΠΈΠΎΡ€Π° ΠΈ Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π»Π°Π΄Π° Π½ΠΈΠ²Π° 4Ρ…4 Ρ‚Π΅ΠΏΠ΅Ρ€ΡŒ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ слоТнСС Π² обслуТивании ΠΈ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π΅.

Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Ρ‚ΡŒ Ссли машина Π½Π΅ заводится, ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°Ρ€ΡΠ΄ΠΈΡ‚ΡŒ аккумулятор, ΠΊΠ°ΠΊ завСсти ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρƒ Π² ΠΌΠΎΡ€ΠΎΠ·. ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚Ρ‹ Π½Π° эти вопросы ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π½Π°ΠΉΡ‚ΠΈ Π½Π° страницах сайта ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³. прСдставлСнных здСсь ΠΆΠ΅

Автомануал — ΠΎΡ‚ Π°Π½Π³Π». manual — руководство. ПособиС ΠΏΠΎ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Ρƒ автомобиля ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ†ΠΈΠΊΠ»Π°. Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π°ΡŽΡ‚ заводскиС руководства ΠΈ ΠΊΠ½ΠΈΠ³ΠΈ , Π²Ρ‹ΠΏΡƒΡ‰Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ спСциализированными Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΈΠ·Π΄Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΡ‚Π²Π°ΠΌΠΈ.

CΠ°ΠΉΡ‚ Автомануал Π½Π΅ нСсСт Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠΎΠΉ отвСтствСнности Π·Π° Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½Ρ‹Π΅ поврСТдСния Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΈΠΊΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ нСсчастныС случаи, связанныС с использованиСм Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ‰Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ ΠΈΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΈ.

Π›Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΠΈ Π² Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ Π»Π°Π΄Π° Π³Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°

ЗдравствуйтС Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ³ΠΈΠ΅ подписчики!

БСгодня я заснял Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ ΠΎ Ρ‚ΠΎΠΌ ΠΊΠ°ΠΊ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΠΈ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°,
Они ΠΆΠ΅ кстати ΠΈ Π”Π½Π΅Π²Π½Ρ‹Π΅ Π₯ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Π΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ! ( Π’ ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½Π°Ρ… ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° искал Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΡƒ, всС Ρ‡ΡƒΡ‚ΡŒ с ΡƒΠΌΠ° Π½Π΅ ΡΠΎΡˆΠ»ΠΈβ€¦ ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° я ΠΈΠΌ Π³ΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΈΠ»: » ЗдравствуйтС, Ρƒ Вас Π΅ΡΡ‚ΡŒ свСтодиодныС Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΠΈ, Π½Π° Π΄Π½Π΅Π²Π½Ρ‹Π΅ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Π΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ Π½Π° Π›Π°Π΄Ρƒ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρƒ?»
НС ΠΌΠ½Π΅ приносили Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΠΈ Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Π΅, Π΄Π°ΠΆΠ΅ Π΄ΠΎ смСха доходило… ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ Π½Π΅ нСсли:)))))

Но Π΄Π΅Π»ΠΎ Π² Ρ‚ΠΎΠΌ Ρ‡Ρ‚ΠΎ Ссли ΠΏΡ€ΠΎΠ΄Π°Π²Ρ†Ρƒ ΡΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Ρ‚Π΅Π±Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΠΈ Π½ΡƒΠΆΠ½Ρ‹ Π² Π΄Π½Π΅Π²Π½Ρ‹Π΅ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Π΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ (Π”Π₯О) Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ½ΠΈ Π΄ΠΎΠ»Π³ΠΎ Π½Π΅ смогут ΠΏΠΎΠ²Π΅Ρ€ΠΈΡ‚ΡŒ Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π½Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°Ρ… ΠΎΠ½ΠΈ просто Π½Π° просто Π΅ΡΡ‚ΡŒ! :))
НуТно Π³ΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΈΡ‚ΡŒ: «Π—дравствуйтС, Π΄Π°ΠΉΡ‚Π΅ ΠΌΠ½Π΅ поТалуйста свСтодиодныС Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΠΈ Π² Π“ΠΠ‘ΠΠ Π˜Π’Π« Π½Π° Π›Π°Π΄Ρƒ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρƒ! )
И Ρ‚Π°ΠΊ Π±Π»ΠΈΠΆΠ΅ ΠΊ дСлу…
Π’ΠΎΡ‚ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ ΠΊΠ°ΠΊ ΠΎΠ½ΠΈ ΠΌΠ΅Π½ΡΡŽΡ‚ΡΡ!
Π”Π°ΠΆΠ΅ Ρ‚Ρ€ΠΈΠ½ΠΎΠ³Ρƒ для Ρ„ΠΎΡ‚ΠΈΠΊΠ° сСгодня ΠΊΡƒΠΏΠΈΠ», Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π±Ρ‹ Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΠ»ΠΎΡΡŒ Π½Π΅ с Π΄Ρ€ΠΎΠΆΠ°Ρ‰ΠΈΡ… Ρ€ΡƒΠΊ, Π° ΠΏΠΎ Π½ΠΎΡ€ΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌΡƒ :)) Π° Π²ΠΎΡ‚ ΠΈ Ρ‚Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ³Π° …

Π’Π°ΠΊ Ρ‡Ρ‚ΠΎ это Π²ΠΈΠ΄Π΅ΠΎ Π΄Π΅ΠΉΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΠΎ с ΠΌΠΎΠ΅ΠΉ стороны, ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Π» ΠΏΠΎΠΏΡ‹Ρ‚ΠΎΠΊ ΡΠ½ΠΈΠΌΠ°Ρ‚ΡŒ самому, просил Π»ΡŽΠ±ΠΈΠΌΡƒΡŽ ΠŸΠ»Π΅ΠΌΡΡˆΠΊΡƒ ΠΠ°ΡΡ‚ΡŽΡˆΠΊΡƒ, Π½ΠΎ Ρ‚Ρ€ΠΈΠ½ΠΎΠ³Π° спасла ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ Π²ΠΎΡ‚ Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΠ»ΠΎΡΡŒ!

Для Π½ΠΎΡ€ΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ систСмы освСщСния ΠΈ свСтовой сигнализации автомобиля Lada Granta примСняйтС Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹, ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π² руководствС ΠΏΠΎ эксплуатации Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΌ. Π‘Ρ‚ΠΎΠΈΡ‚ ΠΎΡ‚ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΡ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π½Π° ΠΎΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ сСмСйствС Lada Granta ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ Π½ΠΎΠ²Ρ‹Π΅ Ρ„Π°Ρ€Ρ‹ с Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠΌΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°ΠΌΠΈ. Π’ Ρ‚Π°Π±Π»ΠΈΡ†Π΅ ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Ρ‹ ΠΊΠ°Ρ‚Π΅Π³ΠΎΡ€ΠΈΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏ, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡŽΡ‚ΡΡ Π½Π° Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π΅ ΠΈ дорСстайлинговой вСрсии.

ΠœΠ΅ΡΡ‚ΠΎ установкиНовая GrantaБтарая Granta
Π€Π°Ρ€Π°
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ/дальнСго свСтаh29h5
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°PY21W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ огня ΠΈ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ огняW21/5W
Π—Π°Π΄Π½ΠΈΠΉ Ρ„ΠΎΠ½Π°Ρ€ΡŒ (для ΠΊΡƒΠ·ΠΎΠ²Π° «сСдан»)
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° сигнала тормоТСния ΠΈ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ огняP21/5W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° свСта Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Π°P21W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΡ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ огняP21W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°PY21W
Π—Π°Π΄Π½ΠΈΠΉ Ρ„ΠΎΠ½Π°Ρ€ΡŒ (для ΠΊΡƒΠ·ΠΎΠ²ΠΎΠ² Β«Π»ΠΈΡ„Ρ‚Π±Π΅ΠΊΒ», «хэтчбСк» ΠΈ «унивСрсал»)
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° сигнала тормоТСнияP21W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ огняR10WP10W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° свСта Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Π°W16W
– Π»Π°ΠΌΠΏΠ° указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°PY21W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½Π΅ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΡ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ„Π°Ρ€Ρ‹h26h21
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°WY5WW5W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° освСщСния Π½ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π½Π°ΠΊΠ°W5WC5W (сСдан)
W5W (хэтчбСк)
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΠ»Π°Ρ„ΠΎΠ½Π° освСщСния Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊΠ°C5WC5W

НовыС Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ h29 ΠΈ Н18 это ΡΠ²ΠΎΠ»ΡŽΡ†ΠΈΡ Π»Π°ΠΌΠΏ Н4 ΠΈ Н7. НовыС Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ ΡƒΠΆΠ΅ Π·Π°Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Ρ‹ ΠΊ конструкции Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‰ΠΈΡ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚Π°Ρ… LADA (ΠΏΠΎΠ΄Ρ€ΠΎΠ±Π½Π΅ΠΉ). Lada Granta FL – пСрвая модСль, Π² Ρ„Π°Ρ€Π°Ρ… ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ Π½Π°Ρ‡Π°Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ h29.

ВмСсто Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Π»Π°ΠΌΠΏ h29 Π² Ρ„Π°Ρ€Ρ‹ Lada Granta FL ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡƒΡΡ‚Π°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ h5. ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π΄ установкой Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΠ΅ h5 слСдуСт ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ³Π½ΡƒΡ‚ΡŒ усики:

БвСтят Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ h29 ΠΈ h5 ΠΎΠ΄ΠΈΠ½Π°ΠΊΠΎΠ²ΠΎ, это подтвСрТдаСтся тСстами:

Напомним, Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ ΠΌΡ‹ Π²Ρ‹ΠΊΠ»Π°Π΄Ρ‹Π²Π°Π»ΠΈ ΠΈΠ½ΡΡ‚Ρ€ΡƒΠΊΡ†ΠΈΡŽ ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏ Π² Ρ„Π°Ρ€Π°Ρ… ΠΈ фонарях Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρ‹ (Π±Π»ΠΈΠΆΠ½ΠΈΠΉ ΠΈ дальний свСт, Π”Π₯О).

ΠžΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΡ‚ΡŒ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ автомобиля ΠΈ пассаТиров Π² Π½ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠ΅ врСмя суток ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡŽΡ‚ ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹. Они Π΄Π°ΡŽΡ‚ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΠΌ участникам Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ двиТСния ΡƒΠ²ΠΈΠ΄Π΅Ρ‚ΡŒ очСртания транспорта ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ расстояниС ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ машинами.

ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ освСтитСли ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΡΡŽΡ‚ Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ Π² условиях ΡΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… осадков, Ρ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π°. Для соврСмСнной Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π›Π°Π΄Π° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ ΡƒΡΡ‚Π°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ Π² корпусС спСрСди ΠΈ сзади, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π³Π°Ρ€Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ Ρ‡Π΅Ρ‚ΠΊΡƒΡŽ Π²ΠΈΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ Π°Π²Ρ‚ΠΎ срСди ΠΏΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠ° Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… машин ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π° бСзлюдной трассС.

ΠšΠ°Ρ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρ‹: особСнности ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ

На Π›Π°Π΄Π΅ Π½Π΅ принято ΡƒΡΡ‚Π°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π”Π₯О, поэтому достойной ΠΈΡ… Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡΡ‡ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½Ρ‹Π΅ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½Ρ‹Π΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ. Они Π½Π΅ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π½Π°Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½Ρ‹ для освСщСния Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ½ΠΎΠΉ ΠΏΠ»ΠΎΡ‰Π°Π΄ΠΊΠΈ нСпосрСдствСнно ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΌ. По этой ΠΏΡ€ΠΈΡ‡ΠΈΠ½Π΅ для Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ Π½Π΅ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ‹ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Ρ‚ΡŒ большой ΡΡ€ΠΊΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ.

Π‘Π²Π΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Π½Ρ‹Π΅ Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ с ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ Π² 4/5 Π’Ρ‚ (для ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΈΡ… ΠΈ Π·Π°Π΄Π½ΠΈΡ… ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡Π°ΡŽΡ‚ΡΡ) ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡Π½ΠΎ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠΉΠ΄ΡƒΡ‚ для Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ Π·Π°Π΄Π°Ρ‡ΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‹.

Π—Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ совмСщСны Π² ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ Π±Π»ΠΎΠΊΠ΅ со стоп-огнями. Но Π½ΠΈΠΊΠ°ΠΊΠΈΡ… Π·Π°Ρ‚Ρ€ΡƒΠ΄Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΈΡ… ΠΎΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ Π½Π΅ Π²ΠΎΠ·Π½ΠΈΠΊΠ°Π΅Ρ‚. Π‘Π°ΠΌΠΎΠ΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ΅, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ΅Π½ ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΡ‚ΡŒ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»Π΅Ρ†: Π² Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ ΠΊΠ°ΠΊ с Ρ†ΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅ΠΌ, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ Π±Π΅Π· Π½Π΅Π³ΠΎ, Π² зависимости ΠΎΡ‚ мСста ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΆΠ°.

НуТно Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ Π²ΠΎΠ»ΡŒΡ‚Π°ΠΆ ΠΏΡ€ΠΈ Π²Ρ‹Π±ΠΎΡ€Π΅ элСмСнтов, ΠΈΠ½Π°Ρ‡Π΅ ΠΎΠ½ΠΈ Π½Π΅ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ Π½Π΅ Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‚ ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚Π½ΠΎ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ, Π½ΠΎ ΠΈ ΠΌΠΎΠ³ΡƒΡ‚ привСсти ΠΊ ΠΏΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΡŽ ΠΊΡ€Π΅ΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠΉ. Π ΡƒΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΡΡ‚Π²ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΏΠΎΠΊΡƒΠΏΠΊΠ΅ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΠΎ ΡˆΡ‚Π°Ρ‚Π½Ρ‹ΠΌ огням, ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π² Π΄ΠΎΠΊΡƒΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ… Π½Π° Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒ.

Как Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° сСдан?

ΠŸΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π°Ρ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ согласно стандартным для ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠΈΡ€ΠΎΠ²ΠΊΠ°ΠΌ. Для Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‹ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π° понадобится Π±Π΅ΡΡ†ΠΎΠΊΠΎΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ элСмСнт W5W с ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ 21/5 Π’Ρ‚.

Π‘Π·Π°Π΄ΠΈ ΡƒΡΡ‚Π°Π½Π°Π²Π»ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ издСлия ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠΈΡ€ΠΎΠ²ΠΊΠΈ P21, ΠΏΡ€Π°Π²Π΄Π° ΠΈΡ… ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Π° ΡΠΎΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡ‚ΡŒ 4 Π’Ρ‚. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒ для Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ сСдан ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ Π² любой Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½. ΠŸΡ€ΠΈ этом ΠΏΠΎΠΊΡƒΠΏΠ°Ρ‚Π΅Π»ΡŒ смоТСт приобрСсти ΠΊΠ°ΠΊ стандартныС Ρ‚ΠΈΠΏΡ‹, Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ яркиС свСтодиодныС Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ.

Π’ΠΠ–ΠΠž: Иногда, ΡŽΠ½Ρ‹ΠΉ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠ»ΡŽΠ±ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Ρ€Π΅ΡˆΠΈΡ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΡΡ‚Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ поярчС, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π±Ρ‹ Π΅Π³ΠΎ Π±Ρ‹Π»ΠΎ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ Π²ΠΈΠ΄Π½ΠΎ Π½Π° Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ³Π΅, Π½Ρƒ ΠΈ просто ΠΊΡ€ΡƒΡ‚ΠΎ. Π”Π΅Π»Π°Ρ‚ΡŒ Ρ‚Π°ΠΊ Π½Π΅ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ, ΠΏΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΉ простой ΠΏΡ€ΠΈΡ‡ΠΈΠ½Π΅. Π‘ΠΎΠ»Π΅Π΅ яркая (ΠΈ ΠΊΠ°ΠΊ слСдствиС мощная) Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π±ΡƒΠ΄Π΅Ρ‚ Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΡΡ‚ΡŒ большС Ρ‚Π΅ΠΏΠ»Π°.

Π’ ΠΈΡ‚ΠΎΠ³Π΅, Π½Π°Ρ‡Π½Π΅Ρ‚ ΠΏΠ»Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ ΠΎΡ‚Ρ€Π°ΠΆΠ°Ρ‚Π΅Π»ΡŒ (ΠΈ ΠΈΠ· блСстящСго прСвратится Π² Ρ‡Π΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΉ), оплавится сам ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΠΎΠ½ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹, оплавится Π·Π°Ρ‰ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ΅ «стСкло» Ρ„Π°Ρ€Ρ‹, Ссли ΠΎΠ½ΠΎ пластиковоС. А Ρ‚Π°ΠΊ Π΄Π°, ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠ΅ врСмя Π±ΡƒΠ΄Π΅Ρ‚ ΠΊΡ€ΡƒΡ‚ΠΎ ?

ΠŸΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Π° установки ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΈΡ… Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚ΠΎΠ² производится довольно Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ, Π½ΠΎ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΈ Π°ΠΊΠΊΡƒΡ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‹, ΠΈ ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΆΠ°. ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚ΠΎΠ² Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° располоТСна Π² Π±Π»ΠΎΠΊ-Ρ„Π°Ρ€Π΅ ΠΈ ΠΊ Π½Π΅ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ‰Π΅ всСго ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒΡΡ ΠΈΠ·-ΠΏΠΎΠ΄ ΠΊΠ°ΠΏΠΎΡ‚Π°. ΠŸΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΡΠ½ΡΡ‚ΡŒ ΠΊΠ»Π΅ΠΌΠΌΡ‹ с аккумулятора.

Подобная ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΎΡΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ‚ ΠΈΠ·Π±Π΅ΠΆΠ°Ρ‚ΡŒ замыкания ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΊΡ‚ΠΎΠ² ΠΈ ΠΊΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ обСзопасит ΠΈ самого исполнитСля. Π”Π°Π»Π΅Π΅ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π° ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΈΡ… Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚ΠΎΠ² производится согласно Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠΉ схСмС:

1. ΠžΡ‚ΡΡ‚Π΅Π³ΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‚ΡΡ крСплСния Π½Π° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡƒΡˆΠ½ΠΎΠΌ Ρ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π΅, снимаСтся ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΡƒΠ±ΠΎΠΊ, ΠΊΠΎΡ€ΠΎΠ±ΠΊΠ° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡƒΡˆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π° вытягиваСтся (для Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹).

2. ΠŸΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² часовой стрСлки выкручиваСтся Ρ†ΠΎΠΊΠΎΠ»ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ ΠΈ изымаСтся ΠΈΠ· корпуса.

3. ВытаскиваСтся ΠΈΠ· цоколя старая Π»Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΈ вставляСтся новая, Π½Π° мСсто закручиваСтся Ρ†ΠΎΠΊΠΎΠ»ΡŒ, устанавливаСтся Π² ΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΌ порядкС ΠΊΠΎΡ€ΠΎΠ±ΠΊΠ° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡƒΡˆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π°.

4. Π‘ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠΉ стороны Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π° ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΏΠΎΡ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΠ΅Ρ‚ снятия Π·Π°Ρ‰ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠΉ ΠΊΡ€Ρ‹ΡˆΠΊΠΈ двигатСля. Π”Π°Π»Π΅Π΅ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π° проводится ΠΏΠΎ описанному Π²Ρ‹ΡˆΠ΅ Π°Π»Π³ΠΎΡ€ΠΈΡ‚ΠΌΡƒ.

5. По Π·Π°Π²Π΅Ρ€ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ установки ΠΏΡ€Π°Π²ΠΎΠΉ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ возвращаСтся пластиковая ΠΊΡ€Ρ‹ΡˆΠΊΠ°.

По описанной схСмС Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚ΡŒ установку Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΆΠ΅ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π³ΠΎΡ€Π΅Π²ΡˆΡƒΡŽ Π»Π°ΠΌΠΏΡƒ смоТСт Π΄Π°ΠΆΠ΅ новоиспСчСнный Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»Π΅Ρ† Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρ‹. Но Π½ΡƒΠΆΠ½ΠΎ ΠΏΠΎΠΌΠ½ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΎ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΌ ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΊΠ»Π΅ΠΌΠΌ ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Ρ€ΠΊΠ΅ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΊΠΈ.

ΠžΠ±Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π½Π° Lada Granta Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‚ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ исправно Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ ΠΏΡ€ΠΈ Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠ΅ΠΌ Π·Π°ΠΆΠ°Ρ‚ΠΈΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π² ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΠΎΠ½Π΅. АккуратноС ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΈΡΠΊΠ»ΡŽΡ‡ΠΈΡ‚ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π½ΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Ρ€ΠΊΠΈ соСдинСний.

ΠŸΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ установки Π½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… элСмСнтов сзади Π΅Ρ‰Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΡ‰Π΅. Π’ частности Π·Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Ρ‹ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π²Ρ‹Π½ΠΈΠΌΠ°ΡŽΡ‚ΡΡ довольно Π»Π΅Π³ΠΊΠΎ, Π½ΠΎ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Ρƒ понадобится ΡƒΠ±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒ ΠΊΠΎΠ²Ρ€ΠΈΠΊ Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊΠ°, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ доступ ΠΊ огням. Π”Π°Π»Π΅Π΅ производится ΠΈΠ·ΡŠΡΡ‚ΠΈΠ΅ цоколя (выкручиваСтся ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² часовой стрСлки), ΡƒΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ старой Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ ΠΈ установка Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΉ.

Π‘Π±ΠΎΡ€ΠΊΠ° осущСствляСтся Π² ΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΌ порядкС, ΠΏΡ€ΠΈ этом ΠΎΠ±Ρ‰ΠΈΠΉ срок Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‹ составит ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎ 20-30 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚. ΠŸΡ€ΠΎΠ²Π΅ΡΡ‚ΠΈ ΠΎΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΡΠ°ΠΌΠΎΡΡ‚ΠΎΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π·Π°Ρ‚Ρ€Π°Ρ‚Π°Ρ… Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΠΈ срСдств Π½Π΅ составит Ρ‚Ρ€ΡƒΠ΄Π°.

Π›Π°ΠΌΠΏΡ‹ | Π›Π°Π΄Ρ‹ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρ‹

Автор ΠšΠΎΠ½ΡΡ‚Π°Π½Ρ‚ΠΈΠ½ На Ρ‡Ρ‚Π΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½. ΠŸΡ€ΠΎΡΠΌΠΎΡ‚Ρ€ΠΎΠ² 23.3k.

ΠžΡ‡Π΅Π½ΡŒ Π²Π°ΠΆΠ½ΠΎ для Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Π΅Π² Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ систСму освСщСния автомобиля ΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ Π² Π½Π΅ΠΉ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚. Π‘Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ воТдСния Π½Π°ΠΏΡ€ΡΠΌΡƒΡŽ зависит ΠΎΡ‚ надСТности свСтового Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ. Π‘ΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ Ρ€Π°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΈΠ΅ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»Π΅ΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏ для Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° ΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³Π°ΡŽΡ‚ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½Π½ΡƒΡŽ ΡΡ€ΠΊΠΎΡΡ‚ΡŒ, ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΈΡ‚ΡŒ Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ³Ρƒ Π²ΠΎ врСмя двиТСния. Π­Ρ‚ΠΎ позволяСт своСврСмСнно Π·Π°ΠΌΠ΅Ρ‡Π°Ρ‚ΡŒ Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ½Ρ‹Π΅ Π·Π½Π°ΠΊΠΈ ΠΈ прСпятствия, ΡΠ½ΠΈΠ·ΠΈΡ‚ΡŒ Π½Π°Π³Ρ€ΡƒΠ·ΠΊΡƒ для Π³Π»Π°Π· водитСля.

Π€Π°Ρ€Ρ‹ Π² Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π½Π°Π·Π½Π°Ρ‡Π°ΡŽΡ‚ΡΡ для Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ Π²ΠΎ врСмя пСрСдвиТСния ΠΈ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‡Π°ΡŽΡ‚ Π·Π° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½ΠΈΠΉ ΠΈ дальний свСт.

Π­Π»Π΅ΠΊΡ‚Ρ€ΠΎΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ автомобиля Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π² сСбя Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅Ρ‚:

ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹

β€” 2 Ρ„Π°Ρ€Ρ‹ (Π³ΠΎΠ»ΠΎΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ свСта ΠΈ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΡŽΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΡ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΡƒΡŽ). ΠŸΠΎΠ΄Ρ€Π°Π·Π΄Π΅Π»ΡΠ΅Ρ‚ΡΡ Π½Π° сСкции:

1. свСта Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ/дальнСго. ΠžΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ Π² этой сСкции ΡƒΡΠΏΠ΅ΡˆΠ½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡŽΡ‚ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ h5 12 B. Для оснащСния свСта дальнСго Π±Π΅Ρ€ΡƒΡ‚ Ρ‚Π°ΠΊΡƒΡŽ Π»Π°ΠΌΠΏΡƒ ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ 60 Π’Ρ‚, рСкомСндация для свСта Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ – 55 Π’Ρ‚.

2. сигнализатора ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°. Для этой сСкции идСально ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° янтарного Ρ†Π²Π΅Ρ‚Π°. МодСль PY21W ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ 21 Π’Ρ‚.

3. Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ (Π”Π₯О)/Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ огня. Π’ Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠΉ сСкции ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ Π½Π° основной Π½ΠΈΡ‚ΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ P21/5W 12 Π’/21 Π’Ρ‚, Ρ‚ΠΈΠΏ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π½Π° Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Ρ‚ΠΎΡ‚ ΠΆΠ΅, Π½ΠΎ с Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠΉ ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ – 5 Π’Ρ‚.

4. Π›Π°ΠΌΠΏΡƒ H7 12B ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ 55 Π’Ρ‚ ставят Π½Π° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΡ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΡƒΡŽ Ρ„Π°Ρ€ΡƒΒ 

Β 

Β 

Β 

Π—Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹

β€” правая ΠΈ лСвая Ρ„Π°Ρ€Ρ‹ Π·Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅. Π’ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°ΡŽΡ‚ Π² сСбя Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€Π΅ сСкции, оснащСнныС Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌ Ρ‚ΠΈΠΏΠΎΠΌ Π»Π°ΠΌΠΏ:

1. Π‘Ρ‚ΠΎΠΏ-сигнала ΠΈ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ свСта. Для этой сСкции Π½Π° основной Π½ΠΈΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡŽΡ‚ ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½ΠΎ Π»Π°ΠΌΠΏΡƒ P21/5W 12B/21 Π’Ρ‚. Π›Π°ΠΌΠΏΡƒ P21/5W 12B/5 Π’Ρ‚ – ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ Π½Π° Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ (ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π²Π·ΡΡ‚ΡŒ P21/4W).

2. Π‘ΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π° ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠ². Π’ ΡΠ΅ΠΊΡ†ΠΈΡŽ Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ янтарного Ρ†Π²Π΅Ρ‚Π° PY21W 12Π’/21Π’Ρ‚.

3. Π‘ΠΈΠ³Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π° Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Π°. Для сСкции Ρ‚Ρ€Π΅Ρ‚ΡŒΠ΅ΠΉ Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅ всСго ΠΏΠΎΠ΄Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° P21W 12 Π’/21 Π’Ρ‚.

4. БСкция с Ρ€Π΅Ρ„Π»Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ. Π£ΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒ (сигнализатор) ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π° Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠΉ. УстанавливаСтся Π½Π° Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π½Π° Ρ‚ΠΎΠΌ ΠΆΠ΅ мСстС, Π³Π΄Π΅ этот ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚ крСпится Π½Π° Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… модСлях Π›Π°Π΄Π°, Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… ΠΊΠ°ΠΊ Калина ΠΈΠ»ΠΈ ΠŸΡ€ΠΈΠΎΡ€Π°. Π˜ΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ΡΡ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° с янтарным рассСиватСлСм WSW 12B/5BΡ‚. ΠŸΡ€ΠΈ установкС указатСля с рассСиватСлСм Π±Π΅Π»Ρ‹ΠΌ рСкомСндуСтся Π»Π°ΠΌΠΏΠ° WY5W 12 Π’/5 Π’Ρ‚.

Π’Ρ‹Π±ΠΈΡ€Π°Π΅ΠΌ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹

Π“Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ накаливания ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π°ΡŽΡ‚ всС Π±ΠΎΠ»ΡŒΡˆΡƒΡŽ ΠΏΠΎΠΏΡƒΠ»ΡΡ€Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ для Π»Π°ΠΌΠΏ Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ свСта. Π˜Ρ… Π½Π°Π·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‚ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°ΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΡ„ΠΎΡ€Ρ‚Π°. Но Π±Π΅Π»Ρ‹ΠΉ Ρ†Π²Π΅Ρ‚ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… Π»Π°ΠΌΠΏ ΠΏΡ€ΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ ΠΊ ΡƒΡ…ΡƒΠ΄ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ видимости ΠΏΡ€ΠΈ Π΄ΠΎΠΆΠ΄Π»ΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ³ΠΎΠ΄Π΅. Π‘Π΅Π»Ρ‹ΠΉ свСт большС отсвСчиваСт ΠΎΡ‚ ΠΌΠΎΠΊΡ€ΠΎΠΉ повСрхности, Ρ‡Π΅ΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ³Ρ€Ρ‹Π²Π°Π΅Ρ‚ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄ Π»Π°ΠΌΠΏΠ°ΠΌΠΈ ΠΆΠ΅Π»Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ свСта.

НС составляСт Ρ‚Ρ€ΡƒΠ΄Π° приобрСсти Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠ΅ ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠΈ:

β€” OSRAM;

β€” GENERAL Elektrik;

β€” Philips;

β€” Narva;

β€” IPF;

β€” Hella.

Для Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° большС Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡƒΡŽΡ‚ Π²Ρ‹Π±ΠΈΡ€Π°Ρ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ OSRAM Н4. ОсобСнно ΠΌΠΎΠ΄ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠΈ Standard ΠΈ Light Day. МодСль Standard ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎ соотвСтствуСт ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Ρ‡Π½ΡŽ всСх Π·Π°ΠΊΠΎΠ½ΠΎΠ΄Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠΉ ΠΈ Π½ΠΎΡ€ΠΌ. Π‘Ρ€Π΅Π΄ΠΈ всСх пСрСчислСнных ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»Π΅ΠΉ выдСляСтся Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ высоким ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚Π΅Π»Π΅ΠΌ значСния силы свСта, Ρ‡Ρ‚ΠΎ обСспСчиваСт Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΡƒΡŽ Π±Π΅Π·ΠΎΠΏΠ°ΡΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ.

Π’Π°ΠΊΠΆΠ΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° обСспСчиваСт ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π²Ρ‹Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π½ΠΎΡ€ΠΌΡ‹:

β€” Π³Π΅ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ΠΈΠΈ;

β€” освСщСнности;

β€” Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ†Ρ‹ свСтотСни.

МодСль Light Day ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ ΠΌΠ΅Π½ΡŒΡˆΡƒΡŽ силу свСта, Π½ΠΎ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²Ρ‹Π³ΠΎΠ΄Π½Π° ΠΏΠΎ сроку эксплуатации. Для экономии элСктроэнСргии ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡŽΡ‚ свСтодиодныС Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹. Они Π²Ρ‹ΠΏΡƒΡΠΊΠ°ΡŽΡ‚ΡΡ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ†Π²Π΅Ρ‚Π°. Но, согласно Π½ΠΎΡ€ΠΌΠ°ΠΌ, ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ Π±Π΅Π»Ρ‹ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΆΠ΅Π»Ρ‚Ρ‹ΠΉ Ρ†Π²Π΅Ρ‚. Установка Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… Π»Π°ΠΌΠΏ Π½Π° Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° сущСствСнно сниТаСт Π½Π°Π³Ρ€ΡƒΠ·ΠΊΡƒ Π½Π° аккумулятор ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ ΠΈ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ возникновСния Π”Π’ΠŸ. Π‘Π²Π΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΈΠΎΠ΄Ρ‹ устойчивы ΠΊ Π²ΠΈΠ±Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ ΠΈΡ… срок ΠΆΠΈΠ·Π½ΠΈ.

Π›Π°ΠΌΠΏΡ‹, примСняСмыС Π½Π° Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° (ВАЗ-2190, 2191)


Π’ΠΈΠΏ (Π“ΠžΠ‘Π’)Π’ΠΈΠΏ (Π•Π­Πš )
ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΈΠ΅ Ρ„Π°Ρ€Ρ‹
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° дальнСго свСта
ΠΠšΠ“ 12-60+55
h5
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ свСта
ΠΠšΠ“ 12-60+55
h5
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°
А12-21-4
PY21W
Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ

W21/5W
Π—Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Ρ„ΠΎΠ½Π°Ρ€ΠΈ (для ΠΊΡƒΠ·ΠΎΠ²Π° «сСдан»)
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° сигнала тормоТСния ΠΈ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ огня
А12-21+5-2
P21/5W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° свСта Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Π°
А12-21-3
P21W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΡ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ огня
А12-21-3
P21W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°
А12-21-4
PY21W
Π—Π°Π΄Π½ΠΈΠ΅ Ρ„ΠΎΠ½Π°Ρ€ΠΈ (для ΠΊΡƒΠ·ΠΎΠ²Π° «хэтчбСк»)
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° сигнала тормоТСния
А12-21-3
P21W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ огня

P10W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° свСта Π·Π°Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Π°

W16W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°
А12-21-4
PY21W

Π›Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½Π΅ΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΡ‚ΡƒΠΌΠ°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ„Π°Ρ€Ρ‹

h21
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ указатСля ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚Π°
А12-5-2
W5W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° освСщСния Π½ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π½Π°ΠΊΠ° (для ΠΊΡƒΠ·ΠΎΠ²Π° «сСдан»)
АC12-5-1
C5W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° освСщСния Π½ΠΎΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π·Π½Π°ΠΊΠ° (для ΠΊΡƒΠ·ΠΎΠ²Π° «хэтчбСк»)
А12-5-2
W5W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΎΠ±Ρ‰Π΅Π³ΠΎ освСщСния салона автомобиля
АC12-10-1
C10W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° ΠΈΠ½Π΄ΠΈΠ²ΠΈΠ΄ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ освСщСния мСст водитСля ΠΈ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π½Π΅Π³ΠΎ пассаТира
АC12-4-1
T4W
Π›Π°ΠΌΠΏΠ° освСщСния Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊΠ°
АC12-5-1
C5W

Π›Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π”Π₯О Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°: Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π°, ΠΊΠ°ΠΊΠΈΠ΅ Π»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅

Π›Π°ΠΌΠΏΠ° Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ появилась Π² арсСналС соврСмСнных Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠΎΠ±ΠΈΠ»Π΅ΠΉ ΡΡ€Π°Π²Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π½Π΅Π΄Π°Π²Π½ΠΎ. Π’ тСхничСском руководствС отСчСствСнной ΠΌΠΎΠ΄Π΅Π»ΠΈ Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Ρ‡Π΅Ρ‚ΠΊΠΎ ΠΎΠ±ΠΎΠ·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Ρ€ΠΎΠ»ΡŒ Π΄Π½Π΅Π²Π½Ρ‹Ρ… Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ (Π”Π₯О) Π²ΠΎΠ·Π»ΠΎΠΆΠ΅Π½Π° Π½Π° Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΡƒΡŽ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΊΡƒ, конструкция ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ являСтся Π΄Π²ΡƒΡ…-Π½ΠΈΡ‚Π΅Π²ΠΎΠΉ. Π’ΠΎ врСмя Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ заТигания сначала загораСтся Π½ΠΈΡ‚ΡŒ, ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‡Π°ΡŽΡ‰Π°Ρ Π·Π° Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρƒ Π”Π₯О, Π° с Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ Ρ„Π°Ρ€ происходит ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎΠ΅ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π³Π°Π±Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ освСщСния. ΠœΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠΉ ΠΈΠ· ΠΎΠ±ΠΎΠ·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π½ΠΈΡ‚Π΅ΠΉ составляСт 21 Π’Ρ‚, Π° Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ – 5 Π’Ρ‚.

Для Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ освСщСния ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒ примСняСт ΠΎΠ±Ρ‹ΠΊΠ½ΠΎΠ²Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π”Π₯О. Π‘Π°ΠΌΡ‹ΠΌ нСоспоримым прСимущСством Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€ΠΎΠ² являСтся ΠΈΡ… низкая ΡΡ‚ΠΎΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ, Π° Π²ΠΎΡ‚ «минусов» Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅, Ρ‡Π΅ΠΌ достаточно. Об этом ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ Ρ€Π΅ΠΊΠ»Π°ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΏΠΎΠΊΡƒΠΏΠ°Ρ‚Π΅Π»Π΅ΠΉ, Π³Π΄Π΅ ΠΎΡ‚Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΎ Π½Π΅Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ»ΡŒΡΡ‚Π²ΠΎ тусклым свСтовым ΠΏΡƒΡ‡ΠΊΠΎΠΌ ΠΆΠ΅Π»Ρ‚ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡ‚Ρ‚Π΅Π½ΠΊΠ° ΠΈ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΌ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Ρ‚Π΅Π»Π΅ΠΌ рСсурса ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ устройства. ΠœΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ… Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Π΅Π² ΠΌΠ°ΡˆΠΈΠ½Ρ‹ интСрСсуСт вопрос: ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΡƒ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ.

Вакая расстановка Ρ„Π°ΠΊΡ‚ΠΎΠ² заставляСт Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Π΅Π² Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Β«Π±Ρ€ΠΎΡΠ°Ρ‚ΡŒΡΡΒ» Π½Π° поиски Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ² Π”Π₯О ΠΈ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠΉ возникшСй возмоТности. Π’ Ρ€ΠΎΠ»ΠΈ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€ΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠΉΠ΄ΡƒΡ‚ свСтодиодныС Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π”Π₯О Π±Π΅Π· Ρ†ΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅ΠΉ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½Ρ‹Π΅ устройства, Π½ΠΎ с ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½Π½ΠΎΠΉ свСтоотдачСй ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ приятным Ρ†Π²Π΅Ρ‚ΠΎΠ²Ρ‹ΠΌ спСктром излучСния. Π’ ассортимСнтС любого спСциализированного ΠΌΠ°Π³Π°Π·ΠΈΠ½Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΈΡ… Π»Π°ΠΌΠΏ прСдостаточно. Если Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Ρƒ ΠΏΠΎ Π΄ΡƒΡˆΠ΅ свСтодиодная Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΈΠΊΠ°, Ρ‚ΠΎ спСциалисты ΡΠΎΠ²Π΅Ρ‚ΡƒΡŽΡ‚ Π±Ρ€Π°Ρ‚ΡŒ ΠΊ ΡƒΡ‡Π΅Ρ‚Ρƒ ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ ΠΈΡ… яркости. Π§Ρ‚ΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Ρ‚ΡŒ, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠ° Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ.

О Π»Π°ΠΌΠΏΠ°Ρ… с ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΡ„ΠΎΡ€Ρ‚ΠΎΠΌ

Для Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° такая Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΡΠ²Π»ΡΡŽΠ΅Ρ‚ΡΡ ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ, Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΠΎ стандартной Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, Π½ΠΎ ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ приятный Π±Π΅Π»Ρ‹ΠΉ свСтовой спСктр. Π’ Π²ΠΈΠ΄Π΅ Π³Π»Π°Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΡ… нСдостатка Ρ„ΠΈΠ³ΡƒΡ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ сниТСниС видимости ΠΏΡ€ΠΈ Π΄ΠΎΠΆΠ΄Π»ΠΈΠ²ΠΎΠΉ ΠΏΠΎΠ³ΠΎΠ΄Π΅. Π­Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ±ΡŠΡΡΠ½ΡΠ΅Ρ‚ΡΡ ΡΠΊΠ»ΠΎΠ½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ Π±Π΅Π»ΠΎΠ³ΠΎ свСта Π΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ большС Π±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ² ΠΎΡ‚ Π½Π°ΠΌΠΎΠΊΡˆΠΈΡ… повСрхностСй ΠΈ Π΄ΠΎΠΆΠ΄Π΅Π²Ρ‹Ρ… капСль Π² сравнСнии с ΠΆΠ΅Π»Ρ‚Ρ‹ΠΌ ΠΎΡ‚Ρ‚Π΅Π½ΠΊΠΎΠΌ.

Если ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΌΠΎΠΌΠ΅Π½Ρ‚, Ρ‚ΠΎ Π² числС Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ распространСнных Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ², ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΎΡ…ΠΎΡ‚Π½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΠΌΠΈ Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Π°ΠΌΠΈ, ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΡƒΠ²ΠΈΠ΄Π΅Ρ‚ΡŒ ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅:

  • Β«OSRAMΒ» ΠΈ Β«General ElectricΒ»;
  • «Маяк» ΠΈ Β«PhilipsΒ»;
  • Β«NarvaΒ», Β«IPFΒ» ΠΈ Β«HellaΒ».

Π­Ρ‚ΠΎ Π΅Ρ‰Π΅ Π½Π΅ вСсь Ρ€Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Ρ‡Π΅Π½ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€ΠΎΠ². Если ΠΏΠΎΠΈΠ½Ρ‚Π΅Ρ€Π΅ΡΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΡ€ΠΈΡ‚Π΅Ρ‚Π°ΠΌΠΈ производитСля Π°Π²Ρ‚ΠΎ, Ρ‚ΠΎ Π΅ΠΌΡƒ ΡΠΈΠΌΠΏΠ°Ρ‚ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ Β«OSRAM h5Β». Π­Ρ‚ΠΈ устройства ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‚ Π΄Π²Π° Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚Π° исполнСния:

  • Β«StandardΒ»;
  • Β«Light DayΒ».

ΠŸΠ΅Ρ€Π²Π°Ρ вСрсия ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΠΏΠΎΠ»Π½Ρ‹ΠΌ соотвСтствиСм Ρ€Π΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°ΠΌ Π·Π°ΠΊΠΎΠ½ΠΎΠ΄Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ…Π°Ρ€Π°ΠΊΡ‚Π΅Ρ€Π° Π² ΠΏΠ»Π°Π½Π΅ обСспСчСния бСзопасных условий примСнСния, Π² числС ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Ρ…: сила Ρ‚ΠΎΠΊΠ°, свСтотСнСвая Π³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ†Π°, ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‰Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ, гСомСтрия ΠΏΠΎΠ΄Π°Ρ‡ΠΈ ΠΏΡƒΡ‡ΠΊΠ° ΠΈ ΠΌΠΎΡ‰Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ.

Π’Ρ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΉ Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚ ΠΈΠΌΠ΅Π΅Ρ‚ Π²Ρ‹Π³ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ΅ ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ ΠΎΡ‚ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π² ΠΏΠ»Π°Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ рСсурса, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ уступаСт Π² мощности свСтового ΠΏΡƒΡ‡ΠΊΠ°. Однако, приобрСсти ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Ρ‹ это ΠΎΠ΄Π½ΠΎ, Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ Π·Π½Π°Ρ‚ΡŒ, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΡƒ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ своими Ρ€ΡƒΠΊΠ°ΠΌΠΈ.

Если трСбуСтся Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏ, Ρ‚ΠΎ Π΅Π΅ ΠΎΡΡƒΡ‰Π΅ΡΡ‚Π²Π»ΡΡŽΡ‚ ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΌ простым ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠΌ.

ΠžΡ‚Π²Π΅Ρ‡Π°Π΅ΠΌ Π½Π° вопрос, ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΡƒ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ своими силами.

  1. ΠžΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ ΠΊΠΎΠΌΡ„ΠΎΡ€Ρ‚Π½Ρ‹ΠΉ доступ ΠΊ ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌΡƒ устройству Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ (ΠΏΠΎ Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ) стороны. Π‘ этой Ρ†Π΅Π»ΡŒΡŽ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°Π΅ΠΌ корпус Ρ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚Π° Π²ΠΎΠ·Π΄ΡƒΡˆΠ½ΠΎΠ³ΠΎ впускного Ρ‚Ρ€Π°ΠΊΡ‚Π° с отсоСдинСниСм Π΄Π°Ρ‚Ρ‡ΠΈΠΊΠ°, Π΅Π³ΠΎ подводящих ΠΊΠ°Π±Π΅Π»Π΅ΠΉ ΠΈ ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΡƒΠ±ΠΊΠΎΠ².
  2. Π‘Π°ΠΌ корпус ΠΏΠΎΠ΄Π²Π΅Ρ€Π³Π°Π΅ΠΌ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΡƒΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΌΡƒ ΡΠΌΠ΅Ρ‰Π΅Π½ΠΈΡŽ Π²Π²Π΅Ρ€Ρ… ΠΈ Π½Π°Π»Π΅Π²ΠΎ.
  3. Для обСспСчСния доступа ΠΊ Ρ„Π°Ρ€Π΅ ΠΏΡ€Π°Π²ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΠΎΠΊΠ° Π°Π²Ρ‚ΠΎ трСбуСтся снятиС Π΄Π΅ΠΊΠΎΡ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠΉ ΠΊΡ€Ρ‹ΡˆΠΊΠΈ ΠΌΠΎΡ‚ΠΎΡ€Π°. Π—Π΄Π΅ΡΡŒ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ ΠΎΡ‚ΠΊΡ€ΡƒΡ‡ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ масло-Π·Π°Π»ΠΈΠ²Π½ΡƒΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΊΡƒ, Π·Π°Ρ‚Π΅ΠΌ ΠΎΡ‚Π²ΠΈΠ½Ρ‡ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ 4 ΠΊΡ€Π΅ΠΏΠ΅ΠΆΠ½Ρ‹Ρ… ΡƒΠ·Π»Π° ΠΈ тянСм ΠΊΡ€Ρ‹ΡˆΠΊΡƒ (ΠΎΡ‚Ρ‰Π΅Π»ΠΊΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ).
  4. Π˜Π·Π²Π»Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΡ‚Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π²ΡˆΠ΅ΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π”Π₯О ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΏΠΎΠ²ΠΎΡ€ΠΎΡ‚ ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΠΎΠ½Π° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² часовой стрСлки, послС Ρ‡Π΅Π³ΠΎ Π΅Π³ΠΎ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅ΠΊΠ°Π΅ΠΌ ΠΈΠ· посадочного Π³Π½Π΅Π·Π΄Π°. Π’Ρ‹Π½ΡƒΠ² ΡΡ‚Π°Ρ€ΡƒΡŽ Π»Π°ΠΌΠΏΡƒ, ΠΌΠΎΠ½Ρ‚ΠΈΡ€ΡƒΠ΅ΠΌ Π½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ элСмСнт Π² ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΠΎΠ½Π½Ρ‹ΠΉ ΠΏΠ°Π·. Π’Π΅ΠΏΠ΅Ρ€ΡŒ Π·Π°ΠΊΡ€ΡƒΡ‡ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ сам ΠΏΠ°Ρ‚Ρ€ΠΎΠ½ Π² Π±Π»ΠΎΠΊ.

Π’Π½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠ΅! Π‘ΠΌΠ΅Π½Π° Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… устройств Π½Π΅ Β«Ρ‚Π΅Ρ€ΠΏΠΈΡ‚Β» касания ΠΏΠ°Π»ΡŒΡ†Π°ΠΌΠΈ ΠΊ повСрхности ΠΈΡ… ΠΊΠΎΠ»Π±.

Π­Ρ‚ΠΎ связано с риском оставлСния ΠΎΡ‚ΠΏΠ΅Ρ‡Π°Ρ‚ΠΊΠΎΠ² ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎΡ‚ΠΎΠΆΠΈΡ€ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»Π΅Π½ΠΈΠΉ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π½Π΅Π³Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎ сказываСтся Π½Π° рСсурсС ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Π°. Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡƒΠ΅ΠΌ Π² Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Ρ…Π»ΠΎΠΏΡ‡Π°Ρ‚ΠΎΠ±ΡƒΠΌΠ°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΠ΅Ρ€Ρ‡Π°Ρ‚ΠΊΠ°ΠΌΠΈ, Π½Π΅ ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ Ρ€Π΅Π·ΠΈΠ½ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ напылСния Π½Π° Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‡ΠΈΡ… Π·ΠΎΠ½Π°Ρ…. ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π΄ ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΆΠΎΠΌ Π»Π°ΠΌΠΏ Π½Π° LADA Granta ΠΈΡ… ΠΊΠΎΠ»Π±Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΡ€Π°ΠΉΡ‚Π΅ спиртосодСрТащими салфСтками. ИмСнно Ρ‚Π°ΠΊ ΠΈ происходит Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ.

ΠšΠΎΠ²Ρ€ΠΈΠΊ Π² Π±Π°Π³Π°ΠΆΠ½ΠΈΠΊ Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π»ΠΈΡ„Ρ‚Π±Π΅ΠΊ

Π‘Ρ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ВСста ΠΈ Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° сравнСниС

Π”ΠΈΠΎΠ΄Π½Ρ‹Π΅ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Π΅ ΠΎΠ³Π½ΠΈ

ΠžΠ±ΠΎΠ·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ процСсс Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‹ Π»Π°ΠΌΠΏ Π½Π° Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π½Π΅ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ обладания Π²Π»Π°Π΄Π΅Π»ΡŒΡ†Π΅ΠΌ свСрх β€” способностСй, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ сопряТСн с Π½Π΅ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΌΠΈ Π½Π΅Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ нюансами.

  1. Π—Π°ΠΌΠ΅Π½Π° Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° свСтодиодныС Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΈ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ своС Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ Π² ΠΎΠ±Π΅ΠΈΡ… Ρ„Π°Ρ€Π°Ρ….
  2. ΠŸΡ€ΠΈ ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΆΠ΅ свСтодиодных устройств трСбуСтся ΠΎΠ±ΡΠ·Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ соблюдСниС полярности ΠΈΡ… ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ.

Π’Π½ΠΈΠΌΠ°Π½ΠΈΠ΅! Если Π½Π΅ ΡƒΡ‡Π΅ΡΡ‚ΡŒ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ обСспСчСния полярности, Ρ‚ΠΎ это ΠΏΡ€ΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ ΠΊ ΠΌΠ³Π½ΠΎΠ²Π΅Π½Π½ΠΎΠΌΡƒ Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄Ρƒ ΠΈΠ· строя самого ΠΎΡΠ²Π΅Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ устройства. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, Π² Π·ΠΎΠ½Ρƒ риска ΠΏΠΎΠΏΠ°Π΄Π°Π΅Ρ‚ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΎΡ…Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒ, Π·Π°Ρ‰ΠΈΡ‰Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΉ Ρ†Π΅ΠΏΡŒ Π”Π₯О.

К ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Ρ€ΠΊΠ΅ полярности ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° LADA Granta слСдуСт ΠΏΡ€ΠΈΠ²Π»Π΅ΠΊΠ°Ρ‚ΡŒ тСстСр с Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ Π² Π½Π΅ΠΌ Ρ€Π΅ΠΆΠΈΠΌΠΎΠΌ Π²ΠΎΠ»ΡŒΡ‚ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π°. ΠŸΠ΅Ρ€Π΅Π΄ ΠΈΠ·Π²Π»Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΎΡ‚Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Π»Π°ΠΌΠΏ Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Π΅ΠΌ Π”Π₯О. Когда ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΊΡ‚Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΈΠ΅ΠΌΠ½ΠΈΠΊΠΎΠ² ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°ΡŽΡ‚ напряТСниС, ΠΊ ΠΈΡ… повСрхности подносим Ρ‰ΡƒΠΏΡ‹ Π²ΠΎΠ»ΡŒΡ‚ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π° (красный с Ρ‡Π΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΌ). Π‘ΠΌΠΎΡ‚Ρ€ΠΈΠΌ Π½Π° показания ΠΈ, Ссли ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌ ΠΎΡ‚Ρ€ΠΈΡ†Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅, Ρ‚ΠΎ это ΡΠ²ΠΈΠ΄Π΅Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΡ‚Π²ΡƒΠ΅Ρ‚ ΠΎ Π½Π°Ρ€ΡƒΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΈ порядка (полярности) ΠΏΠΎΠ΄ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½ΠΈΡ. Π¦ΠΈΡ„Ρ€ΠΎΠ²ΠΎΠΉ тСстСр Π² Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠΌ случаС Π²Ρ‹Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ Π½Π° экран «минус», Π° Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ – «загоняСт» стрСлку Π½ΠΈΠΆΠ΅ «нуля».

ΠžΡΠΎΠ±Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΆΠ° свСтодиодных Π”Π₯О

Если Π½Π΅ ΡƒΠ΄Π°Π»ΠΎΡΡŒ ΠΎΡ‚Ρ‹ΡΠΊΠ°Ρ‚ΡŒ устройства для Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π±Π΅Π· Ρ†ΠΎΠΊΠΎΠ»Π΅ΠΉ, Ρ‚ΠΎ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΎΡΡ‚Π°Π½ΠΎΠ²ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ Π½Π° ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΈ ΠΎΠ±Ρ‹Ρ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΈΠ·Π΄Π΅Π»ΠΈΠΉ. Π—Π΄Π΅ΡΡŒ понадобится собствСнноручноС ΡƒΠ΄Π°Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ цоколя, Π° Π΅Π³ΠΎ освободившиСся ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΊΡ‚Ρ‹ трСбуСтся ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΠ½ΡΡ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ΄ ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°ΠΆΠ½Ρ‹Π΅ отвСрстия.

ПослС Π·Π°Π²Π΅Ρ€ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π΄ΡƒΡ€Ρ‹ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Ρ‹ Π½Π΅ слСдуСт Π²Ρ‹Π±Ρ€Π°ΡΡ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒ. Π­Ρ‚ΠΎ ΠΎΠ±ΡŠΡΡΠ½ΡΠ΅Ρ‚ΡΡ ΠΏΠΎΡ‚Ρ€Π΅Π±Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ соблюдСния Ρ€Π΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°, Ρ€Π΅Π³ΡƒΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ Π½ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎ-тСхничСскиС трСбования ΠΊ аспСктам Π΄Π½Π΅Π²Π½ΠΎΠ³ΠΎ освСщСния, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ посСщСниС Ρ‚Π΅Ρ…-Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°. Если этим ΠΏΡ€Π΅Π½Π΅Π±Ρ€Π΅Ρ‡ΡŒ, Ρ‚ΠΎ Π²ΠΎΠ·ΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ риск запрСщСния эксплуатации автомобиля с Π΄ΠΎΡ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ свСтотСхникой ΠΏΡ€ΠΈ ΠΎΡ‡Π΅Ρ€Π΅Π΄Π½ΠΎΠΌ тСхосмотрС.

БСгодня рыночная ΡΠ΅Ρ‚ΡŒ способна ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»ΠΎΠΆΠΈΡ‚ΡŒ массу свСтодиодных устройств для LADA Granta, ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹ΠΌ спСктром освСщСния. Однако Ρ€Π΅Π³Π»Π°ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹Π΅ Π½ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ говорят ΠΎ допустимости Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ Π±Π΅Π»ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΆΠ΅Π»Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ ΠΎΡ‚Ρ‚Π΅Π½ΠΊΠ° для Π”Π₯О, Π° ΠΎΡΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π°Π»ΡŒΡ‚Π΅Ρ€Π½Π°Ρ‚ΠΈΠ²Ρ‹ Π·Π°ΠΏΡ€Π΅Ρ‰Π΅Π½Ρ‹.

ΠŸΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Ρ‹ Π½Π° свСтодиодной Ρ‚Π΅Ρ…Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΠΈ, Π² Ρ‚ΠΎΠΌ числС ΠΈ Π»Π°ΠΌΠΏΡ‹ Π”Π₯О ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡Π°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΎΡ‚ Π³Π°Π»ΠΎΠ³Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… ΡΡ€Π°Π²Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ мСньшим ΠΏΠΎΡ‚Ρ€Π΅Π±Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ энСргии. Π­Ρ‚ΠΎ ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΡ‚ Π² дальнСйшСм ΡΠ½ΠΈΠ·ΠΈΡ‚ΡŒ ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π΅Π½ΡŒ Π½Π°Π³Ρ€ΡƒΠ·ΠΊΠΈ Π½Π° ΠΠšΠ‘. Π—Π°Π±Ρ‹Π² ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΆΠ΄Ρ‹ Π΄Π΅Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π”Π₯О Π½Π° Π½ΠΎΡ‡ΡŒ, Π²Ρ‹ всС Ρ€Π°Π²Π½ΠΎ ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚Π΅ риск разрядки аккумулятора.

ΠšΠΎΠ½ΡΡ‚Ρ€ΡƒΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ΅ устройство систСмы освСщСния Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΏΠΎΠ»Π°Π³Π°Π΅Ρ‚ присутствиС Π² схСмС Ρ€Π΅Π»Π΅, нСсущСго ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π·Π° обСспСчСниС Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»Π° Π”Π₯О. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ этого, Π΄Π°Π½Π½ΠΎΠ΅ устройство обСспСчиваСт ΠΏΠΎΠ΄Π°Ρ‡Ρƒ питания ΠΊ стоп-сигналам ΠΈ ΠΈΠ½ΠΆΠ΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€Ρƒ. Π’Π²ΠΈΠ΄Ρƒ сниТСнного энСргопотрСблСния свСтодиодных устройств Π½Π° Π°Π²Ρ‚ΠΎ LADA Granta, Ρ€Π΅Π»Π΅ способно Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π½Π΅ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚Π½Ρ‹Π΅ показания, сСтуя Π½Π° Π½Π΅ΠΈΡΠΏΡ€Π°Π²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π”Π₯О. ΠŸΡ€ΠΈ Ρ‚Π°ΠΊΠΎΠΉ ΠΊΠ°Ρ€Ρ‚ΠΈΠ½Π΅ Π»Π°ΠΌΠΏΠ° Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ Π½Π° Β«ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€ΠΊΠ΅Β» Π±ΡƒΠ΄Π΅Ρ‚ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ с Π½Π°Π΄ΠΎΠ΅Π΄Π»ΠΈΠ²ΠΎΠΉ частотой, Π° встроСнный диагностичСский комплСкс ΠΈΠ·Π΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ Π·Π²ΡƒΠΊΠΎΠ²Ρ‹Π΅ сигналы. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π»ΠΈΠΊΠ²ΠΈΠ΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡƒ, потрСбуСтся Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π° стандартной ΠΏΠ°Π½Π΅Π»ΠΈ Π½Π° экспортный Π°Π½Π°Π»ΠΎΠ³, устанавливаСмый Π² СвропСйскиС вСрсии Π›Π°Π΄Π° Π“Ρ€Π°Π½Ρ‚Π°. А ΠΊΠ°ΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Π½ΡΡ‚ΡŒ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΡ‡ΠΊΡƒ Ρ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΎΠ³Π½Π΅ΠΉ ΠΌΡ‹ описали Π²Ρ‹ΡˆΠ΅.

ΠŸΠ΅Ρ‚Π»Π΅Π²Π°Ρ изотСрмичСская амплификация (LAMP) — ΠΎΠ±Π·ΠΎΡ€ ΠΈ классификация ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΡ„ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ обнаруТСния

Π’ Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ послСдних 20 Π»Π΅Ρ‚ изотСрмичСскиС тСсты Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠΈ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… кислот ΠΏΡ€Π΅Π²Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠ»ΠΈΡΡŒ Π² Π²Π°ΠΆΠ½Ρ‹ΠΉ диагностичСский инструмСнт Π½Π΅ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ для клиничСских ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ, Π½ΠΎ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ для контроля качСства ΠΏΠΈΡ‰Π΅Π²Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚ΠΎΠ² ΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΠΈΡ‚ΠΎΡ€ΠΈΠ½Π³Π° ΠΎΠΊΡ€ΡƒΠΆΠ°ΡŽΡ‰Π΅ΠΉ срСды. ΠŸΠ΅Ρ‚Π»Π΅Π²Π°Ρ изотСрмичСская амплификация (LAMP) Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠΎ извСстна своСй Π½Π°Π΄Π΅ΠΆΠ½ΠΎΠΉ, Π²Ρ‹ΡΠΎΠΊΠΎΡ‡ΡƒΠ²ΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ ΠΈ спСцифичСской Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ Π”ΠΠš, которая достигаСтся Π·Π° счСт использования Π΄ΠΎ ΡˆΠ΅ΡΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠ².ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, LAMP выдСляСтся своими изотСрмичСскими ΠΈ энСргоэффСктивными трСбованиями ΠΊ ΡƒΡΠΈΠ»Π΅Π½ΠΈΡŽ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π΄Π΅Π»Π°Π΅Ρ‚ Π΅Π³ΠΎ Π³Π»Π°Π²Π½Ρ‹ΠΌ ΠΊΠ°Π½Π΄ΠΈΠ΄Π°Ρ‚ΠΎΠΌ для Π½Π΅Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ³ΠΎΠΉ диагностики ΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π² случаС нСобходимости. Π’ послСднСС врСмя ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹ обнаруТСния, спСцифичныС для ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Π»ΠΈ большСС Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΏΠΎΡΠΊΠΎΠ»ΡŒΠΊΡƒ, Π² ΠΎΡ‚Π»ΠΈΡ‡ΠΈΠ΅ ΠΎΡ‚ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ² обнаруТСния, Π½Π΅ зависящих ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, ΠΎΠ½ΠΈ ΠΎΠ±Π»Π°Π΄Π°ΡŽΡ‚ высокой ΡΠΏΠ΅Ρ†ΠΈΡ„ΠΈΡ‡Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΏΠΎ ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ ΠΊ Ρ†Π΅Π»Π΅Π²ΠΎΠΉ Π”ΠΠš. Π—Π° послСдниС 13 Π»Π΅Ρ‚ появилось мноТСство ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ², зависящих ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, основанных Π½Π° ΠΎΡ‡Π΅Π½ΡŒ Ρ€Π°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Ρ… ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°Ρ… зондирования, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Ρ оптичСскоС, ΠΌΠ°Π³Π½ΠΈΡ‚Π½ΠΎΠ΅, ΠΏΡŒΠ΅Π·ΠΎΡΠ»Π΅ΠΊΡ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΎΠ΅, элСктрохимичСскоС ΠΈ магниторСзистивноС Π·ΠΎΠ½Π΄ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅.Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π΄Π°Ρ‚ΡŒ структуру Ρ€Π°Π·Π½ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Π½ΠΎΠΌΡƒ мноТСству ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ², спСцифичных для ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, ΠΌΡ‹ создали ΡΠΈΡΡ‚Π΅ΠΌΠ°Ρ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ ΠΊΠ»Π°ΡΡΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΈ прСдоставили ΠΊΡ€ΠΈΡ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ ΡΡ€Π°Π²Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΡƒ Π² соотвСтствии с ΠΊΠ°Ρ‚Π°Π»ΠΎΠ³ΠΎΠΌ ΠΊΡ€ΠΈΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ΅Π² (аналитичСскиС характСристики, ΠΌΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΠΏΠ»Π΅ΠΊΡΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅, количСствСнная ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠ° ΠΈ ΠΈΠ½ΡΡ‚Ρ€ΡƒΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ трСбования). ΠžΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π° основС флуорСсцСнции, ΡΠΎΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‰Π΅Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½Ρƒ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ², ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ Π½Π° ΠΎΡ‚ΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚Ρ‹Ρ… ΠΏΠ»Π°Ρ‚Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ… ΠΈ удовлСтворяСт всСм критСриям, пСрСчислСнным Ρ€Π°Π½Π΅Π΅. АппаратныС трСбования ΠΎΠ±ΡΡƒΠΆΠ΄Π°ΡŽΡ‚ΡΡ с Ρ‚ΠΎΡ‡ΠΊΠΈ зрСния слоТности, портативности ΠΈ Тидкостных ΠΊΠ°Ρ€Ρ‚Ρ€ΠΈΠ΄ΠΆΠ΅ΠΉ.ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, оцСниваСтся ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π΅Π½ΡŒ тСхнологичСской готовности ΠΈ Ρ‚ΠΈΠΏ ΠΏΠ»Π°Ρ‚Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ (открытая ΠΏΠΎ ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с , адаптированная ΠΊ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡ€Π΅Ρ‚Π½Ρ‹ΠΌ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°ΠΌ), ΠΏΡ€ΠΈΡ‡Π΅ΠΌ послСдняя ΠΈΠ³Ρ€Π°Π΅Ρ‚ Π²Π°ΠΆΠ½ΡƒΡŽ Ρ€ΠΎΠ»ΡŒ Π² ΠΌΠΈΠ½ΠΈΠ°Ρ‚ΡŽΡ€ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈ Π°Π²Ρ‚ΠΎΠΌΠ°Ρ‚ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ этапов ΠΎΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ процСсса. ΠœΡ‹ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ наблюдаСм рост использования встроСнных Π² смартфоны Π΄Π°Ρ‚Ρ‡ΠΈΠΊΠΎΠ² для ΡƒΠ»ΡƒΡ‡ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ тСстирования Ρ‚ΠΎΡ‡Π΅ΠΊ нСобходимости Π½Π° основС LAMP. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, послСдниС Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠΈ Π² ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Π°Ρ… ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ обнаруТСния LAMP Π΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡ‚Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ высокий ΠΏΠΎΡ‚Π΅Π½Ρ†ΠΈΠ°Π» для ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΈΡ… Π±ΡƒΠ΄ΡƒΡ‰ΠΈΡ… ΠΏΡ€ΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ.

Новый ратиомСтричСский Π·ΠΎΠ½Π΄ Π½Π° основС FRET для флуорСсцСнтного ΠΈ колоримСтричСского Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π°Π΄Π΅Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ½-5′-трифосфата

Π’ этой ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠ΅ сообщаСтся ΠΎ Π½ΠΎΠ²ΠΎΠΌ ратиомСтричСском Π·ΠΎΠ½Π΄Π΅ для обнаруТСния Π°Π΄Π΅Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ½-5′-трифосфата (АВЀ), ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ основан Π½Π° ΠΈΠ½Π΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΉ связываниСм модуляции рСзонансного пСрСноса энСргии флуорСсцСнции (FRET) Π² сочСтании с ΠΌΠ΅Ρ…Π°Π½ΠΈΠ·ΠΌΠΎΠΌ восприятия Ρ‚ΡƒΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ, Π²Ρ‹Π·Π²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ (ACQ).Π’Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΎΠ² ΠΊΡƒΠΌΠ°Ρ€ΠΈΠ½Π° Π² качСствС Π΄ΠΎΠ½ΠΎΡ€ΠΎΠ² FRET Π² Π±ΠΎΠΊΠΎΠ²ΡƒΡŽ Ρ†Π΅ΠΏΡŒ ΠΏΠΎΠ»ΠΈΡ‚ΠΈΠΎΡ„Π΅Π½Π° (PT) Π² качСствС Π°ΠΊΡ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Π° FRET обСспСчиваСт ратиомСтричСский Π·ΠΎΠ½Π΄. ΠŸΡ€ΠΈ Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠΈ АВЀ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ комплСкса ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠΌΠ΅Ρ€ / АВЀ ΠΏΡ€ΠΈΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ ΠΊ ΠΊΠΎΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π½Ρ‹ΠΌ измСнСниям основной Ρ†Π΅ΠΏΠΈ Π Π’ ΠΎΡ‚ случайного ΠΊΠ»ΡƒΠ±ΠΊΠ° ΠΊ плоской ΠΊΠΎΠ½Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΈ Π°Π³Ρ€Π΅Π³Π°Ρ†ΠΈΠΈ. Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, ратиомСтричСскоС ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ АВЀ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ достигнуто Π·Π° счСт использования прСимущСств измСнСния ΡΠΏΠ΅ΠΊΡ‚Ρ€Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ пСрСкрытия для модуляции эффСктивности FRET ΠΎΡ‚ Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΎΠ² ΠΊΡƒΠΌΠ°Ρ€ΠΈΠ½Π° Π΄ΠΎ основной Ρ†Π΅ΠΏΠΈ Π Π’ Π΄ΠΎ ΠΈ послС добавлСния АВЀ Π² сочСтании с ACQ.Π—ΠΎΠ½Π΄ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π» Ρ‡Π΅Ρ‚ΠΊΠΎΠ΅ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ сигнала Π΄Π²ΠΎΠΉΠ½ΠΎΠΉ эмиссии Ρ‚ΠΈΠΏΠ° ΠΊΠ°Ρ‡Π΅Π»Π΅ΠΉ ΠΏΡ€ΠΈ связывании с ΡΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌ сродством ( K ΠΏΡ€ΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ = 3,12 Γ— 10 4 M -1 ) с АВЀ Π² Π²ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠΌ растворС, Ρ‚ΠΎΠ³Π΄Π° ΠΊΠ°ΠΊ для ADP, AMP ΠΈΠ»ΠΈ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½Ρ‹Ρ… Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΈΡ… Π°Π½ΠΈΠΎΠ½ΠΎΠ² явных ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠΉ эмиссии Π½Π΅ наблюдалось. Π—ΠΎΠ½Π΄ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΌΠΎΠΆΠ½ΠΎ ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ для обнаруТСния АВЀ Π½Π΅Π²ΠΎΠΎΡ€ΡƒΠΆΠ΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ Π³Π»Π°Π·ΠΎΠΌ ΠΈ ΠΌΠΎΠ½ΠΈΡ‚ΠΎΡ€ΠΈΠ½Π³Π° Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠ»ΠΈΠ·Π° АВЀ Π°ΠΏΠΈΡ€Π°Π·ΠΎΠΉ Π² Ρ€Π΅ΠΆΠΈΠΌΠ΅ Ρ€Π΅Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ Π² условиях физиологичСского pH.

Π£ вас Π΅ΡΡ‚ΡŒ доступ ΠΊ этой ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠ΅

ΠŸΠΎΠ΄ΠΎΠΆΠ΄ΠΈΡ‚Π΅, ΠΏΠΎΠΊΠ° ΠΌΡ‹ Π·Π°Π³Ρ€ΡƒΠ·ΠΈΠΌ ваш ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Π΅Π½Ρ‚… Π§Ρ‚ΠΎ-Ρ‚ΠΎ пошло Π½Π΅ Ρ‚Π°ΠΊ. ΠŸΠΎΠΏΡ€ΠΎΠ±ΡƒΠΉ Π΅Ρ‰Π΅ Ρ€Π°Π·?

ГосударствСнная субсидия Π½Π° Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠΈΠΉ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚ — 5337

ГосударствСнная ΠΏΡ€ΠΎΠ³Ρ€Π°ΠΌΠΌΠ° субсидий Π½Π° Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠΈΠΉ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚ (49 U.S.C. 5337) прСдоставляСт ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒ для ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚ΠΎΠ² ΠΏΠΎ тСхничСскому ΠΎΠ±ΡΠ»ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡŽ, Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΈ Ρ€Π΅Π°Π±ΠΈΠ»ΠΈΡ‚Π°Ρ†ΠΈΠΈ высокоинтСнсивных фиксированных ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΈ автобусных систСм, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‡ΡŒ транспортным агСнтствам ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Ρ‹ Π² Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠ΅ΠΌ состоянии. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, Π³Ρ€Π°Π½Ρ‚Ρ‹ SGR ΠΈΠΌΠ΅ΡŽΡ‚ ΠΏΡ€Π°Π²ΠΎ Π½Π° Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΡƒ ΠΈ Ρ€Π΅Π°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΏΠ»Π°Π½ΠΎΠ² управлСния Ρ‚Ρ€Π°Π½Π·ΠΈΡ‚Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ.

Π‘ΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Ρ‚Π΅Π»ΠΈ

ΠŸΡ€Π°Π²ΠΎΠΌΠΎΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Ρ‚Π΅Π»ΠΈ — это ΠΎΡ€Π³Π°Π½Ρ‹ государствСнной власти ΠΈ мСстного самоуправлСния Π² УЗА с фиксированными Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ ΠΈ систСмами высокоскоростного автобуса, ΠΎΠ±ΡΠ»ΡƒΠΆΠΈΠ²Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ Π΄ΠΎΡ…ΠΎΠ΄Ρ‹ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ сСми Π»Π΅Ρ‚.

ДопустимыС Π²ΠΈΠ΄Ρ‹ Π΄Π΅ΡΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ

State of Good Repair Grants БрСдства доступны для ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚ΠΎΠ², ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ содСрТат фиксированныС Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΠΈΠ»ΠΈ систСму автобуса высокой интСнсивности Π² состоянии Ρ…ΠΎΡ€ΠΎΡˆΠ΅Π³ΠΎ Ρ€Π΅ΠΌΠΎΠ½Ρ‚Π°, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Ρ ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚Ρ‹ ΠΏΠΎ Π·Π°ΠΌΠ΅Π½Π΅ ΠΈ Π²ΠΎΡΡΡ‚Π°Π½ΠΎΠ²Π»Π΅Π½ΠΈΡŽ:

  • ΠΏΠΎΠ΄Π²ΠΈΠΆΠ½ΠΎΠΉ состав
  • Ρ‚Ρ€Π΅ΠΊ
  • Π»ΠΈΠ½Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ конструкции
  • сигналы ΠΈ связь
  • энСргСтичСскоС ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ подстанции
  • пассаТирских Π²ΠΎΠΊΠ·Π°Π»ΠΎΠ² ΠΈ Ρ‚Π΅Ρ€ΠΌΠΈΠ½Π°Π»ΠΎΠ²
  • ΠΎΡ…Ρ€Π°Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ систСмы
  • тСхобслуТивания ΠΈ ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅
  • ΠΎΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎ-Π²ΡΠΏΠΎΠΌΠΎΠ³Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ оборудования, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Ρ ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π½ΠΎΠ΅ ΠΎΠ±ΠΎΡ€ΡƒΠ΄ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ³Ρ€Π°ΠΌΠΌΠ½ΠΎΠ΅ обСспСчСниС;

, Π° Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ Ρ€Π΅Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ ΠΏΠ»Π°Π½Ρ‹ управлСния транспортными Π°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ.

НормативныС ссылки

49 U.S.C. Π Π°Π·Π΄Π΅Π» 5337 / Π—Π°ΠΊΠΎΠ½ ΠΎ FAST Π Π°Π·Π΄Π΅Π» 3015

Π”ΠΎΡΡ‚ΡƒΠΏΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ срСдств

Π€ΠΎΠ½Π΄Ρ‹ доступны для исполнСния ΠΎΠ±ΡΠ·Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΡ‚Π² Π½Π° Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€Π΅ финансовых Π³ΠΎΠ΄Π°. Бюда Π²Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚ финансовый Π³ΠΎΠ΄, Π² ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠΌ сумма выдСляСтся ΠΈΠ»ΠΈ выдСляСтся, плюс Ρ‚Ρ€ΠΈ Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π³ΠΎΠ΄Π°.

РаспрСдСлСниС финансирования

РаспрСдСлСниС срСдств осущСствляСтся ΠΏΠΎ установлСнной Π·Π°ΠΊΠΎΠ½ΠΎΠΌ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒΠ»Π΅. БрСдства, выдСляСмыС UZA Π½Π° высокоинтСнсивныС систСмы фиксированных Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‰ΠΈΡ…, основаны Π½Π° Π΄ΠΎΡ…ΠΎΠ΄Π½Ρ‹Ρ… милях ΠΈ милях ΠΌΠ°Ρ€ΡˆΡ€ΡƒΡ‚Π°, сообщаСмых Π² ΠΠ°Ρ†ΠΈΠΎΠ½Π°Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ Π±Π°Π·Ρƒ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… Ρ‚Ρ€Π°Π½Π·ΠΈΡ‚Π½Ρ‹Ρ… ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π²ΠΎΠ·ΠΎΠΊ (NTD), ΠΈ Π½Π° Ρ‚ΠΎΠΌ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ UZA ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΠ»ΠΎ Π±Ρ‹ Π² Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΡƒΠ»Π΅ ΠΌΠΎΠ΄Π΅Ρ€Π½ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ фиксированных Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‰ΠΈΡ… ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΉ Π½Π° 2011 финансовый Π³ΠΎΠ΄ с использованиСм Ρ‚Π΅ΠΊΡƒΡ‰Π΅Π³ΠΎ опрСдСлСния фиксированных Π½Π°ΠΏΡ€Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‰ΠΈΡ…. .Π€ΠΎΠ½Π΄Ρ‹ для высокоинтСнсивных автобусов Π²Ρ‹Π΄Π΅Π»ΡΡŽΡ‚ΡΡ UZA Π½Π° основС миль Π΄ΠΎΡ…ΠΎΠ΄ΠΎΠ² ΠΈ миль ΠΌΠ°Ρ€ΡˆΡ€ΡƒΡ‚Π°, сообщаСмых NTD.

ΠœΠ°Ρ‚Ρ‡

Π€Π΅Π΄Π΅Ρ€Π°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ доля ΠΏΡ€ΠΈΠ΅ΠΌΠ»Π΅ΠΌΡ‹Ρ… ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π·Π°Ρ‚Ρ€Π°Ρ‚ составляСт 80 ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² ΠΎΡ‚ чистой стоимости ΠΊΠ°ΠΏΠΈΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΠ΅ΠΊΡ‚Π°, Ссли ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒ Π³Ρ€Π°Π½Ρ‚Π° Π½Π΅ Π·Π°ΠΏΡ€Π°ΡˆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΉ ΠΏΡ€ΠΎΡ†Π΅Π½Ρ‚.

Π Π°Π·Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π° Π³Ρ€Π°Π½Ρ‚: 49 U.S.C. 5337

ΠŸΡ€ΠΎΠΈΠ·ΠΎΡˆΠ»Π° ошибка ΠΏΡ€ΠΈ настройкС ΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΡΠΊΠΎΠ³ΠΎ Ρ„Π°ΠΉΠ»Π° cookie

Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ сайт ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie для ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ.Если ваш Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€ Π½Π΅ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π΅Ρ‚ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie, Π²Ρ‹ Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚Π΅ ΠΏΡ€ΠΎΡΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΠ²Π°Ρ‚ΡŒ этот сайт.


Настройка вашСго Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€Π° для ΠΏΡ€ΠΈΠ΅ΠΌΠ° Ρ„Π°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie

БущСствуСт мноТСство ΠΏΡ€ΠΈΡ‡ΠΈΠ½, ΠΏΠΎ ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΌ cookie Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π±Ρ‹Ρ‚ΡŒ установлСн ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎ. НиТС ΠΏΡ€ΠΈΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Ρ‹ Π½Π°ΠΈΠ±ΠΎΠ»Π΅Π΅ частыС ΠΏΡ€ΠΈΡ‡ΠΈΠ½Ρ‹:

  • Π’ вашСм Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€Π΅ ΠΎΡ‚ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½Ρ‹ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie. Π’Π°ΠΌ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠΌΠΎ ΡΠ±Ρ€ΠΎΡΠΈΡ‚ΡŒ настройки своСго Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€Π°, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΎΠ½ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Π» Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie, ΠΈΠ»ΠΈ Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΡΠΏΡ€ΠΎΡΠΈΡ‚ΡŒ, Ρ…ΠΎΡ‚ΠΈΡ‚Π΅ Π»ΠΈ Π²Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Ρ‚ΡŒ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie.
  • Π’Π°Ρˆ Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€ ΡΠΏΡ€Π°ΡˆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ вас, Ρ…ΠΎΡ‚ΠΈΡ‚Π΅ Π»ΠΈ Π²Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΠΈΠΌΠ°Ρ‚ΡŒ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie, ΠΈ Π²Ρ‹ ΠΎΡ‚ΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈΡΡŒ.Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΈΠ½ΡΡ‚ΡŒ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie с этого сайта, Π½Π°ΠΆΠΌΠΈΡ‚Π΅ ΠΊΠ½ΠΎΠΏΠΊΡƒ «Назад» ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠΈΡ‚Π΅ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie.
  • Π’Π°Ρˆ Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€ Π½Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠΈΠ²Π°Π΅Ρ‚ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie. Если Π²Ρ‹ ΠΏΠΎΠ΄ΠΎΠ·Ρ€Π΅Π²Π°Π΅Ρ‚Π΅ это, ΠΏΠΎΠΏΡ€ΠΎΠ±ΡƒΠΉΡ‚Π΅ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠΉ Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€.
  • Π”Π°Ρ‚Π° Π½Π° вашСм ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π΅ Π² ΠΏΡ€ΠΎΡˆΠ»ΠΎΠΌ. Если часы вашСго ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π° ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Ρ‹Π²Π°ΡŽΡ‚ Π΄Π°Ρ‚Ρƒ Π΄ΠΎ 1 января 1970 Π³., Π±Ρ€Π°ΡƒΠ·Π΅Ρ€ автоматичСски Π·Π°Π±ΡƒΠ΄Π΅Ρ‚ Ρ„Π°ΠΉΠ» cookie. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΈΡΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒ это, установитС ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΡŒΠ½ΠΎΠ΅ врСмя ΠΈ Π΄Π°Ρ‚Ρƒ Π½Π° своСм ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π΅.
  • Π’Ρ‹ установили ΠΏΡ€ΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ΅ отслСТиваСт ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π»ΠΎΠΊΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ установку Ρ„Π°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie.Π’Ρ‹ Π΄ΠΎΠ»ΠΆΠ½Ρ‹ ΠΎΡ‚ΠΊΠ»ΡŽΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΏΡ€ΠΈΠ»ΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡ€ΠΈ Π²Ρ…ΠΎΠ΄Π΅ Π² систСму ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΊΠΎΠ½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒΡΡ с систСмным администратором.

ΠŸΠΎΡ‡Π΅ΠΌΡƒ этому сайту Ρ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΡŽΡ‚ΡΡ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie?

Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ сайт ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΠ΅Ρ‚ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie для ΠΏΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ, запоминая, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Π²Ρ‹ вошли Π² систСму, ΠΊΠΎΠ³Π΄Π° ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΡ‚Π΅ со страницы Π½Π° страницу. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΠΎΡΡ‚Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒ доступ Π±Π΅Π· Ρ„Π°ΠΉΠ»ΠΎΠ² cookie ΠΏΠΎΡ‚Ρ€Π΅Π±ΡƒΠ΅Ρ‚, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ сайт создавал Π½ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ сСанс для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠΉ посСщаСмой страницы, Ρ‡Ρ‚ΠΎ замСдляСт Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Ρƒ систСмы Π΄ΠΎ Π½Π΅ΠΏΡ€ΠΈΠ΅ΠΌΠ»Π΅ΠΌΠΎΠ³ΠΎ уровня.


Π§Ρ‚ΠΎ сохраняСтся Π² Ρ„Π°ΠΉΠ»Π΅ cookie?

Π­Ρ‚ΠΎΡ‚ сайт Π½Π΅ Ρ…Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‚ Π½ΠΈΡ‡Π΅Π³ΠΎ, ΠΊΡ€ΠΎΠΌΠ΅ автоматичСски сгСнСрированного ΠΈΠ΄Π΅Π½Ρ‚ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ‚ΠΎΡ€Π° сСанса Π² cookie; никакая другая информация Π½Π΅ фиксируСтся.

Как ΠΏΡ€Π°Π²ΠΈΠ»ΠΎ, Π² Ρ„Π°ΠΉΠ»Π°Ρ… cookie ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Ρ…Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‚ΡŒΡΡ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ информация, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€ΡƒΡŽ Π²Ρ‹ прСдоставляСтС, ΠΈΠ»ΠΈ Π²Ρ‹Π±ΠΎΡ€, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ Π²Ρ‹ Π΄Π΅Π»Π°Π΅Ρ‚Π΅ ΠΏΡ€ΠΈ посСщСнии Π²Π΅Π±-сайта. НапримСр, сайт Π½Π΅ ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ ΠΎΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»ΠΈΡ‚ΡŒ вашС имя элСктронной ΠΏΠΎΡ‡Ρ‚Ρ‹, ΠΏΠΎΠΊΠ° Π²Ρ‹ Π½Π΅ Π²Π²Π΅Π΄Π΅Ρ‚Π΅ Π΅Π³ΠΎ. Π Π°Π·Ρ€Π΅ΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ Π²Π΅Π±-сайту ΡΠΎΠ·Π΄Π°Π²Π°Ρ‚ΡŒ Ρ„Π°ΠΉΠ»Ρ‹ cookie Π½Π΅ Π΄Π°Π΅Ρ‚ этому ΠΈΠ»ΠΈ Π»ΡŽΠ±ΠΎΠΌΡƒ Π΄Ρ€ΡƒΠ³ΠΎΠΌΡƒ сайту доступа ΠΊ ΠΎΡΡ‚Π°Π»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ части вашСго ΠΊΠΎΠΌΠΏΡŒΡŽΡ‚Π΅Ρ€Π°, ΠΈ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ сайт, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹ΠΉ создал Ρ„Π°ΠΉΠ» cookie, ΠΌΠΎΠΆΠ΅Ρ‚ Π΅Π³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ‡ΠΈΡ‚Π°Ρ‚ΡŒ.

Анализ

LAMP для обнаруТСния РНК SARS-CoV-2 с использованиСм колоримСтричСского считывания Π½Π° основС поглощСния

ΠœΠ°Ρ‚Π΅Ρ€ΠΈΠ°Π»Ρ‹ ΠΈ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄Ρ‹

ΠœΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΈΠΊΠ° экспСримСнта
FLUOstar Omega ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π½Π°Π³Ρ€Π΅Π²Π°Π»ΠΈ Π΄ΠΎ 65 Β° C Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 2.Π—Π° 5 Ρ‡ Π΄ΠΎ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠΈ LAMP-Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π°. Поз. ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒ, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ Π² Π½Π°Π±ΠΎΡ€ для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP (n-Π³Π΅Π½), Ρ€Π°Π·Π²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ 1:10 Π² Π²ΠΎΠ΄Π΅, свободной ΠΎΡ‚ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·, Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ 100000 ΠΊΠΎΠΏΠΈΠΉ / ΠΌΠΊΠ». ΠšΠΎΠ»ΠΎΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΈΠ΅ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΈ LAMP ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Π² ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ‡Π½ΠΎΠΌ Ρ€Π΅Π°ΠΊΡ†ΠΈΠΎΠ½Π½ΠΎΠΌ объСмС 5 ΠΌΠΊΠ» (см. 4). ΠšΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠΎΠ½Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠ² Π½Π°Π±ΠΎΡ€Π° для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP использовали Π² соотвСтствии с инструкциями производитСля. Основная смСсь, ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€Ρ‹, Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΡ…Π»ΠΎΡ€ΠΈΠ΄ Π³ΡƒΠ°Π½ΠΈΠ΄ΠΈΠ½Π°, Π²ΠΎΠ΄Π°, Π½Π΅ содСрТащая Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅Π°Π·, ΠΈ ΠΌΠ°Ρ‚Ρ€ΠΈΡ†Π° Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΡΠΌΠ΅ΡˆΠ°Π½Ρ‹, пСрСнСсСны Π² Ρ‡Π΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΉ 384-Π»ΡƒΠ½ΠΎΡ‡Π½Ρ‹ΠΉ ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚ ΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 1 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ 400 g.ΠžΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Ρ‹ для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP измСряли Π² Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€Π΅Ρ… повторностях. ΠžΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Ρ‹ распрСдСляли ΠΏΠΎ пластинС. ΠŸΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Ρ‹ Π³Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π³Π΅Ρ€ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΈΠΊΠ° для количСствСнной ПЦР, Π° Π·Π°Ρ‚Π΅ΠΌ считывали Π½Π° FLUOstar Omega, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡ ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ настройки, врСмя Ρ†ΠΈΠΊΠ»Π° считывания ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Π° основано Π½Π° ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΠΌ 384-Π»ΡƒΠ½ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΌ ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Π΅:

Настройки ΠΏΡ€ΠΈΠ±ΠΎΡ€Π°

306 9013 для встряхивания с Π΄ΠΎ Ρ†ΠΈΠΊΠ»Π° 1, 6 ΠΈ 11
ΠŸΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Ρ‹ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΊΠΈ ΠŸΠΎΠ³Π»ΠΎΡ‰Π΅Π½ΠΈΠ΅, кинСтичСский Ρ€Π΅ΠΆΠΈΠΌ пластины
Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΡ‚Ρ€ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ 415 Π½ΠΌ
560 Π½ΠΌ
ΠžΠ±Ρ‰ΠΈΠ΅ настройки (самыС быстрыС)

9014 9013 ВрСмя установки
0.0 с
ΠšΠΈΠ½Π΅Ρ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΠΈΠ΅ настройки ΠšΠΎΠ»ΠΈΡ‡Π΅ΡΡ‚Π²ΠΎ Ρ†ΠΈΠΊΠ»ΠΎΠ² 27
ВрСмя Ρ†ΠΈΠΊΠ»Π° 133 с
Π˜Π½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΡ 65 Β° C

Анализ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Ρ…
Π Π°Π·Π½ΠΈΡ†Ρƒ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ оптичСской ΠΏΠ»ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ ΠΏΡ€ΠΈ 415 Π½ΠΌ ΠΈ 560 Π½ΠΌ (βˆ†OD) использовали для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Ρ‡ΡƒΠ²ΡΡ‚Π²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΊ pH измСнСния Ρ†Π²Π΅Ρ‚Π° Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½ΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠΈ 2 .ВрСмя Π΄ΠΎ максимума ΠΊΡ€ΡƒΡ‚ΠΈΠ·Π½Ρ‹ для ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΊΡ€ΠΈΠ²Ρ‹Ρ… сигнала Π±Ρ‹Π»ΠΎ рассчитано, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π°Ρ‚ΡŒ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠΆΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ сигналы. ΠΈ ΠΎΡ‚Ρ€ΠΈΡ†Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ (ΠΎΡ‚Ρ€ΠΈΡ†Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅) ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΠΈ Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ³Ρ€Π°ΠΌΠΌΠ΅ FLUOstar Omega MARS.

Π Π΅Π·ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Π°Ρ‚Ρ‹ ΠΈ обсуТдСниС

Для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ Π°ΠΌΠΏΠ»ΠΈΡ„ΠΈΠΊΠ°Ρ†ΠΈΠΈ Π½ΡƒΠΊΠ»Π΅ΠΈΠ½ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… кислот βˆ†OD ΠΏΠΎΠ·. ΠΈ Π½Π΅Π³. ΠšΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒ Π·Π° ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½ΠΎΠΉ Π³Ρ€ΡƒΠΏΠΏΠΎΠΉ проводился Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 60 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ (рис. 2). БущСствСнноС ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ βˆ†OD наблюдалось для ΠΏΠΎΠ·. ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Ρ€Π½ΠΎ Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· 18 ΠΌΠΈΠ½ послС Π½Π°Ρ‡Π°Π»Π° Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° LAMP. Π­Ρ‚ΠΎ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ βˆ†OD Π² ΠΏΠΎΠ·.ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒ происходил ΡΡ€Π°Π²Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π² ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… Π»ΡƒΠ½ΠΊΠ°Ρ…-Ρ€Π΅ΠΏΠ»ΠΈΠΊΠ°Ρ‚ΠΎΡ€Π°Ρ… ΠΈ тСстовых ΠΏΡ€ΠΎΠ³ΠΎΠ½Π°Ρ…. НСг. элСмСнты управлСния Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΈ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ βˆ†OD, ΠΎΠ΄Π½Π°ΠΊΠΎ это ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·ΠΎΡˆΠ»ΠΎ ΠΏΠΎΠ·ΠΆΠ΅ ΠΈ ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»ΠΎ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΈΠΉ Π½Π°ΠΊΠ»ΠΎΠ½ ΠΈ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ Π²Ρ‹ΡΠΎΠΊΡƒΡŽ Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΏΠΎ скваТинам.

Π¦Π΅Π»ΠΎΡΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π»ΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½Ρ‹Ρ… наноноситСлСй Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠ΅ ΠΈ ΠΎΠΏΡƒΡ…ΠΎΠ»ΠΈ количСствСнно ΠΎΡ†Π΅Π½Π΅Π½Π° с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ратиомСтричСской FRET-Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ Π² Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅ΠΌ инфракрасном Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ Ρƒ ΠΆΠΈΠ²Ρ‹Ρ… ΠΌΡ‹ΡˆΠ΅ΠΉ

Π Π΅Ρ„Π΅Ρ€Π°Ρ‚

Π›ΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½Ρ‹Π΅ наноноситСли ΡΡ‡ΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎΠΎΠ±Π΅Ρ‰Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ ΠΊΠ°Π½Π΄ΠΈΠ΄Π°Ρ‚Π°ΠΌΠΈ для доставки лСкарств ΠΈ Π±ΠΎΡ€ΡŒΠ±Ρ‹ с Ρ€Π°ΠΊΠΎΠΌ ΠΈΠ·-Π·Π° ΠΈΡ… Π½ΠΈΠ·ΠΊΠΎΠΉ токсичности, биоразлагаСмости ΠΈ способности ΠΈΠ½ΠΊΠ°ΠΏΡΡƒΠ»ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ лСкарства ΠΈ / ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€Π°ΡΡ‚ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ Π°Π³Π΅Π½Ρ‚Ρ‹.Однако ΠΈΡ… биомСдицинскоС ΠΏΡ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² настоящСС врСмя ΠΎΠ³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΎ ΠΈΠ·-Π·Π° ΠΏΠ»ΠΎΡ…ΠΎΠ³ΠΎ понимания ΠΈΡ… цСлостности in vivo . Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Ρ€Π΅ΡˆΠΈΡ‚ΡŒ эту ΠΏΡ€ΠΎΠ±Π»Π΅ΠΌΡƒ, ΠΌΡ‹ сообщаСм ΠΎ флуорСсцСнтных каплях Π½Π°Π½ΠΎΡΠΌΡƒΠ»ΡŒΡΠΈΠΈ Ρ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠΌ 100 Π½ΠΌ, ΠΈΠ½ΠΊΠ°ΠΏΡΡƒΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π»ΠΈΠΏΠΎΡ„ΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Ρ†ΠΈΠ°Π½ΠΈΠ½ΠΎΠ²Ρ‹Π΅ краситСли 5,5 ΠΈ 7,5 Π±Π»ΠΈΠΆΠ½Π΅Π³ΠΎ инфракрасного Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π° с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ объСмного Π³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΡ„ΠΎΠ±Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ²ΠΎΠΈΠΎΠ½Π° Ρ‚Π΅Ρ‚Ρ€Π°Ρ„Π΅Π½ΠΈΠ»Π±ΠΎΡ€Π°Ρ‚Π°. ΠŸΡ€Π΅Π²ΠΎΡΡ…ΠΎΠ΄Π½Π°Ρ ΡΡ€ΠΊΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈ эффСктивная ΠΏΠ΅Ρ€Π΅Π΄Π°Ρ‡Π° энСргии рСзонанса ЀёрстСра (FRET) Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈ Π»ΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½Ρ‹Ρ… НК ΠΏΠΎΠ·Π²ΠΎΠ»ΠΈΠ»ΠΈ Π²ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΊΠΎΠ»ΠΈΡ‡Π΅ΡΡ‚Π²Π΅Π½Π½ΡƒΡŽ Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ‚Π½ΡƒΡŽ Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΡŽ цСлостности НК нСпосрСдствСнно Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‰Π΅Π½ΠΈΠΈ, ΠΏΠ΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈ ΠΈ ксСнотрансплантатах ΠΎΠΏΡƒΡ…ΠΎΠ»ΠΈ ΠΆΠΈΠ²Ρ‹Ρ… ΠΌΡ‹ΡˆΠ΅ΠΉ с использованиСм установки Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ всСго ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ.Π­Ρ‚Π° ΡƒΠ½ΠΈΠΊΠ°Π»ΡŒΠ½Π°Ρ мСтодология ΠΏΠΎΠΊΠ°Π·Π°Π»Π°, Ρ‡Ρ‚ΠΎ Ρ†Π΅Π»ΠΎΡΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π½Π°ΡˆΠΈΡ… FRET NC Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠΎΠ±Ρ€Π°Ρ‰Π΅Π½ΠΈΠΈ Π·Π΄ΠΎΡ€ΠΎΠ²Ρ‹Ρ… ΠΌΡ‹ΡˆΠ΅ΠΉ сохраняСтся Π½Π° ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ 93% Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· 6 часов послС ввСдСния, Π² Ρ‚ΠΎ врСмя ΠΊΠ°ΠΊ Π² ΠΏΠ΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈ ΠΎΠ½Π° сниТаСтся Π΄ΠΎ 66% (ΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΎΠ΄ полувывСдСния составляСт 8,2 часа). Π‘ΠΎΠ»Π΅Π΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, эти NC Π΄Π΅ΠΌΠΎΠ½ΡΡ‚Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ быстроС ΠΈ эффСктивноС Π½Π°ΠΊΠΎΠΏΠ»Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π² опухолях, ΠΊΡƒΠ΄Π° ΠΎΠ½ΠΈ входят Π² ΠΏΠΎΡ‡Ρ‚ΠΈ Π½Π΅ΠΏΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ Ρ„ΠΎΡ€ΠΌΠ΅ (77% цСлостности Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· 2 часа), ΠΏΡ€Π΅ΠΆΠ΄Π΅ Ρ‡Π΅ΠΌ Ρ‚Π΅Ρ€ΡΡŽΡ‚ свою Ρ†Π΅Π»ΠΎΡΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π΄ΠΎ 40% Ρ‡Π΅Ρ€Π΅Π· 6 часов (ΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΎΠ΄ полураспада составляСт 4,4 часа). Π’Π°ΠΊΠΈΠΌ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·ΠΎΠΌ, ΠΌΡ‹ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π»Π°Π³Π°Π΅ΠΌ ΠΏΡ€ΠΎΡΡ‚ΡƒΡŽ ΠΈ Π½Π°Π΄Π΅ΠΆΠ½ΡƒΡŽ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΎΠ³ΠΈΡŽ, ΠΎΡΠ½ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡƒΡŽ Π½Π° ратиомСтричСской Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠΈ FRET in vivo для количСствСнной ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ цСлостности наноноситСлСй Ρƒ ΠΌΠ΅Π»ΠΊΠΈΡ… ΠΆΠΈΠ²ΠΎΡ‚Π½Ρ‹Ρ….ΠœΡ‹ Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ дСмонстрируСм, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΊΠ°ΠΏΠ»ΠΈ Π½Π°Π½ΠΎΡΠΌΡƒΠ»ΡŒΡΠΈΠΈ ΠΏΡ€Π΅Π΄ΡΡ‚Π°Π²Π»ΡΡŽΡ‚ собой ΡƒΠ΄ΠΈΠ²ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΡΡ‚Π°Π±ΠΈΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π½Π°Π½ΠΎΠΎΠ±ΡŠΠ΅ΠΊΡ‚Ρ‹, ΠΊΠΎΡ‚ΠΎΡ€Ρ‹Π΅ ΠΎΡΡ‚Π°ΡŽΡ‚ΡΡ ΠΏΠΎΡ‡Ρ‚ΠΈ Π½Π΅ΠΏΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π² ΠΊΡ€ΠΎΠ²ΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠ΅ ΠΈ Π²Ρ‹ΡΠ²ΠΎΠ±ΠΎΠΆΠ΄Π°ΡŽΡ‚ своС содСрТимоС Π² основном послС попадания Π² ΠΎΠΏΡƒΡ…ΠΎΠ»ΠΈ.

ΠšΠ»ΡŽΡ‡Π΅Π²Ρ‹Π΅ слова

Π›ΠΈΠΏΠΈΠ΄Π½Ρ‹Π΅ наноноситСли

In vivo визуализация

Π‘Π»ΠΈΠΆΠ½ΠΈΠΉ инфракрасный Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ FRET

Π¦Π΅Π»ΠΎΡΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ наноноситСлСй

ΠŸΠΎΠ²Ρ‹ΡˆΠ΅Π½Π½Π°Ρ ΠΏΡ€ΠΎΠ½ΠΈΡ†Π°Π΅ΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ ΠΈ ΡƒΠ΄Π΅Ρ€ΠΆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅

ΠžΠΏΡƒΡ…ΠΎΠ»ΡŒ

Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Π΅ ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠΈ Π¦ΠΈΡ‚ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠΈ (0) 2016

Авторы.ΠžΠΏΡƒΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½ΠΎ Elsevier BV

Π Π΅ΠΊΠΎΠΌΠ΅Π½Π΄ΡƒΠ΅ΠΌΡ‹Π΅ ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠΈ

Π¦ΠΈΡ‚ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΡΡ‚Π°Ρ‚ΡŒΠΈ

Π‘Π»ΠΈΡ‚Ρ‹Π΅ Π±Π΅Π»ΠΊΠΈ GPCR-G, связанныС с ER / K, систСматичСски ΠΌΠΎΠ΄ΡƒΠ»ΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠ³ΠΎ мСссСндТСра Π² ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠ°Ρ…

Π Π΅Π°Π³Π΅Π½Ρ‚Ρ‹ ΠΈ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Ρ‹

Π€ΠΈΠ±Ρ€ΠΎΠ½Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ½, натриСвая соль Π³ΡƒΠ°Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ½-5′-дифосфата (GDP), 3-ΠΈΠ·ΠΎΠ±ΡƒΡ‚ΠΈΠ»-1-мСтилксантин (IBMX), (-) — ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ» (+) — битартратная соль, форсколин ΠΈ Ρ‚Π°Ρ€Ρ‚Ρ€Π°Ρ‚ ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΎΠΏΡ€ΠΎΠ»ΠΎΠ»Π° Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‹ Ρƒ Sigma-Aldrich. Π“Π΅ΠΌΠΈΡΡƒΠ»ΡŒΡ„Π°Ρ‚ ΡΠ°Π»ΡŒΠ±ΡƒΡ‚Π°ΠΌΠΎΠ»Π° Π±Ρ‹Π» ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π΅Π½ Ρƒ Tocris. n -Π΄ΠΎΠ΄Π΅Ρ†ΠΈΠ»-Ξ²-D-ΠΌΠ°Π»ΡŒΡ‚ΠΎΠΏΠΈΡ€Π°Π½ΠΎΠ·ΠΈΠ΄, Anagrade (DDM) Π±Ρ‹Π» ΠΊΡƒΠΏΠ»Π΅Π½ Ρƒ Anatrace.АнтитСло ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² GΞ² (SC378) ΠΈ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² НА (MMS-101p) Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‹ Ρƒ Santa Cruz Biotechnology ΠΈ Covance соотвСтствСнно. ΠΊΠ”ΠΠš для ΠΈΠ·ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ 3 Ξ±1 A -AR ( Homo sapiens ) ΠΈ Ξ±2 A -AR ( Sus scrofa ) Π±Ρ‹Π»ΠΈ Π»ΡŽΠ±Π΅Π·Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Π°Ρ€ΠΊΠ°ΠΌΠΈ ΠΎΡ‚ Π΄ΠΎΠΊΡ‚ΠΎΡ€Π° Π ΠΈΡ‡Π°Ρ€Π΄Π° Нойбига. ΠΊΠ”ΠΠš для чСловСчСского Ξ²2-AR, Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚Π° сплайсинга GΞ±s, GΞ±i 2 ΠΈΠ·ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΌΡ‹ 1 ΠΈ GΞ±q Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‹ Ρƒ GE (Open Biosystems). Π§Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊ A 1 R Π±Ρ‹Π» ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π΅Π½ ΠΈΠ· рСпозитория ΠΏΠ»Π°Π·ΠΌΠΈΠ΄ DNASU. Π Π΅Π°Π³Π΅Π½Ρ‚Ρ‹ для трансфСкции Π”ΠΠš X-tremeGENE HP ΠΈ Π”ΠΠš Mirus-LT Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈΠΎΠ±Ρ€Π΅Ρ‚Π΅Π½Ρ‹ Ρƒ ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°Π½ΠΈΠΉ Roche ΠΈ Mirus соотвСтствСнно.Π‘ΡƒΡ„Π΅Ρ€ A прСдставляСт собой 20 мМ HEPES, 5 мМ KCl, 145 мМ NaCl, 2 мМ CaCl 2 , 1 мМ MgCl 2 , 0,2% дСкстрозы (мас. / Об.), 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° ΠΈ 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ». -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ pH 7,45. Π‘ΡƒΡ„Π΅Ρ€ B прСдставляСт собой 20 мМ HEPES, 0,5 мМ EDTA, 5 мМ MgCl 2 , 0,1 мМ DTT, 10 мкМ GDP, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ½Π°, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ½Π° ΠΈ 50 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1. Ρ„Π΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅Ρ‚Π°Π½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„ΠΎΠ½ΠΈΠ»Ρ„Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠ΄ (PMSF) ΠΏΡ€ΠΈ pH 7,4. Π‘ΡƒΡ„Π΅Ρ€ C прСдставляСт собой 20 мМ HEPES, 0,5% ΠΌΠΎΠ½ΠΎΠ΄ΠΎΠ΄Π΅Ρ†ΠΈΠ»ΠΎΠ²Ρ‹ΠΉ эфир дСкаэтилСнгликоля (C 12 E 10 ), 100 мМ NaCl, 1 мМ MgCl 2 10 мкМ GDP, 5.5 мМ Ξ²-мСркаптоэтанол, 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 PMSF ΠΏΡ€ΠΈ pH 8,0. Π‘ΡƒΡ„Π΅Ρ€ D прСдставляСт собой Π·Π°Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ фосфатом физиологичСский раствор (PBS pH 7,4; Gibco TM ), 800 мкМ аскорбиновой кислоты ΠΈ 0,2% дСкстрозы (мас. / Об.).

ΠœΠΎΠ»Π΅ΠΊΡƒΠ»ΡΡ€Π½ΠΎΠ΅ ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅

ПЦР-ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ‚Ρ‹ для Ξ±1 A -AR (ΠΈΠ·ΠΎΡ„ΠΎΡ€ΠΌΠ° 3), Ξ²2-AR, A 1 R, Π΄Π»ΠΈΠ½Π½Ρ‹ΠΉ Π²Π°Ρ€ΠΈΠ°Π½Ρ‚ сплайсинга GΞ±s, GΞ±i 2 ΠΈ GΞ±q Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ ΠΈΠ· ΠΊΠ”ΠΠš Ρ‡Π΅Π»ΠΎΠ²Π΅ΠΊΠ°. Для экспрСссии HEK293 Ρƒ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… всС конструкции GPCR ΠΈ GΞ± ΠΊΠ»ΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π²Π΅ΠΊΡ‚ΠΎΡ€ PCDNA5 / FRT. Для клонирования Π΄Π°Ρ‚Ρ‡ΠΈΠΊΠΎΠ² GPCR Π±Ρ‹Π»Π° Ρ€Π°Π·Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π° ΠΌΠΎΠ΄ΡƒΠ»ΡŒΠ½Π°Ρ схСма.ΠšΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ сСнсор Π±Π΅Π»ΠΊΠ° GPCR-G содСрТал ΠΎΡ‚ N- Π΄ΠΎ Π‘-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π°: ΠΏΠΎΠ»Π½ΠΎΡ€Π°Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΉ GPCR, mCitrine (Π°ΠΊΡ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€ FRET), Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€ ER / K 10, 20 ΠΈΠ»ΠΈ 30 Π½ΠΌ, mCerulean (Π΄ΠΎΠ½ΠΎΡ€ FRET) ΠΈ ΡΡƒΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Ρƒ GΞ±. Π›ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€ (Gly-Ser-Gly) 4 вставляли ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ всСми Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π°ΠΌΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° ΠΊΠ°ΠΊ Ρ‡Π°ΡΡ‚ΡŒ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ ΠΏΡ€Π°ΠΉΠΌΠ΅Ρ€Π°, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΎΠ±Π΅ΡΠΏΠ΅Ρ‡ΠΈΡ‚ΡŒ свободноС Π²Ρ€Π°Ρ‰Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ Π΄ΠΎΠΌΠ΅Π½Π°ΠΌΠΈ. ΠšΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π΄Π°Ρ‚Ρ‡ΠΈΠΊΠΈ GPCR (-) Π½Π΅ содСрТали ΡΡƒΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Ρƒ GΞ± послС mCerulean, Π° вмСсто этого ΠΈΠΌΠ΅Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€ΡΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ΡΡ (Gly-Ser-Gly) 4 остатков. ВсС Ξ²2-AR-сСнсоры Ρ‚Π°ΠΊΠΆΠ΅ содСрТали Π»ΠΈΠ±ΠΎ N-ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π²ΡƒΡŽ HA-ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΊΡƒ, Π»ΠΈΠ±ΠΎ His-ΠΌΠ΅Ρ‚ΠΊΡƒ.ВсС конструкции Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ΄Ρ‚Π²Π΅Ρ€ΠΆΠ΄Π΅Π½Ρ‹ сСквСнированиСм. ΠŸΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ΄Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΠΈ для Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€ΠΎΠ² ER / K 10, 20 ΠΈ 30 нМ Π±Ρ‹Π»ΠΈ описаны Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ 14 . Π’ΠΊΡ€Π°Ρ‚Ρ†Π΅, Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€ ER / K 10 Π½ΠΌ происходит ΠΈΠ· Π±Π΅Π»ΠΊΠ° Myosin VI Sus scrofa со ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΉ аминокислотной ΠΏΠΎΡΠ»Π΅Π΄ΠΎΠ²Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒΡŽ: EEEEKKKQQEEEAERLRRIQEEMEKERKRREEDEQRRRKEEEERRMKLEMEAKRKQEEEERKKREDDEKRKKK. 30 Π½ΠΌ Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€ являСтся ΠΏΡ€ΠΎΠΈΠ·Π²ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ΠΌ ΠΎΡ‚ Kelch-ΠΌΠΎΡ‚ΠΈΠ² Π±Π΅Π»ΠΊΠ° сСмСйства ( Ρ‚Ρ€ΠΈΡ…ΠΎΠΌΠΎΠ½Π°Π΄ ): EEEEKKKEEEEKKQKEEQERLAKEEAERKQKEEQERLAKEEAERKQKEEEERKQKEEEERKQKEEEERKLKEEQERKAAEEKKAKEEAERKAKEEQERKAEEERKKKEEEERLERERKEREEQEKKAKEEAERIAKLEAEKKAEEERKAKEEEERKAKEEEERKKKEEQERLAKEKEEAERKAAEEKKAKEEQERKEKEEAERK.Π›ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€ ER / K 20 Π½ΠΌ содСрТит ΠΏΠ΅Ρ€Π²Ρ‹Π΅ 130 остатков Π»ΠΈΠ½ΠΊΠ΅Ρ€Π° ER / K 30 Π½ΠΌ, использованного Π² этом исслСдовании.

ΠŸΠΎΠ΄Π³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΌΠ»Π΅ΠΊΠΎΠΏΠΈΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… ΠΈ экспрСссия сСнсора

ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ HEK293T-Flp-In (HEK293T, Invitrogen) ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² срСдС DMEM с Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 10% FBS (ΠΎΠ±. / Об.), 4,5 Π³ Π». -1 D-Π³Π»ΡŽΠΊΠΎΠ·Ρ‹, 1% глутамакса. , 20 мМ HEPES, pH 7,5 ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C Π² ΡƒΠ²Π»Π°ΠΆΠ½Π΅Π½Π½ΠΎΠΉ атмосфСрС ΠΏΡ€ΠΈ 5% CO 2 . ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ HEK293T ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‰Π°Π»ΠΈ Π² 6-Π»ΡƒΠ½ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Ρ‹, ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΡƒΡ€ΠΎΠΉ Ρ‚ΠΊΠ°Π½ΠΈ, ΠΏΡ€ΠΈ ~ 30% ΠΊΠΎΠ½Ρ„Π»ΡŽΡΠ½Ρ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ. Π§Π΅Ρ€Π΅Π· 16–20 Ρ‡ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ трансфицировали Ρ€Π΅Π°Π³Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠΌ для трансфСкции Π”ΠΠš X-tremeGENE HP.Условия трансфСкции, Π²ΠΊΠ»ΡŽΡ‡Π°Ρ количСство Π”ΠΠš (1,4–4 ΠΌΠΊΠ³ Π”ΠΠš + 4,2–6 ΠΌΠΊΠ» Ρ€Π΅Π°Π³Π΅Π½Ρ‚Π°) ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΠΎΠ»ΠΆΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎΡΡ‚ΡŒ трансфСкции (ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ Π΄Π°Ρ‚Ρ‡ΠΈΠΊΠΈ: 18–24 Ρ‡; GΞ±-Π΄Π°Ρ‚Ρ‡ΠΈΠΊΠΈ: 22–32 часа), Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΠΌΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ для постоянного получСния эквивалСнтных ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ сСнсора Π² Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹Ρ… условиях. Для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ†ΠΈΠΈ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° GPCR-G 100 Π½Π³, 300 Π½Π³ ΠΈΠ»ΠΈ 1 ΠΌΠΊΠ³ Ρ‚Π΅ΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ GΞ±x Π±Ρ‹Π»ΠΈ котрансфицированы 2 ΠΈΠ»ΠΈ 4 ΠΌΠΊΠ³ ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… сСнсоров. Для всСх экспСримСнтов Ρ†Π΅Π»ΠΎΡΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ сСнсора, локализация ΠΈ экспрСссия сСнсора Π½Π° ΠΎΠΏΡ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ ΠΏΠ»ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ (О.) ΠΎΡ‚ΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π»ΠΈΡΡŒ для обСспСчСния согласованности. ЭкспСримСнты ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡŒ ΠΏΡ€ΠΈ эффСктивности трансфСкции 60–80%, ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΠΎΠΉ ΠΏΡ€ΠΈ 20- ΠΈ 40-ΠΊΡ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΌ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΈ Π½Π° микроскопС для ΠΊΡƒΠ»ΡŒΡ‚ΠΈΠ²ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΡ Ρ‚ΠΊΠ°Π½Π΅ΠΉ Nikon с Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠ΅ΠΉ дСтСктирования флуорСсцСнции. ΠšΡ€ΠΎΠΌΠ΅ Ρ‚ΠΎΠ³ΠΎ, Π²ΠΎ врСмя экспСримСнта 60–90% трансфицированных ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ экспрСссировали прСимущСствСнно сСнсор, Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ Π½Π° плазматичСской ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Π΅, с минимальной Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ Π²ΠΎ Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€ΠΈΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Ρ… ΠΊΠΎΠΌΠΏΠ°Ρ€Ρ‚ΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Ρ…. ΠšΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ экспСримСнт проводился ΠΏΡ€ΠΈ эквивалСнтном Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΈ сСнсора ΠΈ ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΌ O.D. суспСнзии ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡ ΡΠ»Π΅Π΄ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ шаги.Π‘Π½Π°Ρ‡Π°Π»Π° ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ рСсуспСндировали остороТным ΠΏΠΈΠΏΠ΅Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ Π² ΠΈΡΡ…ΠΎΠ΄Π½ΡƒΡŽ срСду. Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (300 Π³, 3 ΠΌΠΈΠ½) ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ Ρ€Π°Π· ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ А. Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ рСсуспСндировали Π² ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰Π΅ΠΌ объСмС Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° А Π΄ΠΎ достиТСния ОП 0,3. ( 600 Π½ΠΌ , спСктрофотомСтр BioMate 3 S, Thermo Scientific, Π΄Π»ΠΈΠ½Π° ΠΏΡƒΡ‚ΠΈ 3 ΠΌΠΌ, оптичСская стСклянная ΠΊΡŽΠ²Π΅Ρ‚Π°) для всСх ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΈΠΉ Π½Π° основС флуорСсцСнции. НаконСц, ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡŽ сСнсора измСряли ΠΏΠΎ флуорСсцСнции mCitrine. ЀлуорСсцСнция ΠΌΠ¦ΠΈΡ‚Ρ€ΠΈΠ½Π° Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠ°Π»Π°ΡΡŒ Π² ΠΏΡ€Π΅Π΄Π΅Π»Π°Ρ… 1.6–2,4 Γ— 10 6 отсчСтов Π² сСкунду (c.p.s) для внСшнСго Π΄ΠΈΠ°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π° ячСйки. 0,3. Для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ экспСримСнта Ρ†Π΅Π»ΠΎΡΡ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ сСнсора ΠΎΡ‚ΡΠ»Π΅ΠΆΠΈΠ²Π°Π»Π°ΡΡŒ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ измСрСния ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ mCitrine (Π²ΠΎΠ·Π±ΡƒΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ 490, полоса пропускания 8 Π½ΠΌ; Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ излучСния 500–600, полоса пропускания 4 Π½ΠΌ; максимум эмиссии 525 Π½ΠΌ) ΠΊ ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡŽ флуорСсцСнции mCerulean (Π²ΠΎΠ·Π±ΡƒΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ 430, полоса пропускания 8 Π½ΠΌ; Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½ излучСния 450-600 полоса пропускания). 4 Π½ΠΌ; максимум излучСния 475 Π½ΠΌ). Π’ Ρ€Π°ΠΌΠΊΠ°Ρ… конструкции сСнсора mCitrine ΠΈ mCerulean ΠΌΠ°Ρ€ΠΊΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‚ C-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† GPCR ΠΈ N-ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ† ΡΡƒΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Ρ‹ GΞ± соотвСтствСнно. ВсС экспСримСнты ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡŒ ΠΏΡ€ΠΈ ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΈ флуорСсцСнции mCitrine ΠΈ mCerulean, Ρ€Π°Π²Π½ΠΎΠΌ 1.7–2.1.

ΠœΠΈΠΊΡ€ΠΎΡΠΊΠΎΠΏΠΈΡ ΠΆΠΈΠ²Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΈ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ΠΈΠ·ΠΎΠ±Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ

ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ HEK293T высСвали (~ 15–20% ΠΊΠΎΠ½Ρ„Π»ΡŽΡΠ½Ρ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ) Π½Π° Ρ‡Π°ΡˆΠΊΠΈ со стСклянным Π΄Π½ΠΎΠΌ 35 ΠΌΠΌ (MatTek Corp), ΠΏΠΎΠΊΡ€Ρ‹Ρ‚Ρ‹Π΅ 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» Ρ„ΠΈΠ±Ρ€ΠΎΠ½Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ½Π° -1 . Π§Π΅Ρ€Π΅Π· 14–16 часов послС посСва (30–40% ΠΊΠΎΠ½Ρ„Π»ΡŽΡΠ½Ρ‚Π½ΠΎΡΡ‚ΠΈ) ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ трансфицировали Ρ€Π΅Π°Π³Π΅Π½Ρ‚ΠΎΠΌ для трансфСкции Π”ΠΠš Mirus-LT ΠΈΠ»ΠΈ XtremeGENE HP. Π§Π΅Ρ€Π΅Π· 16–22 Ρ‡ послС трансфСкции ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ Ρ‚Ρ€ΠΈΠΆΠ΄Ρ‹ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ A (37 Β° C) для удалСния ΠΈΠ·Π±Ρ‹Ρ‚ΠΊΠ° Ρ„Π΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΎΠ³ΠΎ красного ΠΈΠ· срСды. Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½Π΅ Π±ΠΎΠ»Π΅Π΅ 30 ΠΌΠΈΠ½ Π² срСдС с Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ А.Π˜Π·ΠΎΠ±Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 60-ΠΊΡ€Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΌ ΡƒΠ²Π΅Π»ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΈΠΈ с использованиСм микроскопа Nikon TiE, оснащСнного Ρ€Ρ‚ΡƒΡ‚Π½ΠΎΠΉ Π΄ΡƒΠ³ΠΎΠ²ΠΎΠΉ Π»Π°ΠΌΠΏΠΎΠΉ, масляными ΠΎΠ±ΡŠΠ΅ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π°ΠΌΠΈ Plan-Apo с числовой Π°ΠΏΠ΅Ρ€Ρ‚ΡƒΡ€ΠΎΠΉ 60x ΠΈ 100×1,4 ΠΈ ΠΊΠ°ΠΌΠ΅Ρ€ΠΎΠΉ Evolve 512×512 EM-Charge-Coupled-Device (Photometrics). Π˜Π·ΠΎΠ±Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Z-стСка Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ с шагом 1 ΠΌΠΊΠΌ, ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ стСк ΠΈΠ·ΠΎΠ±Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΠΉ Π±Ρ‹Π» Π΄Π΅ΠΊΠΎΠ½Π²ΠΎΠ»ΡŽΡ†ΠΈΠΎΠ½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ³Ρ€Π°ΠΌΠΌΠ½ΠΎΠ³ΠΎ обСспСчСния AutoQuantX. ЭкспрСссия ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ Π½Π° изобраТСниях Π±Ρ‹Π»Π° ΠΏΡ€ΠΎΠ°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π° Π² ImageJ (NIH) с использованиСм инструмСнтов ΠΏΠΎΡ€ΠΎΠ³Π° ΠΈ измСрСния для Π²Ρ‹Π±ΠΎΡ€Π° ΠΈ количСствСнной ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ экспрСссии ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ ΠΏΠΎ ΡΡ€Π°Π²Π½Π΅Π½ΠΈΡŽ с Π²Π½ΡƒΡ‚Ρ€Π΅Π½Π½Π΅ΠΉ Π»ΠΎΠΊΠ°Π»ΠΈΠ·Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ.(Π”ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ рис. 1).

Π˜Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΈΡ флуорСсцСнции

Π˜ΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡ Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€ FluoroMax-4 (Horiba Scientific), спСктры FRET Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ возбуТдСния ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΏΡ€ΠΈ 430 Π½ΠΌ (полоса пропускания 8 Π½ΠΌ) Π² оптичСской стСклянной ΠΊΡŽΠ²Π΅Ρ‚Π΅ (3–3.30-SOG-3, Starna Cells Inc.) . Эмиссия ΡΠΊΠ°Π½ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»Π°ΡΡŒ Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ 450–600 Π½ΠΌ (полоса пропускания 4 Π½ΠΌ). Для ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΈΠΉ Ρ‚ΠΎΠ»ΡŒΠΊΠΎ mCitrine ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π²Ρ‹Ρ…ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π° Π΄Π»ΠΈΠ½Π΅ Π²ΠΎΠ»Π½Ρ‹ 490 Π½ΠΌ (полоса пропускания 8 Π½ΠΌ), Π° эмиссия Ρ€Π΅Π³ΠΈΡΡ‚Ρ€ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»Π°ΡΡŒ Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ 500-600 Π½ΠΌ (полоса пропускания 4 Π½ΠΌ), максимум эмиссии Π±Ρ‹Π» установлСн Π½Π° 525 Π½ΠΌ.

РасчСт FRET ΠΆΠΈΠ²Ρ‹Ρ… ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ

Π˜Π·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΈΡ FRET ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡŒ Π½Π° ΡΠΎΠ²ΠΏΠ°Π΄Π°ΡŽΡ‰ΠΈΡ… O.D. Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ A. НСтрансфицированныС ΠΈ трансфицированныС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ рСсуспСндировали Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ A ΠΏΡ€ΠΈ 0,3 O.D. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΡΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ рассСяниС, спСктр излучСния FRET нСтрансфицированной ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ суспСнзии ΠΏΡ€ΠΈ эквивалСнтном O.D. Π²Ρ‹Ρ‡ΠΈΡ‚Π°Π»ΠΈ ΠΈΠ· FRET-спСктра трансфицированной ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΉ суспСнзии. Π‘ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ эмиссионныС спСктры FRET Π±Ρ‹Π»ΠΈ Π½ΠΎΡ€ΠΌΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Ρ‹ Π½Π° эмиссию mCerulean (475 Π½ΠΌ). Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ рассчитывали ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ FRET ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ дСлСния эмиссии mCitrine (525 Π½ΠΌ) Π½Π° эмиссию mCerulean (475 Π½ΠΌ).

Ξ”FRET экспСримСнты

Π–ΠΈΠ²Ρ‹Π΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ξ”FRET экспСримСнты ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊ описано Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ 21 .Π’ΠΊΡ€Π°Ρ‚Ρ†Π΅, ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π»ΠΈ ΠΈ ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π½ΠΎ суспСндировали Π² ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ Π½Π°Π³Ρ€Π΅Ρ‚ΠΎΠΌ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ А. Аликвоты ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΏΠΎ 90 ΠΌΠΊΠ» добавляли Π² ΠΏΡ€ΠΎΠ±ΠΈΡ€ΠΊΠΈ Π­ΠΏΠΏΠ΅Π½Π΄ΠΎΡ€Ρ„Π°, ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‰Π΅Π½Π½Ρ‹Π΅ Π½Π° Π²ΠΎΠ΄ΡΠ½ΡƒΡŽ баню ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C. ΠžΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Ρ‹ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°Π»ΠΈ 10 ΠΌΠΊΠ» ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° ΠΈΠ»ΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 1, 5 ΠΈΠ»ΠΈ 10 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C. ΠžΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ ΠΈ чистыС ΠΊΡŽΠ²Π΅Ρ‚Ρ‹ использовались для сбора спСктров FRET для ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΈ Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†ΠΎΠ² для прСдотвращСния пСрСкрСстного загрязнСния. ИзмСнСниС FRET (Ξ”FRET) рассчитывали ΠΊΠ°ΠΊ FRET Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄ — FRET Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ .

ΠžΠ±Ρ€Π°Ρ‚ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ агонист-ΠΈΠ½Π΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ξ”FRET

ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π»ΠΈ, ΠΊΠ°ΠΊ описано Π² Ρ€Π°Π·Π΄Π΅Π»Π΅ ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²ΠΊΠΈ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ.Π‘Π½Π°Ρ‡Π°Π»Π° измСряли ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ FRET Π±Π΅Π· ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠΈ. НСобработанныС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (600 Π³, 1 ΠΌΠΈΠ½), Ρ‚Ρ€ΠΈΠΆΠ΄Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ ΠΈ рСсуспСндировали Π² 400 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° А. Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΡ‚Ρ€Ρ‹ FRET собирали сСрийно для Π°Π»ΠΈΠΊΠ²ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎ 90 ΠΌΠΊΠ». Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ Π»ΡƒΠ½ΠΊΡƒ собирали Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ A с Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 мкМ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π°. Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (600 Π³, 1 ΠΌΠΈΠ½) ΠΈ Ρ‚Ρ€ΠΈΠΆΠ΄Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ 400 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° A с Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 мкМ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π°. Π­Ρ‚Π°ΠΏΡ‹ ΠΎΡ‚ΠΆΠΈΠΌΠ° ΠΈ стирки Π±Ρ‹Π»ΠΈ Π·Π°Π²Π΅Ρ€ΡˆΠ΅Π½Ρ‹ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 5 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚. Ξ”FRET рассчитывали ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ вычитания Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET ΠΈΠ· ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π² условиях, ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ.Для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ обратимости ΠΈΠ½Π΄ΡƒΡ†ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚Π° Ξ”FRET ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ A с Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 мкМ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π° Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ Π½Π° водяной Π±Π°Π½Π΅ ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C. ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (600 Π³, 1 ΠΌΠΈΠ½), ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ Ρ‚Ρ€ΠΈ Ρ€Π°Π·Π° ΠΈ рСсуспСндировали Π² 400 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° A. Π‘ΠΏΠ΅ΠΊΡ‚Ρ€Ρ‹ FRET собирали сСрийно для Π°Π»ΠΈΠΊΠ²ΠΎΡ‚ ΠΏΠΎ 90 ΠΌΠΊΠ». Ξ”FRET рассчитывали ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ вычитания Π½Π΅ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Ρ… ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET ΠΈΠ· ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΉ FRET, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½Π½Ρ‹Ρ… Π² условиях вымывания ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π°. mCitrine: О.Π”. ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΏΠΎΠ΄Π΄Π΅Ρ€ΠΆΠΈΠ²Π°Π»ΠΎΡΡŒ постоянным Π²ΠΎ всСх условиях, Ρ‡Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ Π³Π°Ρ€Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Ρ‚ΡŒ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ΅ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΈΠ΅ FRET ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΎΡΡŒ ΠΏΡ€ΠΈ постоянных уровнях экспрСссии сСнсора ΠΏΡ€ΠΈ фиксированной плотности ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ.

ΠŸΠΎΠ΄Π³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²ΠΊΠ° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹

24 ΠΈΠ»ΠΈ 48 Ρ‡ послС трансфСкции (XtremeGene HP) ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ HEK293T, ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ сСнсоры, собирали ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ Ρ€Π°Π· Ρ…ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ΠΌ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ PBS, содСрТащим 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° ΠΈ 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ½Π°. ΠŸΡ€ΠΈ нСобходимости этапы выполняли Π½Π° Π»ΡŒΠ΄Ρƒ ΠΈ / ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C. ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ для гипотоничСского лизиса (20 мМ HEPES, 0,5 мМ EDTA, 0,1 мМ DTT, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ½Π°, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ½Π° ΠΈ 50 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Ρ„Π΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅Ρ‚Π°Π½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„ΠΎΠ½ΠΈΠ»Ρ„Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠ΄Π°, pH 7 .4) Π½Π° 5 ΠΌΠΈΠ½. ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΡˆΠΏΡ€ΠΈΡ†Π΅ΠΌ Π½Π° 1 ΠΌΠ» Π² ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΡ…Π»Π°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠΌ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π΅ (Isobiotec) с Π·Π°Π·ΠΎΡ€ΠΎΠΌ 8 ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠ½. Π›ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 500 g Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 5 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C. Π‘ΡƒΠΏΠ΅Ρ€Π½Π°Ρ‚Π°Π½Ρ‚Ρ‹, содСрТащиС ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹, Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 45000 ΠΎΠ± / ΠΌΠΈΠ½ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 45 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C. Осадки ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ 3 Ρ€Π°Π·Π° ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΡ…Π»Π°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ для суспСнзии, содСрТащим 20 мМ HEPES, 0,5 мМ EDTA, 5 мМ MgCl 2 , 0,1 мМ DTT, 3 мкМ GDP, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π°ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ½, 1,5 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1. Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ½ ΠΈ 50 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Ρ„Π΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅Ρ‚Π°Π½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„ΠΎΠ½ΠΈΠ»Ρ„Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠ΄ ΠΏΡ€ΠΈ pH 7.4. Для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² связывания Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ 3 Ρ€Π°Π·Π° Ρ…ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ΠΌ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ для рСсуспСндирования с Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 100 мМ NaCl. ΠœΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ рСсуспСндировали Π² 1 ΠΌΠ» ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΡ…Π»Π°ΠΆΠ΄Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π°, ΠΈΡΠΏΠΎΠ»ΡŒΠ·ΡƒΡ Π²Ρ€Π°Ρ‰Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΉΡΡ пСстик (Fisherbrand, 30 с). ΠœΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ снова Π²Ρ€Π°Ρ‰Π°Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 45000 ΠΎΠ± / ΠΌΠΈΠ½ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 45 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C. Осадки ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½ рСсуспСндировали Π² ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π°Ρ… для рСсуспСндирования с использованиСм Π³ΠΎΠΌΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΠ·Π°Ρ‚ΠΎΡ€Π° Даунса. ΠšΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΎΠ±Ρ‰Π΅Π³ΠΎ Π±Π΅Π»ΠΊΠ° (ΠΌΠ³ / ΠΌΠ» -1 ) рассчитывали с использованиСм Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Π±Π΅Π»ΠΊΠ° DC (Bio-Rad). ΠœΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ ΠΌΠ³Π½ΠΎΠ²Π΅Π½Π½ΠΎ Π·Π°ΠΌΠΎΡ€Π°ΠΆΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π² ΠΆΠΈΠ΄ΠΊΠΎΠΌ Π°Π·ΠΎΡ‚Π΅ ΠΈ Ρ…Ρ€Π°Π½ΠΈΠ»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ -80 Β° C.

ΠžΡ‡ΠΈΡΡ‚ΠΊΠ° сСнсора ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ HEK293

Для экспСримСнтов ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² GΞ² очистка Π±Π΅Π»ΠΊΠ° His tag-Ξ²2-AR-G ΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… (-) сСнсоров ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ HEK293T слСдовала Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ ΠΎΠΏΡƒΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΌΡƒ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠΎΠ»Ρƒ 16 . Π—Π°ΠΌΠΎΡ€ΠΎΠΆΠ΅Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ быстро ΠΎΡ‚Ρ‚Π°ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹ ΠΈ ΠΊΡ€Π°Ρ‚ΠΊΠΎΠ²Ρ€Π΅ΠΌΠ΅Π½Π½ΠΎ ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π½ΠΎ Π³ΠΎΠΌΠΎΠ³Π΅Π½ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π²Ρ€Π°Ρ‰Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΡΡ пСстиком. 5% Ρ…ΠΎΠ»Π°Ρ‚Π½Ρ‹ΠΉ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ (5% Ρ…ΠΎΠ»Π°Ρ‚ натрия Π² 50 мМ HEPES, 3 мМ MgCl 2 , 50 мМ NaCl с 1 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» Π°ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ½ΠΈΠ½Π° -1 , 1 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Π»Π΅ΠΉΠΏΠ΅ΠΏΡ‚ΠΈΠ½, 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ» -1 Ρ„Π΅Π½ΠΈΠ»ΠΌΠ΅Ρ‚Π°Π½ΡΡƒΠ»ΡŒΡ„ΠΎΠ½ΠΈΠ»Ρ„Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΠ΄ ΠΈ 5.Добавляли 5 мМ Ξ²-мСркаптоэтанол, pH 8,0) Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠ½Π΅Ρ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠΈ 1% Ρ…ΠΎΠ»Π°Ρ‚Π°. Π­Ρ‚Ρƒ смСсь ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π½Π° Π»ΡŒΠ΄Ρƒ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 45 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΈ раздСляли ΡƒΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π°Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½ΠΈΠ΅ΠΌ ΠΏΡ€ΠΈ ~ 105000 g Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 40 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C. Π‘ΡƒΠΏΠ΅Ρ€Π½Π°Ρ‚Π°Π½Ρ‚ собирали ΠΈ разбавляли ΠΏΠΎ каплям Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€ΡŒΠΌΡ объСмами Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° Π‘ Π΄ΠΎ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ объСма супСрнатанта ΠΈ остороТно ΠΏΠΈΠΏΠ΅Ρ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ для ΠΏΠ΅Ρ€Π΅ΠΌΠ΅ΡˆΠΈΠ²Π°Π½ΠΈΡ. Π Π°Π·Π±Π°Π²Π»Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΉ супСрнатант добавляли ΠΊ смолС никСль-NTA (Qiagen) ΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ 30 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C с Π²Ρ€Π°Ρ‰Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ. Π‘ΠΌΠΎΠ»Ρƒ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ 3 Ρ€Π°Π·Π° 500 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° C + 5 мМ ΠΈΠΌΠΈΠ΄Π°Π·ΠΎΠ»Π°.ПослСднюю ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²ΠΊΡƒ удаляли, смолу Π΄ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ Π΄ΠΎ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Ρ‹ ΠΈ ΡΠ»ΡŽΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 3-5 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ 150 ΠΌΠΊΠ» ΡΠ»ΡŽΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰Π΅Π³ΠΎ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° (Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ C + 200 мМ ΠΈΠΌΠΈΠ΄Π°Π·ΠΎΠ»). Π­Π»ΡŽΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΡƒΡŽ смолу Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ, супСрнатант собирали ΠΈ измСряли Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ†ΠΈΡŽ mCerulean ΠΈ mCitrine Π½Π° Ρ„Π»ΡƒΠΎΡ€ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π΅ (ΠΊΠ°ΠΊ описано Π²Ρ‹ΡˆΠ΅). ΠžΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Ρ‹ Ρ…Ρ€Π°Π½ΠΈΠ»ΠΈ Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ для ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†ΠΎΠ² SDS laemmli ΠΏΡ€ΠΈ -80 Β° C.

ВСстСрн-Π±Π»ΠΎΡ‚

Для вСстСрн-Π±Π»ΠΎΡ‚Ρ‚ΠΈΠ½Π³Π° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² НА 20 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½, содСрТащих сСнсор Ξ²2-AR-Gs, кипятили Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ B, Π΄ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½Π½ΠΎΠΌ Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€ΠΎΠΌ для дСнатурирования Π³Π»ΠΈΠΊΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅ΠΈΠ½Π° (NEB), ΠΏΡ€ΠΈ 95 Β° C Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 5 ΠΌΠΈΠ½.Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ кипячСныС ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Ρ‹ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°Π»ΠΈ 500 Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Π°ΠΌΠΈ PNGase F (NEB) Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ… часов ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C. Для Π°Π½Ρ‚ΠΈ-GΞ² эквивалСнтноС количСство сСнсоров, ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½Π½ΠΎΠ΅ ΠΏΠΎ флуорСсцСнции mCitrine, Π·Π°Π³Ρ€ΡƒΠΆΠ°Π»ΠΈ Π² Π³Π΅Π»ΠΈ SDS-PAGE (10% ΠΏΠΎΠ»ΠΈΠ°ΠΊΡ€ΠΈΠ»Π°ΠΌΠΈΠ΄). Π“Π΅Π»ΠΈ Π²ΠΈΠ·ΡƒΠ°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ для опрСдСлСния флуорСсцСнции mCitrine (Π²ΠΎΠ·Π±ΡƒΠΆΠ΄Π΅Π½ΠΈΠ΅ 488 Π½ΠΌ, эмиссия 520 Π½ΠΌ, пропускная ΡΠΏΠΎΡΠΎΠ±Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ 40 Π½ΠΌ) с использованиСм Typhoon Gel Imager (GE Healthcare). Π“Π΅Π»ΠΈ пСрСносили Π½Π° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ ΠΈΠ· ΠŸΠ’Π”Π€ Π½Π° Ρ‚Ρ€ΠΈ часа ΠΏΡ€ΠΈ 300 мА. Анти-HA ΠΈ Π°Π½Ρ‚ΠΈ-GΞ² Π±Π»ΠΎΠΊΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ 2% -Π½Ρ‹ΠΌ ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠΎΠΌ / трис-Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π½Ρ‹ΠΌ физиологичСским раствором с 1% Ρ‚Π²ΠΈΠ½ΠΎΠΌ (TBST) Π»ΠΈΠ±ΠΎ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ часа ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅, Π»ΠΈΠ±ΠΎ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΎΡ‡ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 4 Β° C.Π—Π°Ρ‚Π΅ΠΌ Π±Π»ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ с ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΠ΅Ρ€Π²ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°ΠΌΠΈ Π² Ρ€Π°Π·Π²Π΅Π΄Π΅Π½ΠΈΠΈ 1: 1000 Π² 5% ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠ΅ / TBST. Для экспСримСнта ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² GΞ² Π±Π»ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ TBST ΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ с ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ с пСроксидазой Ρ…Ρ€Π΅Π½Π° (HRP) 1: 5 000 ΠΈΠ»ΠΈ 1: 10 000 Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌΠΈ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π°ΠΌΠΈ козьСго Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π° ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² ΠΊΡ€ΠΎΠ»ΠΈΡ‡ΡŒΠ΅Π³ΠΎ IgG (0031460, Fisher Scientific) Π² 5% ΠΌΠΎΠ»ΠΎΠΊΠ΅ / TBST ΠΈΠ»ΠΈ 5 % BSA / TBST Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ часа ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅. Аналогично для экспСримСнтов ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² НА, Π±Π»ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ с ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½Ρ‹ΠΌ Π²Ρ‚ΠΎΡ€ΠΈΡ‡Π½Ρ‹ΠΌ Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»ΠΎΠΌ ΠΎΠ²Ρ†Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΈΠ² ΠΌΡ‹ΡˆΠΈΠ½ΠΎΠΉ HRP (GE Healthcare, NA931) Π² ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΠΈ 1: 10 000.ВсС Π±Π»ΠΎΡ‚Ρ‹ проявляли с использованиСм вСстСрн-Ρ…Π΅ΠΌΠΈΠ»ΡŽΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ HRP-субстрата Immobilon (Millipore). Π‘Π»ΠΎΡ‚Ρ‹ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π°Π»ΠΈ с использованиСм систСмы ChemiDoc-It Imaging (UVP). Π˜Π·ΠΎΠ±Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½ΠΈΡ Π³Π΅Π»Π΅ΠΉ ΠΈ Π±Π»ΠΎΡ‚ΠΎΠ² Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ с использованиСм ImageJ (NIH).

Анализы Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°

Анализы Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° слСдовали Ρ€Π°Π½Π΅Π΅ ΠΎΠΏΡƒΠ±Π»ΠΈΠΊΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠΌΡƒ ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠΎΠ»Ρƒ 39 . ЗначСния Bmax ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠΈ 2,5, 5 ΠΈ 10 ΠΌΠΊΠ³ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ с 5 нМ [ 3 H] -Π΄ΠΈΠ³ΠΈΠ΄Ρ€ΠΎΠ°Π»ΡŒΠΏΡ€Π΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ»Π° ([ 3 H] -DHA; PerkinElmer) Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 90 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅ Π² трис-Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π½ΠΎΠΌ растворС. ЀизиологичСский раствор (TBS) pH 7.4. ΠžΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Ρ‹ пСрСносили Π½Π° ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½Ρ‹ GF / C, ΠΏΡ€Π΅Π΄Π²Π°Ρ€ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ 0,3% раствором PEI Π² TBS, Ρ‚Ρ‰Π°Ρ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΠΎ ΠΏΡ€ΠΎΠΌΡ‹Π²Π°Π»ΠΈ Ρ…ΠΎΠ»ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ΠΌ TBS ΠΈ ΡΡƒΡˆΠΈΠ»ΠΈ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π½ΠΎΡ‡ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅. ПослС добавлСния сцинтилляционной Тидкости (Microscint0, PerkinElmer) Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ измСряли с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ 96-Π»ΡƒΠ½ΠΎΡ‡Π½ΠΎΠ³ΠΎ сцинтилляционного счСтчика (TopCount, PerkinElmer. НСспСцифичСскоС связываниС ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠΏΡ€Π°Π½ΠΎΠ»ΠΎΠ»ΠΎΠΌ 10 мкМ, ΠΈ ΠΎΠ½ΠΎ составило <1% ΠΎΡ‚ ΠΎΠ±Ρ‰Π΅Π³ΠΎ связывания. ΠšΠΎΠ½ΡΡ‚Π°Π½Ρ‚Π° диссоциации () K Π΄ ) связывания [ 3 H] -DHA опрСдСляли ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠΈ 7-10 пМ (7-10 Ρ„ΠΌΠΎΠ»ΡŒ / ΠΌΠ») Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Π° с Π²ΠΎΠ·Ρ€Π°ΡΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ концСнтрациями [ 3 H] -DHA. К Π” связывания [ 3 H] -DHA составляло ~ 0,2 нМ для Ξ²2-AR-G ΠΈ ΠΊΠΎΠ½Ρ‚Ρ€ΠΎΠ»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… сСнсоров. ΠšΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ‚Π½ΠΎΠ΅ Ρ‚ΠΎΡ€ΠΌΠΎΠΆΠ΅Π½ΠΈΠ΅ ( K ΠΈ ) ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±Π°Ρ†ΠΈΠΈ 7 пМ Ρ€Π΅Ρ†Π΅ΠΏΡ‚ΠΎΡ€Π° с Π²ΠΎΠ·Ρ€Π°ΡΡ‚Π°ΡŽΡ‰ΠΈΠΌΠΈ концСнтрациями ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π° (ISO) ΠΈΠ»ΠΈ холостого Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° Π² присутствии 2 нМ [ 3 H] -DHA Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 90 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅. Π Π°Π΄ΠΈΠΎΠ°ΠΊΡ‚ΠΈΠ²Π½ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π² ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Π°Ρ… для К Π” ΠΈ K ΠΈ экспСримСнтов Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Ρ€Π΅Π½ΠΎ, ΠΊΠ°ΠΊ описано Π²Ρ‹ΡˆΠ΅.Π‘Ρ‹Π»ΠΎ ΠΎΠ±Π½Π°Ρ€ΡƒΠΆΠ΅Π½ΠΎ, Ρ‡Ρ‚ΠΎ нСспСцифичСскоС связываниС Π²ΠΎ всСх случаях составляСт <1%. ΠšΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ экспСримСнт проводился, ΠΏΠΎ ΠΊΡ€Π°ΠΉΠ½Π΅ΠΉ ΠΌΠ΅Ρ€Π΅, Π΄Π²Π°ΠΆΠ΄Ρ‹ с Ρ€Π°Π·Π½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΏΡ€Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π°Ρ‚Π°ΠΌΠΈ ΠΌΠ΅ΠΌΠ±Ρ€Π°Π½, с трСмя ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΌΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†Π°ΠΌΠΈ, ΠΏΡ€ΠΈΠ³ΠΎΡ‚ΠΎΠ²Π»Π΅Π½Π½Ρ‹ΠΌΠΈ для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ условия, для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ экспСримСнта.

Анализы Ρ†ΠΠœΠ€

28–32 Ρ‡ послС трансфСкции (XtremeGENE HP) ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ HEK293T, ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ сСнсор, собирали для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ Ρ†ΠΠœΠ€ с использованиСм Π±ΠΈΠΎΠ»ΡŽΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° Ρ†ΠΠœΠ€ Glo (Promega). ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ остороТно суспСндировали Π² исходной срСдС, подсчитывали с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π³Π΅ΠΌΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π° ΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (300 Π³, 3 ΠΌΠΈΠ½).Π‘ΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΉ объСм Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° D добавляли для достиТСния плотности 2 Γ— 10 6 ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π½Π° ΠΌΠ» -1 для Π±Π°Π·Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… экспСримСнтов ΠΈΠ»ΠΈ 4 Γ— 10 6 ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ Π½Π° ΠΌΠ» βˆ’1 для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² Π½Π° основС Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°. БуспСнзии ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ ΠΏΠΎΠΌΠ΅Ρ‰Π°Π»ΠΈ Π² 96-Π»ΡƒΠ½ΠΎΡ‡Π½Ρ‹Π΅ Π½Π΅ΠΏΡ€ΠΎΠ·Ρ€Π°Ρ‡Π½Ρ‹Π΅ ΠΊΡ€ΡƒΠ³Π»ΠΎΠ΄ΠΎΠ½Π½Ρ‹Π΅ ΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Ρ‹. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Π±Π°Π·Π°Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΡŽ Ρ†ΠΠœΠ€, ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π΅ D с Π΄ΠΎΠ±Π°Π²Π»Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ 0,25 мМ IBMX Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 15 ΠΌΠΈΠ½ ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C. Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Ρ€ΠΈΡ‚ΡŒ Π²Ρ‹Π·Π²Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ измСнСния ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ Ρ†ΠΠœΠ€, ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ с Ρ€Π°Π·Π»ΠΈΡ‡Π½ΠΎΠΉ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΠ΅ΠΉ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π° Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅.Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ Emax для ΠΏΡ€ΠΎΠ΄ΡƒΠΊΡ†ΠΈΠΈ Ρ†ΠΠœΠ€, ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ со 100 мкМ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π° ΠΈ 100 мкМ форсколина Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 3 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈ ΠΊΠΎΠΌΠ½Π°Ρ‚Π½ΠΎΠΉ Ρ‚Π΅ΠΌΠΏΠ΅Ρ€Π°Ρ‚ΡƒΡ€Π΅ ΠΈΠ»ΠΈ 37 Β° C. Для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² подавлСния Ρ†ΠΠœΠ€ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±Π°Ρ‚Ρ‹Π²Π°Π»ΠΈ 1 мкМ форсколином ΠΈ с Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄ΠΎΠΌ ΠΈΠ»ΠΈ Π±Π΅Π· Π½Π΅Π³ΠΎ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 15 ΠΌΠΈΠ½ΡƒΡ‚ ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C. ВпослСдствии ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΈ соблюдали ΠΏΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠΎΠ» Π² соотвСтствии с рСкомСндациями производитСля (Promega). Π›ΡŽΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ†ΠΈΡŽ измСряли с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ ΠΌΠΈΠΊΡ€ΠΎΠΏΠ»Π°Π½ΡˆΠ΅Ρ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π»ΡŽΠΌΠΈΠ½ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π°-Ρ€ΠΈΠ΄Π΅Ρ€Π° (SpectraMax M5e, Molecular Devices). Π£Ρ€ΠΎΠ²Π½ΠΈ Ρ†ΠΠœΠ€ (ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½Π°Ρ Π»ΡŽΠΌΠΈΠ½Π΅ΡΡ†Π΅Π½Ρ‚Π½Π°Ρ Π΅Π΄ΠΈΠ½ΠΈΡ†Π°, RLU) ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ вычитания нСтрансфицированного Ρ„ΠΎΠ½Π° ΠΈΠ· трансфицированных условий.ΠšΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ экспСримСнт ΠΈΠΌΠ΅Π» Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€Π΅ тСхничСских ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π° для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ условия ΠΈ Π±Ρ‹Π» нСзависимо ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π΅Π½ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ… Ρ€Π°Π· ( N > 3).

IP

1 Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ‹

28–32 Ρ‡ послС трансфСкции (XtremeGENE HP) ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ HEK293T, ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠ΅ ΡƒΠΊΠ°Π·Π°Π½Π½Ρ‹ΠΉ сСнсор, собирали для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ ΡƒΡ€ΠΎΠ²Π½Π΅ΠΉ IP 1 с использованиСм Π½Π°Π±ΠΎΡ€Π° для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° IP-One HTRF (Cisbio). ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ остороТно суспСндировали Π² исходной срСдС, подсчитывали с ΠΏΠΎΠΌΠΎΡ‰ΡŒΡŽ Π³Π΅ΠΌΠΎΡ†ΠΈΡ‚ΠΎΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π° ΠΈ Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€ΠΈΡ„ΡƒΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ (300 Π³, 3 ΠΌΠΈΠ½). Π‘ΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΉ объСм Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° StimB (CisBio: 10 мМ Hepes, 1 мМ CaCl 2 , 0.Добавляли 5 мМ MgCl 2 , 4,2 мМ KCl, 146 мМ NaCl, 5,5 мМ Π³Π»ΡŽΠΊΠΎΠ·Ρ‹, 50 мМ LiCl, pH 7,4) для достиТСния плотности 3 Γ— 10 6 ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ / ΠΌΠ» -1 . ΠšΠ»Π΅Ρ‚ΠΊΠΈ ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΈ 37 Β° C Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ 15 ΠΌΠΈΠ½. ΠŸΡ€ΠΎΡ‚ΠΎΠΊΠΎΠ» производитСля Π±Ρ‹Π» ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ для достиТСния высокого ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ сигнал / ΡˆΡƒΠΌ. 150 ΠΌΠΊΠ» суспСнзии ΠΈΠ½ΠΊΡƒΠ±ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² Ρ‚Π΅Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ часа с 30 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° для лизиса (Cisbio), 54 ΠΌΠΊΠ» Π±ΡƒΡ„Π΅Ρ€Π° StimB, 6 ΠΌΠΊΠ» IP 1 , ΠΊΠΎΠ½ΡŠΡŽΠ³ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ с краситСлСм d2, ΠΈ 6 ΠΌΠΊΠ» ΠΌΠ΅Ρ‡Π΅Π½Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ‚Π΅Ρ€Π±ΠΈΠ΅Π²Ρ‹ΠΌ ΠΊΡ€ΠΈΠΏΡ‚Π°Ρ‚ΠΎΠΌ моноклонального Π°Π½Ρ‚ΠΈΡ‚Π΅Π»Π° Π°Π½Ρ‚ΠΈ-IP 1 .IP 1 FRET-спСктры Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ возбуТдСния ΠΎΠ±Ρ€Π°Π·Ρ†ΠΎΠ² ΠΏΡ€ΠΈ 340 Π½ΠΌ (полоса пропускания 15 Π½ΠΌ). ΠŸΠΎΠ΄ΡΡ‡Π΅Ρ‚ эмиссии рСгистрировали Π² Π΄ΠΈΠ°ΠΏΠ°Π·ΠΎΠ½Π΅ 600–700 Π½ΠΌ (полоса пропускания 10 Π½ΠΌ) с использованиСм Π΄Π»ΠΈΠ½Π½ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ…ΠΎΠ΄Π½ΠΎΠ³ΠΎ Ρ„ΠΈΠ»ΡŒΡ‚Ρ€Π° 475 Π½ΠΌ (FSQ GG475, Newport). Π˜ΡΡ…ΠΎΠ΄Π½Ρ‹ΠΉ сигнал IP 1 Π±Ρ‹Π» рассчитан ΠΈΠ· ΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ 665 Π½ΠΌ ΠΊ 620 Π½ΠΌ. Π‘Π°Π·Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ сигнал IP 1 ΠΊΠΎΡ€Ρ€Π΅ΠΊΡ‚ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ вычитания ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ нСтрансфицированных IP 1 ΠΈΠ· ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ, ΡΠΊΡΠΏΡ€Π΅ΡΡΠΈΡ€ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΡ… трансфСцированный сСнсор. Для экспСримСнтов с Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°ΠΌΠΈ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ прСдставлСны ΠΊΠ°ΠΊ ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½Π΅Π½ΠΈΠ΅ исходного ΡΠΎΠΎΡ‚Π½ΠΎΡˆΠ΅Π½ΠΈΡ IP 1 послС ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠΈ лСкарствСнным срСдством.ΠšΠ°ΠΆΠ΄Ρ‹ΠΉ экспСримСнт ΠΈΠΌΠ΅Π» Ρ‡Π΅Ρ‚Ρ‹Ρ€Π΅ ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π° для ΠΊΠ°ΠΆΠ΄ΠΎΠ³ΠΎ условия ΠΈ Π±Ρ‹Π» нСзависимо ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π΅Π½ Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ… Ρ€Π°Π· ( N > 3).

Анализ ΠΊΡ€ΠΈΠ²Ρ‹Ρ… концСнтрация-ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ ΠΈ Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎ-Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π½Ρ‹Π΅ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Ρ‹

Π”Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ Π² GraphPad Prism 7.0c (Graphpad Software, Inc.) для получСния Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠΉ EC 50 для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² накоплСния Ξ”FRET ΠΈ Ρ†ΠΠœΠ€ ΠΈ IC 50 , К ΠΈ , К Π” ЗначСния для Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΎΠ² связывания Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎ-Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π°.Π‘ΠΈΠ³ΠΌΠΎΠΈΠ΄Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Π΅ ΠΊΡ€ΠΈΠ²Ρ‹Π΅ ΠΈΠ· экспСримСнтов с Ξ”FRET ΠΈ Ρ†ΠΠœΠ€ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·ΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈ с использованиСм аппроксимации ΠΊΡ€ΠΈΠ²ΠΎΠΉ Π½Π΅Π»ΠΈΠ½Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠΉ рСгрСссии с использованиСм Π»ΠΎΠ³Π°Ρ€ΠΈΡ„ΠΌΠ° (агонист ΠΈΠ»ΠΈ ΠΈΠ½Π³ΠΈΠ±ΠΈΡ‚ΠΎΡ€) Π² зависимости ΠΎΡ‚ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚Π° (Ρ‚Ρ€ΠΈ ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π°). ΠšΠΎΠ½ΡΡ‚Π°Π½Ρ‚Π° равновСсной диссоциации для связывания ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π° с сСнсорами Ξ²2-AR-Gs ( K ΠΈ ) ΠΈ IC 50 Π±Ρ‹Π»ΠΈ рассчитаны ΠΏΡƒΡ‚Π΅ΠΌ ΠΏΠΎΠ΄Π±ΠΎΡ€Π° ΠΊΡ€ΠΈΠ²ΠΎΠΉ связывания Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° с использованиСм Π½Π΅Π»ΠΈΠ½Π΅ΠΉΠ½ΠΎΠ³ΠΎ рСгрСссионного Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° с ΠΎΠ΄Π½ΠΈΠΌ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹ΠΌ сайтом — ΠΏΠΎΠ΄Π³ΠΎΠ½ΠΊΠ° K ΠΈ ΠΈΠ»ΠΈ ΠΎΠ΄ΠΈΠ½ ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ‚Π½Ρ‹ΠΉ сайт ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‚ ΠΏΠ°Ρ€Π°ΠΌΠ΅Ρ‚Ρ€Π°ΠΌ logIC 5O соотвСтствСнно.{n}} $

Π³Π΄Π΅ E макс — это ΠΌΠ°ΠΊΡΠΈΠΌΠ°Π»ΡŒΠ½Ρ‹ΠΉ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ Ρ†ΠΠœΠ€ систСмы, ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΠ²Π°Π΅ΠΌΡ‹ΠΉ ΠΎΠ±Ρ€Π°Π±ΠΎΡ‚ΠΊΠΎΠΉ ΠΊΠ»Π΅Ρ‚ΠΎΠΊ 100 мкМ форсколина ΠΈ 100 мкМ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π°, E прСдставляСт собой ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ Ρ†ΠΠœΠ€ Π½Π° ΠΈΠ·ΠΌΠ΅Π½ΡΡŽΡ‰ΡƒΡŽΡΡ ΠΊΠΎΠ½Ρ†Π΅Π½Ρ‚Ρ€Π°Ρ†ΠΈΡŽ ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»Π° ([ A ]) ΠΈ n прСдставляСт собой Π½Π°ΠΊΠ»ΠΎΠ½ Ρ„ΡƒΠ½ΠΊΡ†ΠΈΠΈ прСобразоватСля, которая связываСт Π·Π°Π½ΡΡ‚ΠΎΡΡ‚ΡŒ Π»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° с ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΠΎΠΌ. К А Π—Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ Π±Ρ‹Π»ΠΎ ΠΎΠ³Ρ€Π°Π½ΠΈΡ‡Π΅Π½ΠΎ ΡΠΎΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚ΡΡ‚Π²ΡƒΡŽΡ‰ΠΈΠΌ Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠ΅ΠΌ K ΠΈ ЗначСния ΠΏΠΎΠ»ΡƒΡ‡Π΅Π½Ρ‹ ΠΈΠ· ΠΊΠΎΠ½ΠΊΡƒΡ€Π΅Π½Ρ‚Π½ΠΎΠ³ΠΎ Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·Π° связывания Ρ€Π°Π΄ΠΈΠΎΠ»ΠΈΠ³Π°Π½Π΄Π° (см. Π’Ρ‹ΡˆΠ΅).ЗначСния 1 / Ο„ Π±Ρ‹Π»ΠΈ рассчитаны для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ Π΄ΠΎΠ»ΠΈ слияния Ξ²2-AR-Gs, связанного с ΠΈΠ·ΠΎΠΏΡ€ΠΎΡ‚Π΅Ρ€Π΅Π½ΠΎΠ»ΠΎΠΌ, которая Π³Π΅Π½Π΅Ρ€ΠΈΡ€ΡƒΠ΅Ρ‚ ΠΏΠΎΠ»ΠΎΠ²ΠΈΠ½Ρƒ максимального ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚Π° Ρ†ΠΠœΠ€ (см. Π”ΠΎΠΏΠΎΠ»Π½ΠΈΡ‚Π΅Π»ΡŒΠ½ΡƒΡŽ Ρ‚Π°Π±Π»ΠΈΡ†Ρƒ 5).

БтатистичСский Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ·

Π”Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π²Ρ‹Ρ€Π°ΠΆΠ΅Π½Ρ‹ Π² Π²ΠΈΠ΄Π΅ срСдних Π·Π½Π°Ρ‡Π΅Π½ΠΈΠΉ Β± S.E.M. ЭкспСримСнты ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈΡΡŒ нСзависимо Π½Π΅ ΠΌΠ΅Π½Π΅Π΅ Ρ‚Ρ€Π΅Ρ… Ρ€Π°Π· с 3–6 тСхничСскими ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π°ΠΌΠΈ Π½Π° ΠΎΠ΄Π½ΠΎ условиС ( N > 3). БтатистичСский Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· выполняли с использованиСм GraphPad Prism 7.0c (Graphpad Software, Inc.). Π‘Ρ‚Π°Ρ‚ΠΈΡΡ‚ΠΈΡ‡Π΅ΡΠΊΡƒΡŽ Π·Π½Π°Ρ‡ΠΈΠΌΠΎΡΡ‚ΡŒ для ΠΎΡ‚Π΄Π΅Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… экспСримСнтов ΠΏΡ€ΠΎΠ²ΠΎΠ΄ΠΈΠ»ΠΈ с использованиСм ΠΏΠ°Ρ€Π½ΠΎΠ³ΠΎ t-критСрия Π‘Ρ‚ΡŒΡŽΠ΄Π΅Π½Ρ‚Π°.Π§Ρ‚ΠΎΠ±Ρ‹ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΈΡ‚ΡŒ, ΠΊΠ°ΠΊ Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π²Π°Ρ€ΡŒΠΈΡ€ΠΎΠ²Π°Π»ΠΈΡΡŒ Π² ΡΠΊΡΠΏΠ΅Ρ€ΠΈΠΌΠ΅Π½Ρ‚Π°Π»ΡŒΠ½Ρ‹Ρ… ΠΏΠΎΠ²Ρ‚ΠΎΡ€Π°Ρ…, Π΄Π°Π½Π½Ρ‹Π΅ Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΎΠ±ΡŠΠ΅Π΄ΠΈΠ½Π΅Π½Ρ‹ ΠΈ для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ значимости Π±Ρ‹Π»ΠΈ ΠΏΡ€ΠΎΠ²Π΅Π΄Π΅Π½Ρ‹ ΠΏΠ°Ρ€Π½Ρ‹Π΅ ΠΈΠ»ΠΈ Π½Π΅ΠΏΠ°Ρ€Π½Ρ‹Π΅ t-ΠΊΡ€ΠΈΡ‚Π΅Ρ€ΠΈΠΈ Π‘Ρ‚ΡŒΡŽΠ΄Π΅Π½Ρ‚Π°. ΠžΠ΄Π½ΠΎΡΡ‚ΠΎΡ€ΠΎΠ½Π½ΠΈΠΉ диспСрсионный Π°Π½Π°Π»ΠΈΠ· ANOVA с пост-тСстом Вьюки Π±Ρ‹Π» Π²Ρ‹ΠΏΠΎΠ»Π½Π΅Π½ для ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠΈ значимости ΠΏΡ€ΠΈ ΠΎΡ†Π΅Π½ΠΊΠ΅ сравнСний ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ нСсколькими условиями (рис. 3d, e, g) ΠΈΠ»ΠΈ ΠΌΠ΅ΠΆΠ΄Ρƒ слияниями (рис. 5–6) со значСниями p * p ≀ 0,05 ; ** p ≀ 0,01 ; *** p ≀ 0,001 ; **** p ≀ 0.

ΠžΡΡ‚Π°Π²ΠΈΡ‚ΡŒ ΠΎΡ‚Π²Π΅Ρ‚